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品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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192-19081 |
for Cell Culture | 100uL | – | 3,700.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
StemSure™ on-feeder hPSC培养基
人ES/iPS细胞培养用液体培养基
人ES/iPS细胞培养用液体培养基
StemSure® on-feeder hPSC培养基
本产品是用于在饲养层细胞上培养人ES/iPS细胞的培养基。
由于已经预先混合了基础培养基，血清替代品，氨基酸溶液，还原剂等，可以节省制备培养基的时间。由于不含bFGF，请在使用前加入bFGF。
◆特点
● 优秀的未分化维持性
● 预混型，仅需添加bFGF即可使用。
◆实验项目
● 无菌试验
● pH
● 渗透压
● 内毒素
● 支原体检测
◆数据
■ 细胞形态
■ 碱性磷酸酶染色
使用本产品和其他公司同等产品培养人iPS细胞201B7株，显示了传代3次后碱性磷酸酶的染色结果。可观察到使用本产品的每个培养皿中的分化集落数量很少，确认其具有良好的未分化维持性能。
◆产品列表
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
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195-18275 |
StemSure® on-feeder hPSC Medium |
细胞培养用 |
500 mL |
◆相关产品
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
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064-04541 |
Fibroblast Growth Factor(basic), Human, recombinant [bFGF/FGFb/FGF2] |
细胞生物学用 |
50 μg |
|
060-04543 |
100 μg |
||
|
064-05381 |
Fibroblast Growth Factor(basic),Human, recombinant, Animal-derived-free [bFGF/FGFb/FGF2] |
细胞生物学用 |
50 μg |
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068-05384 |
100 μg |
||
|
030-24021 |
CultureSure™ Y-27632 endotoxin, mycoplasma testedCultureSure™ Y-27632内毒素，支原体测试完成 |
细胞培养用 |
1 mg |
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036-24023 |
5 mg |
||
|
034-24024 |
25 mg |
||
|
253-00591 |
5mmol/L Y-27632 Solution |
细胞培养用 |
300 μL |
|
039-24591 |
CultureSure™ 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-freeCultureSure™ 10mmol/L Y-27632溶液，无动物源 |
细胞培养用 |
300 μL |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
StemSure® hPSC培养基△
人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基
人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基
StemSure® hPSC培养基△
本产品是一款可在无饲养层条件下维持培养人多能干细胞（人ES细胞和人iPS细胞）的无血清培养基。由于原材料中不含动物来源成分，以及BSA和HSA等白蛋白，所以无批间差异，可实现稳定培养。但本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）。
◆ 特点
● 可在无饲养层条件下培养人ES细胞以及人iPS细胞的无血清培养基
● 每批次都使用人iPS细胞201B7株进行质量检测
● 不使用动物来源成分
● 非药用毒物及剧毒物，易于处理和储存。
● 不含白蛋白的低蛋白培养基
● 可与Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin等多种涂层剂联用
● 可与Accutase，TrypLE Select等解离液联用
● 传代时可通过添加Y-27632实现使用单细胞传代
◆测试项目
● 细胞增殖测试（使用人iPS细胞201B7株）
● 碱性磷酸酶染色（使用人iPS细胞201B7株）
● 无菌测试
● pH
● 渗透压
● 内毒素
● 支原体测试
◆使用注意事项
本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）。
本产品需冷冻（-20℃）储存。溶解后不可再次冷冻，建议在2~10℃条件下进行储存，并在1周内使用完毕。
◆人iPS细胞201B7株的培养
将使用A公司培养基（含BSA、无饲养层用）培养的人iPS细胞201B7株移植至StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。
细胞形态
在StemSure® hPSC培养基Δ中培养的人iPS细胞的细胞形态与A公司培养基培养的几乎相同，也没有观察到趋向分化的形态，可实现稳定培养。
细胞群倍加数
移植到StemSure® hPSC培养基Δ后，立即进行第1~5次传代。结果显示，StemSure® hPSC培养基Δ培养的细胞增殖情况更为良好。
<培养基组成>
StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/mL bFGF
<细胞接种数>
1×105 cells/well （使用6孔板）
未分化性能维持的确认
