上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品,欢迎访问官网了解更多信息
特点:
·日本原装进口试剂盒
·固定和不固定都可使用
关联产品
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·固定和不固定都可使用
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·日本原装进口试剂盒
·固定和不固定都可使用
活动进行中
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凑单关联产品TOP5
NO.1. Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit 细胞凋亡检测
NO.2. Cell Counting Kit-8 细胞增殖毒性检测
NO.3. ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA- ROS检测
NO.4. Cellular Senescence Detection Kit 细胞衰老检测
NO.5. Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit 细胞凋亡检测
试剂盒内含
产品概述
DNA含量分析在流式细胞检测中,占有相当大的比例。通过这种方法,研究者可以进行抗癌药物的毒性评估,并对恶性肿瘤细胞的预后效果及进展程度进行分析。在细胞周期检测中,DNA含量也同样作为重要的分析手段而被广泛应用。通过细胞DNA含量的测定,可计算各细胞周期的百分率,也可通过DNA片段化检测、DNA双染标记等方法检测细胞凋亡。
Cell Cycle Assay Kit-PI/RNase Staining试剂盒,可快速完成细胞周期的分析,操作简便。本产品使用碘化丙啶 (PI) 作为DNA荧光染料,通过流式细胞术得到细胞周期中G0/G1,G2和S期细胞的比例。
所需的设备和材料
– 流式细胞仪(碘化丙啶PI:λex=535 nm,λem=617 nm)
– 37℃培养箱
– PBS缓冲液
– 1.5 ml微量管
– 100-1000 μl、20-200 μl、2-20 μl移液器
溶液制备
本产品在固定细胞及不细胞固定的情况下皆可使用。
配置Working solution (1 sample)
取500 μl Assay Buffer 后,分别加入25 μl PI Solution和2.5 μl RNase Solution。
*工作液易遇光分解,请在使用前立即配置并用铝箔纸包裹避光保存。
配置好的工作液1天内用完。
基本操作
非固定细胞
1. 将细胞密度调整为1-5×106cells/ml a)。
2. 取1 ml的细胞悬液加入到1.5 ml微型管中,在1,000×g离心3 min b)。
3. 去除上清液后加入1 ml PBS缓冲液清洗细胞,在1,000×g离心3 min。
4. 去除上清液后加入0.5 ml Working Solution。
5. 在4℃避光培养30 min。
6. 涡旋振荡使细胞分散,在37℃避光培养30 min。
7. 涡旋振荡使细胞分散,用尼龙筛网过滤,以去除样品中的细胞团块 c)。
8. 用流式细胞仪检测。
a) 贴壁细胞用胰蛋白酶-EDTA消化细胞后,用PBS洗涤并离心收集细胞。
b) 根据不同的细胞种类,需适当调整转速与离心时间。
c) 样品处理后,剩余部分无法继续保存并使用。
固定细胞
1. 将细胞密度调整为1-5×106cells/ml a)。
2. 取1 ml的细胞悬液加入到1.5 ml微型管中,在1,000×g 离心3 min。
3. 去除上清,并在细胞团中加入1 ml的-20℃保存的70%乙醇。
4. 涡旋振荡使细胞分散,在4℃下静置2 h b)。
5. 在1,000×g 离心3 min后,去除乙醇 c)。
6. 加入1 ml PBS缓冲液清洗细胞,在1,000×g 离心3 min。
7. 去除上清液后加入0.5 ml Working Solution。
8. 涡旋振荡使细胞分散,在37℃避光培养30 min。
9. 涡旋振荡使细胞分散,在4℃避光培养30 min。
10. 涡旋振荡使细胞分散,用尼龙筛网过滤,以去除样品中的细胞团块 d)。
