Sphingosine-1-phosphate (S1P) is an agonist of S1P_1-5 receptors and a ligand of GPR3, GPR6 and GPR12. Sphingosine-1-phosphate is an intracellular second messenger and mobilizes Ca²⁺ as an extracellular ligand for G protein-coupled receptors^[1]. Sphingosine-1-phosphate is an important lipid mediator generated from Sphingomyelin (HY-113498) or other membrane phospholipids^[2].

S1P (1 μM) induces a significant Ca²⁺ releases in HEK293 cells under serum starvation conditions (1% FCS)^[1].
In a functional Ca²⁺ assay, Suramin (HY-B0879) alone does not exert any effect on intracellular Ca²⁺ release via gpr3, gpr6 or gpr12. In contrast, S1P (1 μM) induces Ca²⁺ release of gpr3, gpr6 and gpr12 in the presence of Suramin (HY-B0879) various concentrations in transfected HEK293 cells^[2].
In a functional Ca²⁺ assay,S1P (3-3000 nM) in the presence Suramin (300 μM), exhibits nanomolar EC₅₀ values for gpr3 (EC₅₀=29 nM), gpr6 (EC₅₀=15 nM) and gpr12 (EC₅₀=24 nM), rat gpr3 (EC₅₀=68 nM),respectively in HEK293 cells^[2].
S1P increases intracellular calcium levels in TAg-Jurkat cells expressing S1P1 and G_qi5, which allows for phospholipase C stimulation by G_i proteins, when used at a concentration of 200 nM, as well as in TAg-Jurkat cells expressing S1P2 and S1P3 receptors (EC₅₀s = 8 and 11 nM, respectively)^[3].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

379.47

C₁₈H₃₈NO₅P

26993-30-6

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

-20deg;C, sealed storage, away from moisture

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (sealed storage, away from moisture)

DMSO : 100 mg/mL (263.53 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C)

Ethanol : 20 mg/mL (52.71 mM; ultrasonic and adjust pH to 3 with HCl)

H₂O : 4 mg/mL (10.54 mM; ultrasonic and warming and adjust pH to >7.5 with 0.1 M Na)

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)。-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用； 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

• 1.

  请依序添加每种溶剂：;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

  Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (6.59 mM); Clear solution

  此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL (6.59 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。

  以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

  将 0.9 g 氯化钠，完全溶解于 100 mL ddH₂O 中，得到澄清透明的生理盐水溶液

• 2.

  请依序添加每种溶剂：;10% DMSO ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

  Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (6.59 mM); Clear solution

  此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL (6.59 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。

  以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。

  将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中，再用生理盐水定容至 10 mL，完全溶解，澄清透明
• 3.

  请依序添加每种溶剂：;10% DMSO ;; 90% corn oil

  Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (6.59 mM); Clear solution

  此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL (6.59 mM，饱和度未知) 的澄清溶液，此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。

  以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。

• 4.

  请依序添加每种溶剂：;10% EtOH ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

  Solubility: ≥ 2 mg/mL (5.27 mM); Clear solution

  此方案可获得 ≥ 2 mg/mL (5.27 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。

  以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

  将 0.9 g 氯化钠，完全溶解于 100 mL ddH₂O 中，得到澄清透明的生理盐水溶液

• 5.

  请依序添加每种溶剂：;10% EtOH ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

  Solubility: ≥ 2 mg/mL (5.27 mM); Clear solution

  此方案可获得 ≥ 2 mg/mL (5.27 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。

  以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。

  将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中，再用生理盐水定容至 10 mL，完全溶解，澄清透明
• 6.

  请依序添加每种溶剂：;10% EtOH ;; 90% corn oil

  Solubility: ≥ 2 mg/mL (5.27 mM); Clear solution

  此方案可获得 ≥ 2 mg/mL (5.27 mM，饱和度未知) 的澄清溶液，此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。

  以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。

• [1]. Teresa Sanchez, et al. Structural and Functional Characteristics of S1P Receptors. J Cell Biochem. 2004 Aug 1;92(5):913-22.

  [2]. Kirsten Uhlenbrock, et al. Sphingosine 1-phosphate Is a Ligand of the Human gpr3, gpr6 and gpr12 Family of Constitutively Active G Protein-Coupled Receptors. Cell Signal. 2002 Nov;14(11):941-53.

  [3]. S An, et al. Transduction of Intracellular Calcium Signals Through G Protein-Mediated Activation of Phospholipase C by Recombinant Sphingosine 1-phosphate Receptors. Mol Pharmacol. 1999 May;55(5):787-94