使用StemSure® hPSC培养基进行5次传代维持培养，确认到全部未分化标志物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）的表达。
※BC2LCN是一种对存在于人ES细胞/人iPS细胞膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素。
＜数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工程研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师＞
◆人ES细胞WA01株的培养
将使用A公司培养基（含BSA、无饲养层用）培养的人ES细胞WA01株移至StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。
StemSure® hPSC冻存液, AF
用于人iPS细胞冻存
用于人iPS细胞冻存
StemSure® hPSC 冻存液，AF
StemSure® hPSC 冻存液，AF 是无动物源成分的人 iPS 细胞用冻存液。本品含 DMSO。
◆特点
● 能以高细胞存活率冻存人 iPS 细胞
● 不含动物源成分
● 可以以缓慢冻结的方式进行冻存
● 可用于无饲养层培养的细胞
● 无需进行繁杂的试剂配制
● 无需程序降温
◆人 iPS 细胞冻存步骤
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冷 冻 |
1. 在除去人 iPS 细胞培养皿中的培养液，用 D-PBS（-）清洗后，用 Accutase 等分散细胞。 |
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2. 添加含有 10 µmol/L Y-27632 的人 iPS 细胞用培养基（hPSC 培养基（+ROCKi）），用移液器吹散成单细胞。 |
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3. 将吹打分散后的细胞悬浮液移至样本管中，离心（1,000 rpm，３分钟，室温）后，除去上清液。 |
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4. 添加 hPSC 培养基（+ROCKi），用移液器悬浮。 |
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|
5. 计算细胞数，将样本管离心（1,000 rpm，３分钟，室温）后，除去上清液。 |
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6. 利用本产品使细胞悬浮成 2×106 cells/mL，并以 500 µL/管进行分装。 |
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7. 在 -80°C 下冷冻后，在 -150°C 或者 -80°C 的条件下保存（长期保存建议保存在 -150°C）。 |
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复 苏 |
1. 添加 hPSC 培养基（+ROCKi）到冻存瓶中，复苏冷冻细胞。 |
|
2. 离心（室温下，1,000 rpm，３分钟）后，除去上清液，添加 hPSC 培养基（+ROCKi），使细胞悬浮。 |
|
|
3. 计算细胞数，以 2×105 cells/6 cm dish的条件接种 |
◆人iPS细胞201B7株的冻存
确认细胞存活率和细胞增殖率
将培养中的人 iPS 细胞 201B7 株分散成单细胞后，重悬于 StemSure® hPSC 冻存液，AF 中，在 -80°C下冻存２~４天。
确认冷冻复苏后的细胞存活率和细胞增殖率。反复冷冻复苏５次后，确认细胞、细胞集落的形态和各种未分化标记（Oct3/4、Nanog、BC2LCN）的表达。
确认细胞集落的形态
确认细胞存活率和细胞增殖率
结果表明，用 StemSure® hPSC 冻存液，AF 冻存的人 iPS 细胞显示出高细胞存活率和细胞增殖率。
另外还确认了各种未分化标记的表达。
◆人iPS细胞冻存步骤
使用用 StemSure® hPSC 冻存液，AF 冷冻复苏５次后的 iPS 细胞 201B7 株，形成胚叶体，βⅢ-Tubulin,α-SMA,AFP 的表达确认其分化成了三胚叶。
（胚叶体形成，三胚叶分化诱导时的培养基组成）
Stemsure D-MEM+SSR+2mol/L L-Glutamine+10mmol/L2-Mercaptoethanol +1×Non-essential Amino Acids Solution
测试项目：外观，应用试验（iPS 细胞 201B7株），无菌试验，内毒素，支原体测试
可用于ES干细胞的冻存液，请点击：StemSure细胞冻存液
通用动物细胞冻存液，请点击：CultureSure无血清细胞冻存液
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 197-17831 | StemSure® hPSC Freezing Medium, AF StemSure® hPSC冻存液，AF |
100 mL | 细胞培养用 |
StemSure® 细胞冻存液
人iPS细胞·小鼠 ES 细胞冻存用
人iPS 细胞·小鼠 ES 细胞冻存用
StemSure® 细胞冻存液 Update！！
本产品是可用于冻存以小鼠 ES 细胞为代表的各种通用细胞株的无血清型细胞冻存液。含 BSA 和 10% DMSO 。标准测试中用小鼠 ES 细胞 D3 株冻存、复苏，确认其细胞存活率。本产品采用缓慢冻存法冻存细胞，无需使用程序降温盒。
使用本产品对小鼠 ES 细胞 D3 株在 -80℃ 进行保存，可冻存２年；普通细胞在 -150℃ 下可冻存 30 个月，并且可维持很高的存活率。
另外，本产品已确认可用于冻存人 iPS 细胞。
◆特点
● 可在维持人 iPS 细胞、小鼠 ES 细胞未分化能力的状态下，直接进行冻存。
● 可在 -80℃ 下进行长时间冻存。
● 冻存的通用动物细胞株的细胞存活率好。
● 无血清型
● 无需自行配制试剂
● 无需使用程序降温盒
◆测试项目
● 细胞存活率时间（使用小鼠 ES 细胞 D3 株进行实验）
● 无菌实验
● 内毒素实验
● 支原体实验
◆使用方法
人 iPS 细胞的冻存
1. 冻存
① 去除人 iP S细胞培养皿中的营养液，用 PBS 清洗后，用 Accutase 等剥离细胞。
② 添加含有 10 μmol/L Y-27632的人 iPS 培养基（hPSC 培养基（+ROCKi）），用移液器吹打成单细胞。