11. 用流式细胞仪检测。
a) 贴壁细胞用胰蛋白酶-EDTA消化细胞后,用PBS洗涤并离心收集细胞。
b) 根据不同的细胞种类,需适当调整固定时间。
c) 根据不同的细胞种类,需适当调整转速与离心时间。
d) 样品处理后可以在4℃以下保存并继续使用,但是保存时间长短与细胞种类有关。
常见问题Q&A
Q1、C543用于分散细胞团聚的筛网的品牌、型号信息? |
A1:FALCON 5mL Polystyrene Round-Bottom Tube with Cell-Strainer Cap 型号:352235 |
Q2:实验需要在37度、4度环境中分别培养30min,这个先后顺序对实验结果有影响吗? |
A2:从做出的实验结果来看,没有影响。可以自由选择。 |
Q3:流式管作用是什么? |
A3:检测时必须将细胞悬液放入流式管中,流式管的最上方有滤膜,这层滤膜的作用是把细胞打散,使其不团聚,也方便流式仪器吸取细胞的时候更容易) |
关联产品
RNA稳定剂,RNase不可逆灭活剂
RNAstabilizer,Irrevesible RNase Inactivation Reagent
RNA稳定剂,RNase不可逆灭活剂
RNAstabilizer,Irrevesible RNase Inactivation Reagent
基因研究用 for Genetic Research
规格含量:3.5 mL(甲醇溶液)×1
制造商:FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation
储存条件:冷冻(干冰运输)
◆概述/使用案例
稳定剂是一种用于提高从肝脏、胰脏、肾脏等RNase含量丰富的器官组织中纯化的RNA储存稳定性的试剂。本品溶于甲醇,可配合二氧化硅载体等的核酸吸附过滤法的RNA纯化试剂使用,使样品来源RNase不可逆性地灭活,获得拥有优秀储存稳定性的高品质RNA。
特点
● 抑制巯基乙醇等还原剂重新活化失活RNase,使RNase不可逆性地灭活;
● 实现从肝脏、胰脏、肾脏等RNase含量丰富的器官中纯化储存稳定性高的RNA;
● 适用于现有的利用二氧化硅载体等的核酸吸附过滤法的RNA纯化试剂(Invitek公司、QIAGEN公司等),不影响回收率,可获得高品质RNA。
使用方法
1. 在通常的两个洗涤步骤中,向第一步洗涤液中添加容量1/10的RNA稳定剂溶液;
2. 吸附样品(RNA)前的操作,请依照试剂盒说明书进行;
3. 在吸附后的首次洗涤操作中,将添加了RNA稳定剂的洗涤液(用量请参照试剂盒说明书)加入核酸纯化柱中;
4. 静置20 min后,请按照试剂盒说明书所要求的条件进行离心过滤;
5. 第二次的洗涤液无需添加RNA稳定剂并依照试剂盒随附实验方案洗涤柱子,请务必进行两次RNA吸附后的柱洗涤(分别用含与不含RNA稳定剂
5. 的洗涤液各洗涤一次);
6. 随后,请按照试剂盒附带的实验步骤进行操作直至洗脱。
使用注意
适用于使用二氧化硅等的核酸吸附载体的过滤法的RNA纯化试剂盒的洗涤操作。
◆物性信息
外观:无色透明液体
◆产品列表
RNase Knockout RNA酶清除喷雾
RNase Knockout
RNase Knockout
RNase Knockout RNA酶清除喷雾
基因研究用 for Genetic Research
制造商:FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation
储存条件:室温
◆概述/使用案例
概述
RNase Knockout是一种使RNase失活的试剂。请在涉及到RNA的实验中,需要控制RNA污染的情况下使用。仅需喷洒在实验器材与实验台上并进行擦拭,即可使RNase失活。
品牌:Nippon Gene
CAS No.: 储存条件:-20℃ 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
313-02821 |
– | 0.4mL×5 | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