③ 将吹打分散的细胞悬浮液移至样本管，离心（1,000 rpm，3 min，室温）后去除上清液。
④ 添加含 hPSC 培养基（+ROCKi）的培养基，用移液器悬浮。
⑤ 计算细胞数量。
⑥ 以１×106 cells/管分注在细胞悬浮液保存管中。
⑦ 离心（1,000 rpm，3 min，室温）后去除上清液。
⑧ 使用 50 μL/管本产品进行悬浮，在 -80℃ 下进行冻存。
2. 复苏
① 在冻存管中添加 hPSC 培养基（+ROCKi），复苏冻结细胞（不使用温水浴法）。
② 离心（1,000 rpm，3 min，室温）后去除上清，再次添加 hPSC 培养基（+ROCKi），悬浮。
③ 计算细胞数量。
④ 在培养皿中按照２×105 cells/6 cm 进行细胞培养。
小鼠ES细胞、通用动物细胞株的冻存
1. 冻存
① 收集细胞至样本管中。
② 离心，去除上清。
③ 在样本管中加入本产品，悬浮。
④ 分注至悬浮液保存管中。
⑤ 将保存管在-80℃冻洁一晚。
⑥ 保存于-150℃或-80℃
2. 复苏
① 将冻存管置于37℃的水浴槽中解冻。
② 在培养用的培养基中进行悬浮。
③ 离心去除上清后用培养基进行重悬。
④ 在培养容器内培养细胞。
◆人iPS 细胞 201B7 细胞系的冻存 Update！！
将人 iPS 细胞 201B7 株分散为单细胞后，在 StemSure® 冻存液中悬浮，并在-80℃下冻存４天。反复冻结、复苏３次之后，确认细胞存活率和各种未分化标记（Oct3/4、Sox2、SSEA-4、Tra-1-81）的表达。
细胞生存率
未分化标记表达的确认
◆小鼠 ES 细胞 D3 细胞系的冻存
-150℃保存（30个月）
-80℃保存（24个月）
<冻存>
① 在 1 mL本产品中悬浮１~2×106 cells，分注至冻存管中。
② 在 -80℃冻存１天后转移至-150℃冻存。或者在-80℃冻存。
<复苏>
③ 在37℃的温浴槽中复苏。
④ 在细胞培养基中悬浮、离心。
⑤ 弃上清，用细胞培养基重悬细胞并进行培养。
○确认细胞集落形成
培养细胞数：500个细胞/孔（含胶原蛋白涂层的６孔板）
培养时间：10天
◆冻存通用动物细胞系后的细胞存活率
用 StemSure® 细胞冻存液冻存各种动物细胞株。可确认到冻存30个月后仍维持高存活率，且复苏后细胞可移植。
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细胞种类 |
存活率（%） |
细胞移植 |
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|
2个月 |
4个月 |
30个月 |
||
|
人 |
||||
|
HeLa |
97 |
93 |
97 |
○ |
|
293T |
96 |
95 |
95 |
○ |
|
K562 |
91 |
84 |
84 |
○ |
|
灵长类 |
||||
|
COS-7 |
97 |
93 |
92 |
○ |
|
Vero |
95 |
94 |
91 |
○ |
|
狗 |
||||
|
MDCK |
98 |
99 |
100 |
○ |
|
小鼠 |
||||
|
NIH/3T3 |
93 |
93 |
89 |
○ |
|
P19 |
93 |
76 |
77 |
○ |
|
STO |
90 |
91 |
91 |
○ |
|
L929 |
94 |
90 |
91 |
○ |
|
仓鼠 |
||||
|
CHO |
97 |
96 |
98 |
○ |
<冻存>
① 在 1 mL本品中悬浮 1~2×106 cells，分注至冻存管中。
② 在-80℃冻存1天后转移至-150℃分别冻存２个月、４个月、30个月。
<复苏>
③ 在37℃的水浴槽中复苏。
④ 细胞培养用培养基中悬浮、离心。
★其他冻存液★
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
容量 |
|
031-24051 |
CultureSure™ DMSOCultureSure™ 二甲基亚砜 |
细胞培养用 |
10 mL×10 |
|
039-23511 |
CultureSure™ Freezing Medium |
细胞培养用 |
10 mL |
◆相关产品
★StemSure® 系列★
本系列产品适用于培养 ES 细胞和 iPS 细胞。每个批次产品都适用小鼠 ES 细胞 D3 细胞系进行品质实验检测。
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
容量 |
|
197-16275 |
StemSure® D-MEM (High Glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate |
细胞培养用 |
500 mL |
|
191-18375 |
Stemsure® Serum Replacement |
细胞培养用 |
500 mL |
|
198-15781 |
StemSure® 10 mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution ( × 100) |
细胞培养用 |
100 mL |
|
195-15791 |
StemSure® 50 mmol/L Monothioglycerol Solution ( × 100) |
细胞培养用 |
100 mL |
|
190-15805 |
StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution |
细胞培养用 |
500 mL |
|
199-16051 |
StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution |
细胞培养用 |
106 units |
|
195-16053 |
StemSure® LIF, Mouse,recombinant, Solution |
细胞培养用 |
106 units×10 |
★rBC2LCN-FITC★
rBC2LCN 可特异性识别未分化的人ES/iPS细胞。将本产品添加至含有人ES/iPS细胞的培养液中，可对活性状态下的未分化细胞进行染色。<详情>
★液体培养基·细胞培养用试剂★
FUJIFILM Wako 充分准备了以液体培养基为代表的平衡盐溶液、细胞分离·分散用溶液、抗生物素溶液、细胞外基质等产品。<详情>
★ES·iPS细胞研究用试剂★
2007年 iPS 细胞树突发表后，许多与iPS细胞有关的文献被发表出来。FUJIFILM Wako 推出了在各个文献中都有所报道的与维持ES细胞·iPS细胞的未分化能和分化诱导相关的低分子化合物。<PDF下载>
★LIF，人，重组体，培养上清★
LIF 具有抑制小鼠 ES 细胞分化的作用，因此可在培养细胞时，用来维持 ES 细胞的未分化状态。<详情>
无动物源成分的干细胞冻存液，请点击：StemSure® hPSC冻存液, AF
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 195-16031 | StemSure Freezing Medium StemSure细胞冻存液 |
100 mL | – | – |
ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品
StemSure® Serum Replacement
ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品
StemSure® Serum Replacement
本产品是ES细胞和iPS细胞培养中使用的血清代替品。血清含有分化诱导因子，会导致干细胞分化。使用本产品代替血清，可在ES和iPS细胞培养的同时，保持他们的未分化状态，达到稳定培养。
本产品不含剧毒物质，将其作为普通物质处理。
使用本产品配制培养基培养的小鼠ES细胞，可用于制备嵌合体小鼠，并确认其种系传递。
◆特点•优势
● 可用于嵌合体小鼠制备，并确认其种系传递。
● 作为血清替代品，用于小鼠ES细胞・人IPS细胞培养。
● 不含剧毒物质。
◆案例•应用
1、嵌合体小鼠的制备与种系传递Update！！
将组装 HaloTag® cDNA 的目标载体导入小鼠ES细胞，用含有 StemSure® Serum Replacement（SSR）的培养基培养。确认载体导入小鼠ES细胞后，将其注入至 ICR 小鼠的胚盘胞，并移植至 ICR 小鼠的子宫。得到的嵌合体小鼠与 C57BL/6J 小鼠交配，获得F1小鼠。
(1) 嵌合体小鼠
收集嵌合体小鼠的血液，用 TRITC（四甲基若丹明异硫氰酸盐）对 HaloTag® 蛋白质染色。发现小鼠ES细胞源的 HaloTag® 的血液被染色，可确认为嵌合化。
(2) F1小鼠
F1小鼠的血液发现 HaloTag® 存在，可确认用 SSR 培养基培养的ES细胞嵌合小鼠能够正常存活。
2、人iPS细胞201B7的培养
(1) 克隆形态与ALP染色
已确认可用 StemSure® Serum Replacement（SSR）培养人iPS细胞 201B7 株。ALP 染色呈阳性。
<培养基组成>
D-MEM/Ham's F-12 + 20% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine +1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 5 ng/mL bFGF
(2) 未分化标记的发现
使用 StemSure® Serum Replacement（SSR）培养的人iPS细胞201B7株，确认各种未分化标记（Sox2, Oct3/4, SSEA-3, SSEA-4, Tra-1-81）呈阳性。
3、小鼠ES细胞D3的培养
(1) 细胞形态与ALP染色
使用 StemSure® Serum Replacement（SSR）培养小鼠ES细胞D3，能观察到小鼠ES细胞群特有的光泽，ALP染色呈阳性。
(2) 细胞增殖曲线
用不同培养基培养小鼠ES细胞D3进行14继代培养，比较细胞增殖。
如下图所示StemSure® 系列与Ａ公司有同等的性能。
< StemSure® 系列培养基组成>
StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF
（使用胶原包被的12孔板）
(3) 细胞群倍加数*
使用不同培养基对小鼠ES细胞D3进行继代培养，检查培养天数与细胞群倍加数的关系。
下图显示 StemSure® 系列与Ａ公司产品的细胞群倍加数相同。
*细胞群倍加数 cell population doubling level，缩写PDL，指从培养开始至现在细胞群的倍增次数。
<培养基组成>
StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/ml StemSure® LIF
（使用胶原包被的12孔板）
(4) 未分化标记的检测
使用 StemSure® 系列对小鼠ES细胞D3进行５代继代培养，各种未分化标记（Nanog, Oct3/4, Sox2, SSEA-1）呈阳性。
<培养基组成>
StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF
4、畸形瘤的形成
用 StemSure® 系列对小鼠ES细胞D3进行继代培养。对免疫不全小鼠的皮下注射培养后细胞。在形成皮下畸形瘤，其内部检测出神经组织（外胚叶源）、软骨组织（中胚叶源）、管腔结构纤毛上皮（内胚叶源）。
<培养基组成 >
StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF
 |
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ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品 |
★StemSure® 系列★
StemSure® 系列可培养ES细胞和iPS細胞。使用小鼠ES细胞D3检测每批产品的品质。
● StemSure® D-MEM・巯基乙醇，硫代甘油
● StemSure® 明胶溶液
● StemSure® LIF, 小鼠, 重组. 溶液,
● StemSure® 冻存溶液
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产品编号 |
产品名称 |
等 级 |
规 格 |
价格 |
保存温度・法规情报 |
|
|
197-16275 |
StemSure® D-MEM (High Glucose) with Phenol |
细胞培养用 |
500 mL |
询价 |
||
|
198-15781 |
StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution |
细胞培养用 |
100 mL |
询价 |
||
|
195-15791 |
StemSure® 50mmol/L Monothioglycerol Solution |
细胞培养用 |
100 mL |
询价 |
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|