新冠肆虐两年,一波还未平息,一波又来侵袭,唯有预防和治疗齐头并进,才能适当抑制疫情的发展。相较于传统疫苗,mRNA疫苗有诸多优势。mRNA疫苗是一种新型的、预防传染病和慢性病的疫苗, mRNA疫苗可以让我们的细胞制造一种蛋白质,甚至只是蛋白质的一小部分,来触发免疫反应,它潜力无限。
如下图所示,mRNA疫苗是将外源靶抗原的基因序列通过转录、合成等工艺制备的mRNA通过特定的递送系统导入机体细胞,通过在体内表达目的蛋白,刺激机体产生特异性免疫学反应,从而使机体获得免疫保护的一种核酸制剂。然而所有与RNA相关的生物试验都会涉及到RNase的污染及RNA降解的预防问题,并且少量的RNase污染就会严重影响后面的实验结果。
mRNA疫苗质量控制
在mRNA疫苗的生产过程中以及任何生物制剂产品中,质量控制都是非常严格的!以mRNA制备为例,在转录模板中的杂质就有很多,如质粒DNA抽提过程中残留的RNaseA、宿主菌DNA、宿主菌RNA和宿主蛋白等,它们都会显著影响体外转录反应和转录mRNA的质量,需对模板的纯度进行严格的把关。在体外转录的过程中杂质的污染也会极大地影响mRNA疫苗的安全性和效力,例如被引入人体细胞的双链RNA和DNA-RNA杂交分子等能被细胞模式识别受体识别触发先天免疫反应,诱导I型干扰素的表达,降低蛋白质的翻译。研究证明,去除mRNA制备物中的污染物会降低先天免疫反应,并导致体外报告蛋白表达水平显著提高。
RNase-ExitusPlus™
在mRNA疫苗的生产以及其他与mRNA相关的生物制品中,RNase污染的清除尤为重要,德国Applichem研发的RNase-ExitusPlus™是一种非碱性、无腐蚀性且无致癌性的新型RNase清除液,它对RNase污染物具有很好的清除性能,是适用于任何表面的即用型RNase污染清除液,可用于实验室表面的清洁,如实验操作台、电泳设备、移液器和反应管等。
清除剂的独特优势
使用方法:
直接将RNase-ExitusPlus™喷到操作台表面作用10~15分钟,无菌湿布擦拭后即可,无需用水冲洗;
小贴士
处理效果
将干燥的RNase A放入反应管的样品1、3和4。然后,RNase A 样品用1ml的 H2O(3,4) 或RNase-ExitusPlus™ (1)处理,室温下放置5分钟。紧接着用1ml的无菌水清洗两次。然后在每个管子里放入从大肠杆菌得到的RNA 5ug。将10ug的新鲜分装RNase A添加到管4中,所有管在37° c孵育30分钟。5ug未处理的从大肠杆菌得到的RNA作为对照(C)。最后,加入缓冲液和将样本加入 1%琼脂糖凝胶电泳检测。
产品信息
产品名称 |
货号 |
规格 |
A7153.0500 |
500ml |
|
A7153.1000RF |
1L |
|
A7153.2500RF |
2.5L |
PanReac Applichem是欧洲生物化学试剂与制药原辅料生产商,ITW成员公司,已成为全球科研、知名CRO企业、大型制药、诊断、食品、化妆品等工业的重要供应商。全面提供细胞培养级、符合各国药典等生物制药上下游系列生物化学试剂,cGMP生产的原辅料。Applichem公司产品种类众多,覆盖领域广泛,产品级别丰富,性价比超高,包括实验室污染防治系列、实验室常用生化试剂、生物制药行业药典级与细胞培养级试剂,以及诊断研发工业中天然蛋白、酶、辅酶和底物等。
上海金畔生物科技有限公司致力于为广大客户提供专业高品质实验室公用产品,欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客户服务热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。
品牌:Nippon Gene
CAS No.: 储存条件:2-10℃ 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
318-06391 |
– | 0.5mL×5 | – | 2,400.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
在RNA的生物试验中,会涉及到RNase的污染及RNA降解的预防问题,例如在进行mRNA的反转录的RT-PCR及Real Time PCR过程;RNAi相关实验,例如用载体表达shRNA,可是涉及RNA合成,后续的RNA纯化,都需要求严格消除RNAse污染以避免RNA降解。少量的RNase就可以严重破坏实验结果。实验用到的试剂和耗材,指管和移液枪头都要求是无RNase污染的,或者DEPC处理过的。戴手套,不小心接触各种表面后,比如操作台面、桌面,冰箱把手等常用仪器,都要勤换手套,防止RNase污染所导致的RNA降解。