190-15805 |
StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution |
细胞培养用 |
500 mL |
询价 |
||
|
199-16051 |
StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution |
细胞培养用 |
106 units 106 units×10 |
询价 |
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195-16031 |
StemSure® Freezing Medium |
细胞培养用 |
100 mL |
询价 | ||
已有案例引用的培养基配方
iPSC培养基组成如下：含15％StemSure Serum Replacement（197-16775; Wako Pure Chemical Industries） DMEM / F12，1％抗生素 – 抗真菌混合溶液，1％非必需氨基酸（139-15651; Wako Pure Chemical Industries ），2mM谷氨酸（16948-004; Nacalai Tesque）和0.1mMβ-巯基乙醇（21438-82; Nacalai Tesque）。文献全文请点击参考文献页面。
|
1. |
Obora, K., Onodera, Y., Takehara, T., Frampton, J., Hasei, J., Ozaki, T., … & Fukuda, K. (2017). Inflammation-induced miRNA-155 inhibits self-renewal of neural stem cells via suppression of CCAAT/enhancer binding protein β (C/EBPβ) expression. Scientific reports, 7, 43604.【mouse neural stem cell (NSC)】 |
|
2. |
Aihara, A., Koike, T., Abe, N., Nakamura, S., Sawaguchi, A., Nakamura, T., … & Eto, K. (2017). Novel TPO receptor agonist TA-316 contributes to platelet biogenesis from human iPS cells. Blood advances, 1(7), 468-476. |
|
3. |
Katayama, M., Kiyono, T., Kuroda, K., Ueda, K., Onuma, M., Shirakawa, H., & Fukuda, T. (2019). Rat-derived feeder cells immortalized by expression of mutant CDK4, cyclin D, and telomerase can support stem cell growth. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Cell Research, 1866(5), 945-956. |
|
4. |
Katayama, M., Hirayama, T., Horie, K., Kiyono, T., Donai, K., Takeda, S., … & Fukuda, T. (2016). Induced pluripotent stem cells with six reprogramming factors from prairie vole, which is an animal model for social behaviors. Cell transplantation, 25(5), 783-796.【prairie vole-derived iPSCs(pv-iPSCs)】 |
|
5. |
Kawata, M., Taniguchi, Y., Mori, D., Yano, F., Ohba, S., Chung, U. I., … & Saito, T. (2017). Different regulation of limb development by p63 transcript variants. PloS one, 12(3), e0174122.【基因编辑小鼠iPS细胞】 |
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6. |
Bui, P. L., Nishimura, K., Mondejar, G. S., Kumar, A., Aizawa, S., Murano, K., … & Ito, Y. (2019). Template Activating Factor-I α Regulates Retroviral Silencing during Reprogramming. Cell reports, 29(7), 1909-1922. 【Mouse embryonic fibroblasts (MEFs) 】 |
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7. |
Sumi, S., Kawagoe, M., Abe, R., Yanai, G., Yang, K. C., & Shirouzu, Y. (2017). A multiple-funnels cell culture insert for the scale-up production of uniform cell spheroids. Regenerative therapy, 7, 52-60. |
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8. |
古田明日香, & 中村肇伸. (2019). ES 細胞は代謝シフトを介して全能性細胞へと変化する. In 日本繁殖生物学会 講演要旨集 第 112 回日本繁殖生物学会大会 (pp. AW1-5). 日本繁殖生物学会. |
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9. |