德国知名生化试剂公司AppliChem推出的RNase-ExitusPlus™ RNase(货号A7153)清除试剂有效地解决RNAse污染问题,预防RNA的降解。
RNase-ExitusPlus™ 是一种非碱性、无腐蚀性且无致癌性的新型RNase清除液。它对RNase污染物具有很好的清除性能,任何物体表面,包括微量离心管中内部都可以应用。
RNase-ExitusPlus™ 特点
催化组份的协同作用,导致蛋白质和RNase分子非常快速的失活,对RNase非酶促降解。
所有组分, 均易生物降解,对人类无害无毒。
不使用任何刺激性的酸碱性物质,不会腐蚀设备和材料。
试剂中含有少量酒精,不产生有毒气体。
操作简单,充分的喷洒表面,在完全干之前(10 至 15 分钟)擦去,此后无需再用无菌水清洗。
反应温度升至50 ° C 以上,可提升反应效率与活性。
RNase-ExitusPlus™ 使用说明
在RNA的生物试验中,会涉及到RNase的污染及RNA降解的预防问题,如在进行mRNA的反转录的RT-PCR及Real Time PCR过程;RNAi相关实验,比如用载体表达shRNA,可是涉及RNA合成,后继的RNA纯化,都需要求严格消除RNAse污染以避免RNA降解。少量的RNase就可以严重破坏实验结果
实验用到的试剂和耗材,指管和移液枪头都要求是无RNase污染的,或者DEPC处理过的。戴手套,不小心接触各种表面后,比如操作台面、桌面,冰箱把手等常用仪器,都要勤换手套,防止RNase污染所导致的RNA降解。德国著名生化试剂公司AppliChem为此推出的RNase-ExitusPlus™ RNase酶清除试剂有效地解决了上述困境,能有效清除RNase污染以用于预防RNA的降解。
货号 |
品名 |
包装 |
A7153_0100 |
RNase-ExitusPlus™ |
100ml |
A7153_0250 |
RNase-ExitusPlus™ |
250ml |
A7153_0500 |
RNase-ExitusPlus™ |
500ml |
A7153_1000 |
RNase-ExitusPlus™ |
1L |
A7153_1000RF |
RNase-ExitusPlus™(不含喷头) |
1L |
A7153_2500RF |
RNase-ExitusPlus™(不含喷头) |
2.5L |
RNase-ExitusPlus™ 是一种非碱性、无腐蚀性且无致癌性的新型RNase清除液。它对RNase污染物具有很好的清除性能,applichem检测试验证明了它能够清除微管底部高达20ug干燥了的RNase A,能够保持12个月的稳定性并且耐高温。RNase-ExitusPlus™是具有消除任何物体表面,包括微量离心管中内部的核糖核酸酶。通过下面简单的使用说明,核糖核酸酶将会完全的失活并被去除。 RNase-ExitusPlus™应储存在室温;在较低温度下很容易形成沉淀,在 37 ° c温度下就沉淀就会消失。
产品用途:
用于清除实验室表面的RNase A污染。
用于清洗实验室的表面。
•用于清洗电泳设备、吸管、 反应管等。
可提供喷雾瓶或笔芯瓶 (RF)。
目前RNase-ExitusPlus™已经进行改良,进一步开发的 ExitusPlus产品配方的主要目的是减少在储存过程中随着时间的延长颜色的变化以及试剂表面的干燥。新配方包含显著较少的指标试和低浓度的酒精。在测试的过程中,我们注意到酒精提高表面的试剂组分的加入并可以更大限度的改善活性。RNase-ExitusPlus使用应用步骤没有任何改变。
RNase-ExitusPlus™ 的最新的独特特征:
1) 催化和组份的协同作用,导致蛋白质和核糖核酸酶分子非常快速的失活,对核糖核酸酶非酶促降解。
2) RNase-ExitusPlus™的所有组分, 都容易生物降解和对人类无害并且无毒。
3) 不使用任何刺激性的矿业酸或碱性物质。延长的孵育时间设备和材料不会被腐蚀掉。
4) 不产生有毒气体。试剂中只含有少量酒精。
5) 温度升至50 ° C 以上的高温,可加速反应和效率 / 活性!