Onozato, D., Yamashita, M., Nakanishi, A., Akagawa, T., Kida, Y., Ogawa, I., … & Matsunaga, T. (2018). Generation of intestinal organoids suitable for pharmacokinetic studies from human induced pluripotent stem cells. Drug Metabolism and Disposition, 46(11), 1572-1580. |
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10. |
Hayashi, Y., Matsumoto, J., Kumagai, S., Morishita, K., Xiang, L., Kobori, Y., … & Sumaru, K. (2018). Automated adherent cell elimination by a high-speed laser mediated by a light-responsive polymer. Communications biology, 1(1), 218.【hiPSC differentiation】 |
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11. |
Osafune, K., Toyoda, T., Takekawa, S., Nakamura, G., & Ito, R. (2019). U.S. Patent Application No. 16/490,394. |
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12. |
Kato, T., Kanemura, Y., Shofuda, T., & Fukusumi, H. (2016). U.S. Patent Application No. 14/900,975. |
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13. |
Eitoku, M., Kato, H., Suganuma, N., & Kiyosawa, H. (2018). Markers associated with neuron-specific Ube3a imprinting during neuronal differentiation of mouse embryonic stem cells. Cytotechnology, 70(1), 45-53. |
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14. |
Onozato, D., Yamashita, M., Fukuyama, R., Akagawa, T., Kida, Y., Koeda, A., … & Matsunaga, T. (2018). Efficient generation of Cynomolgus monkey induced pluripotent stem cell-derived intestinal organoids with pharmacokinetic functions. Stem cells and development, 27(15), 1033-1045. |
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15. |
Katayama, M., Hirayama, T., Kiyono, T., Onuma, M., Tani, T., Takeda, S., … & Fukuda, T. (2017). Immortalized prairie vole-derived fibroblasts (VMF-K4DTs) can be transformed into pluripotent stem cells and provide a useful tool with which to determine optimal reprogramming conditions. Journal of Reproduction and Development, 2016-164. |
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16. |
Matsuyama, A., & Okura, H. (2017). U.S. Patent No. 9,644,181. Washington, DC: U.S. Patent and Trademark Office. |
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17. |
Tomizawa, M. (2016). Culture Medium And Method For Inducing Differentiation of Pluripotent Stem Cells To Hepatoblasts. U.S. Patent Application No. 14/749,715. |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 191-18375 | Stemsure® Serum Replacement Stemsure®血清替代品 |
500 mL | 细胞培养用 |
Stemsure® LIF, 小鼠, 重组
分化诱导·分化标记
Stemsure® LIF，小鼠，重组
Stemsure® 系列使用小鼠 ES 细胞 D3 株进行实验测试（细胞增殖试验和菌落形成试验）和碱性磷酸酶（ALP）染色，是对细胞增殖和未分化能力有质量保证的产品系列。本产品是纯化自大肠杆菌中表达的小鼠 LIF。可用于小鼠 ES 细胞的培养。
◆产品概述
● 表达：大肠杆菌（在Ｃ端含有 6×His 标签）
● 活性：106 units/mL
● 单位的定义：在使用小鼠 ES 细胞株（D3 株）的细胞增殖促进试验中，当达到最大增殖度的 50% 时，在此增殖度下产品使用量的 1/20 相当于
● 1 unit
● 使用浓度：培养小鼠 ES 细胞株（D3株），建议使用终浓度为 1,000 units/mL
● 形状：D-PBS，1%BSA
● 0.2 µm 过滤灭菌
● 保存条件：-20℃ 保存。融解后请在 2-10℃ 保存，并尽快使用。
◆试验项目
● 实用试验（小鼠 ES 细胞）
● 支原体检测
● 无菌试验
● ALP 染色（小鼠 ES 细胞）
● 内毒素测试等等
◆细胞形态/未分化标记物在小鼠 ES 细胞 D3 株中的确认
● 集落形态和 ALP 染色 ●