产品使用说明:
1) 表面除污的最佳孵育时间是 10 分钟,温度 > 20 ° c。对于充分的消毒的表面,在完全干之前 (10 至 15 分钟),足以擦去RNase-ExitusPlus™。此后无需再用无菌水清洗,与传统的净化解决方案,这是一个新的功能。
2) 溶液完全干燥后,没有进一步的净化反应发生。因此,孵育时间超过 30 分钟不是必要的同时也不是有效的。因此在严重污染的情况下,推荐另一个高效的应用程序解决方案。
3) 为去除不需要的干的试剂的残留痕迹,我们建议使用无菌水或 10 X TE buffer和一张纸巾。
更详细的产品使用说明:
1) 用于对移液器的清洁:按照移液器的说明书,将移液器的杆,垫片,以及旋钮等部件拆下来,浸泡到清洁剂中1分钟左右,然后取出,用水进行彻底冲洗,待干了之后重新进行组装;
2) 用于清除实验室表面的污染物:应用RNase-ExitusPlus™直接喷洒于实验室表面需要清洁的地方,用干纸进行擦拭或者用沾湿了的纸进行擦拭;
3) 用于清除实验仪器的污染物:用RNase-ExitusPlus™喷洒在纸巾上,然后对仪器的表面进行擦拭或者直接用清洁剂将纸巾完全浸湿,对仪器微小的部件进行清洁或者直接把小部件浸泡于清洁液中,10分钟后用水清洗或者用干净的纸擦干;
4) 用于清洁塑料或者玻璃的实验室用品:用足够量的清洁液将所需要清洁的塑料或者玻璃器皿浸泡在里面,一段时间后,倒掉废液,然后用蒸馏水对器皿彻底的冲洗至少2遍;
RNase-ExitusPlus™ RNase A实验对比数据。
将干燥的RNase A放入反应管的样品 1、 3 和 4 (图 1)。然后,RNase A 样品用 1 ml的 H2O(3,4) 或RNase-ExitusPlus™ (1)处理,室温下放置 5 分钟。紧接着用1ml的无菌水清洗两次。然后在每个管子里放入从大肠杆菌得到的RNA 5ug。将10ug的新鲜分装RNase A添加到管 4中,所有管在 37 ° c孵育 30 分钟。最后,加入缓冲液和将样本加入 1%琼脂糖凝胶。5ug未处理的从大肠杆菌得到的RNA作为对照。
上海金畔生物科技有限公司为您的提供最优的生物实验室解决方案,我们向您推荐德国著名生化试剂品牌Applichem的全套核酸污染清除ExitusPlus™系列。其DNA-ExitusPlus™专用于DNA以及RNA污染的清理、RNase-ExitusPlus™则能有效去除RNase酶污染。如果您对上述预防清除产品感兴趣,请请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案,或索取最新的Applichem产品资料。
品牌:Enzo
CAS No.: 储存条件:-20℃ 纯度:– |
产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
ENZ-NUC136-2500 |
– | 2500 U | – | 1,720.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。