使用本产品培养小鼠 ES 细胞 D3 株，可以观察到小鼠 ES 细胞特有光泽的细胞集落。同时确认了 ALP 染色呈阳性。
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细胞形态确认 |
ALP 染色 |
● 未分化标记物表达的确认 ●
使用本产品将小鼠 ES 细胞 D3 株继代培养８代，确认了各种未分化标记物呈阳性。
培养基组成
StemSure® D-MEM + 15％ SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2ME + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF
◆产品信息
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
|
199-16051 |
StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution StemSure® 白细胞抑制因子，小鼠，重组，溶液 |
106 units |
|
195-16053 |
106 units×10 |
◆相关产品
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
|
197-16275 |
StemSure® D-MEM(High Glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate StemSure® D-MEM（高糖）含酚红和丙酮酸钠 |
500 mL |
|
198-15781 |
StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution (×100) StemSure® 10mmol/L 2-巯基乙醇溶液（×100） |
100 mL |
|
195-15791 |
StemSure® 50mmol/l Monothioglycerol Solution(×100) StemSure® 50mmol/L 硫代甘油溶液（×100） |
100 mL |
|
191-18375 |
StemSure® Serum Replacement (SSR) Stemsure® 血清替代品（SSR） |
500 mL |
|
073-05391 |
200mmol/l L-Glutamine Solution (×100) 200mmol/l L-谷氨酰胺溶液（×100） |
100 mL |
|
168-23191 |
Penicillin-Streptomycin Solution (×100) 青霉素 – 链霉素溶液（×100） |
100 mL |
人多能性干细胞无血清培养基
StemSure® hPSC 培养基Δ
StemSure® hPSC 培养基Δ
人多能性干细胞无血清培养基
本产品是无饲养层条件下用于维持培养人ES细胞·iPS细胞的无血清,无动物源性成分的液体培养基。不含BSA及HAS等蛋白，批次间的差别较少，结果稳定。但是，本产品不含bFGF（碱性線成纤维细胞成长因子）。
◆特点
● 无血清、无饲养层培养人 ES· iPS 细胞
● 使用人 iPS 细胞 201B7 细胞系，进行每批次的质量检测
● 不含动物源成分
● 不属于医药用外毒物或剧毒物，保存及处理简单
● 不含蛋白的低蛋白培养基
● 可使用 Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin 等培养基质
● 可使用 Accutase, TrypLE Select 等解离液
● 传代培养时添加 Y-27632 可传代培养单细胞
◆检测项目
● 细胞繁殖能力测试（使用人iPS细胞201B7细胞系）
● 碱性磷酸酶染色（使用人iPS细胞201B7细胞系）
● 无菌检测
● pH
● 渗透压
● 内毒素
● 支原体检测
◆使用注意
● 本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞成长因子）。
● 本产品需冷藏（-20℃）。溶解后无需再冷冻，请保存于２～10℃，并在１周内使用完毕。
◆人iPS细胞201B7细胞系
将使用Ａ公司培养基（含有 BSA、使用动物源成分）培养的人iPS细胞201B7细胞系移植到 StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。
《 细胞形态 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养的人iPS细胞的形态与Ａ公司培养基的几乎相同，没有发生分化，稳定地进行了培养。
《 细胞群倍加数 》
对比移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ后的第１代到第５代的细胞，使用 StemSure® hPSC 培养基Δ的细胞繁殖状况更好。
＜ 培养基成分 ＞
StemSure® hPSC 培养基Δ + 35 ng/ml bFGF
＜ 细胞播种数 ＞
1×105 cells/well（使用６孔培养板）
《 未分化性标记表达确认 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至５代，观察到全部的未分化标记物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）。
※BC2LCN 是能与存在于人 ES ・iPS 细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
＜ 培养基成分 ＞
StemSure® hPSC 培养基Δ + 35 ng/ml bFGF
＜ 细胞播种数 ＞
1×105 cells/well（使用６孔培养板）
《 未分化性标记表达确认 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至５代，观察到全部的未分化标记物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）。
※BC2LCN 是能与存在于人 ES ・iPS 细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
＜数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师＞
◆人ES细胞201B7细胞系
将使用Ａ公司培养基（含有 BSA、使用动物源成分）培养的人ES细胞201B7细胞系移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ，进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。
《 细胞形态 》
使用Ａ公司培养基的细胞，细胞在第２代以后出现了分化。另一方面，使用 StemSure® hPSC 培养基Δ的细胞，没有发生分化，稳定地进行了培养。
《 细胞群倍增数 》
比较两者移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ后的第１代到第５代，细胞的繁殖能力没有差异。
＜ 培养基成分 ＞
StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/ml bFGF
＜ 细胞播种数 ＞
1×105 cells/well（使用６孔培养板）
《 未分化性维持確認 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至第６代，观察到全部的未分化标记物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）。
※BC2LCN 是能与存在于人ES ・iPS细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
＜数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤 弓弦老师＞
核型解析
对使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养到第27代的人iPS细胞进行了核型解析，没有发现染色体异常。
＜数据提供 独立行政法人国立成育医疗研究中心研究所 再生医疗中心 三浦巧老师、阿久津英憲老师＞
人iPS细胞201B7分化成三胚层
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ将人iPS细胞201B7细胞系培养至第３代，再使用 StemSure® 系列培养基进行驯化培养，可观察到 βⅢ-Tubulin、α-SMA、AFP，因此判断细胞形成胚体后，进行了三胚层分化。
＜ 培养基成分 ＞
StemSure® D-MEM + StemSure® Serum Replacement + 2 mmol/l L-Glutamine + 10 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoetanol + 1 x Non-essential Amino Acids Solution
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 197-17571 | StemSure® hPSC MediumΔ | 100ml | 用于细胞培养 | |
| 193-17573 | StemSure® hPSC MediumΔ | 100ml×4 | 用于细胞培养 | |
| 064-05381 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 50μg | 用于细胞培养 | |
| 068-05384 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 100μg | 用于细胞培养 | |
| 060-05383 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 1mg | 用于细胞培养 | |
| 257-00511 | Y-27632 | 1mg | 用于细胞培养 | |
| 253-00513 | Y-27632 | 5mg | 用于细胞培养 | |
| 251-00514 | Y-27632 | 25mg | 用于细胞培养 | |
| 253-00591 | 5mmol/l Y-27632 Solution | 300μl | 用于细胞培养 | |
| 220-02041 | Vitronectin(20-398 aa), Human, recombinant,Solution | 500μg | 生物化学用 | |
| 197-16275 | StemSure® D-MEM（High Glucose）with Phenol Red and Sodium Pyruvate | 500ml | 用于细胞培养 | |
| 197-16775 | StemSure® Serum Replacement | 500ml | 用于细胞培养 | |
| 198-15781 | StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution （×100） | 100ml | 用于细胞培养 | |
| 195-15791 | StemSure® 50mmol/l Monothioglycerol Solution （×100） | 100ml | 用于细胞培养 | |
| 190-15805 | StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution | 500ml | 用于细胞培养 | |
| 199-16051 | StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution | 106units | 用于细胞培养 | |
| 195-16053 | StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution | 106units×10 | 用于细胞培养 | |
| 195-16031 | StemSure® Freezing Medium | 100ml | 用于细胞培养 |
|
品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
197-16775 |
for Cell Culture | 500 ml | – |
替代品：191-18375 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
|
品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
199-18511 |
for Cell Culture | 100 ul | – |
替代品：192-19081 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
