ISOGEN with Spin Column

发表于2024年4月2日由Whatman官网

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

RNA提取试剂

ISOGEN with Spin Column

ISOGEN with Spin Column

ISOGEN with Spin Column 50次用量

　　ISOGEN with Spin Column是总RNA提取试剂ISOGEN与硅胶膜内封离心柱的组合产品。
　　使用ISOGEN溶解样品，通过液相分离提取RNA。去除混杂物时，使用Nippon Gene自主设计的离心柱，仅1个小时左右即可提取更高纯度的总RNA。该产品的原理（Boom technology）是在离液离子条件下，使核酸吸附于二氧化硅膜。

◆特点

　　•　可提取高纯度全RNA 无需酒精沉淀从混杂物较多的植物也可提取高纯度全RNA

◆产品列表

ISOGEN with Spin Column （10次用量、50次用量）
产品	容量（10次用量）	容量（次用量）	备注
ISOGEN	10 mL × 1	50 mL × 1	保存于阴暗处
IsoWash I	9 mL × 1	30 mL × 1	可室温保存
IsoWash II	7 mL × 1	30 mL × 1	可室温保存
TE (pH8.0)	1 mL × 1	5 mL × 1	可室温保存
Spin Column	10瓶	50瓶

保存方法

　　冷藏保存（2～10°C）

运输方法

　　本品在室温下运输。产品到达后，在2~10℃条件下保存即可正常使用。

◆使用案例

操作流程

ISOGEN with Spin Column

Data 1: RNA取量的基准

样本		RNA取量的基准
动物组织	脑	0.5 µg RNA/mg tissue
	肝脏	3 µg RNA/mg tissue
	肾脏	2 µg RNA/mg tissue
	精巢	2 µg RNA/mg tissue
培养细胞	Jurkat细胞	4 µg RNA/1 × 10⁶ cells
培养细胞	HeLa细胞	4 µg RNA/1 × 10⁶ cells
植物	卷心菜(幼苗)	0.3 µg RNA/mg tissue
	水稻 (叶子)	0.3 µg RNA/mg tissue
	大豆种子	0.5 µg RNA/mg tissue
	玉米种子	0.5 µg RNA/mg tissue
	卷心菜种子	0.3 µg RNA/mg tissue
	郁金香球茎	0.2 µg RNA/mg tissue
	水稻(稻谷)	0.2 µg RNA/mg tissue

Data 2：提取的RNA的吸光光谱与电泳结果（与旧方法比较）

　　按照操作步骤，从小鼠肝脏（50 mg）及冷冻粉碎后的植物样本（各25 mg）提取RNA，进行吸光色谱检测。同时使用以往的方法（ISOGEN提取后使用异丙醇沉淀纯化）进行同样的检测。

动物样本：小鼠肝脏

植物样本：郁金香球茎

ISOGEN with Spin Column

　　▶　根据各RNA溶液的吸光值计算出0.5 µg的RNA，使用甲醛变性琼脂糖凝胶进行电泳。

ISOGEN with Spin Column

　Lane 1: 小鼠肝脏（旧方法）

　Lane 2: 小鼠肝脏（离心柱法）
　Lane 3: 卷心菜（旧方法）
　Lane 4: 卷心菜（离心柱法）
　Lane 5: 郁金香球茎（旧方法）
　Lane 6: 郁金香球茎（离心柱法）
　Lane 7: 水稻稻谷（旧方法）
　Lane 8: 水稻稻谷（离心柱法）
　M: RNA Ladder (0.125 – 6.0 kb)

1% gel Agarose S, EtBr 染色

　　使用动物组织提取的RNA纯度与使用以往方法一样高（将培养细胞作为样本的结果也一样）。使用离心柱法（本产品）植物样本（尤其是球茎、稻谷等）可提取高纯度RNA，且不含在230 nm附近吸收波长最多的多糖类等混杂物。根据电泳结果也可得出这一结论。

◆注意事项

　　•　如果您对试剂的基本的知识不了解，请不要使用。

　　•　ISOGEN 是非医疗用医剧毒物（苯酚制剂），请小心操作。

　　•　使用时请穿着适当的防护设备（手套、眼镜等）。

　　•　操作场所保持通风，以免吸入蒸汽。

　　•　如果接触皮肤或眼睛，请用大量的水冲洗15分钟或以上，并及时就诊。

　　•　请按照说明书进行操作。

　　•　对于因不按照说明书操作而导致的事故，Nippon Gene不负任何责任。

◆备注

　　本产品是实验研究用试剂，请勿用作医疗用途。

◆相关产品

　　· RNA提取试剂　ISOGEN

　　· 缓冲剂　ddWater, TE(pH 8.0)

　　· Collection Tube（收集管单品套装）

　　· ISOSPIN Plant RNA （从植物组织提取RNA）

　　· ISOSPIN Cell & Tissue RNA （从动物细胞、动物组织提取RNA）

　　· ISOSPIN Blood & Plasma DNA （从血液、血清、血浆提取DNA）

　　· Deoxyribonuclease（RT Grade）for Heat Stop

　　· Deoxyribonuclease（RT Grade）

　　· DNase I (RNase free)

◆资料 Data Sheet

产品手册

　　· ISOGEN with Spin Column 产品说明书第三版 (PDF 368KB)

SDS(Safety Data Sheet)

　　· ISOGEN with Spin Column 　安全标签 (PDF)

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
314-07513	ISOGEN with Spin Column	10次用量	–	–
318-07511	ISOGEN with Spin Column	50次用量	–	–

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒 ISOGEN PB Kit

发表于2024年4月2日由Whatman官网

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒
ISOGEN PB Kit

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

从石蜡包埋组织切片提取RNA试剂盒

ISOGEN PB Kit

　　本产品是石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒。包含从脱石蜡，Proteinase K 处理组织到利用 ISOGEN-LS 提取RNA，非常简便、短时间（约２小时）即可完成。提取的RNA可用于RT-PCR检测。

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒 ISOGEN PB Kit

◆特点

●　从石蜡包埋组织切片提取RNA

●　操作简便，且用时少（２小时）

●　提取的 RNA 可用于 RT-PCR

◆用途

●　RT-PCR 检测 RNA 病毒

●　RT-PCR 检测 mRNA

●　检测石蜡包埋组织切片的 RNA 保存度等

◆产品内容

产品	包装	备注
Proteinase K（20 mg/mL）	100 µL×1
Extraction Buffer	3 mL×1	可室温保存 Extraction Buffer 可能出现白色结晶，非质量问题。在37～50°C条件下，孵化后，结晶完全溶解后使用。
ISOGEN-LS	10 mL×1	非医疗用剧毒物可冷藏保存（2～10°C）
Ethachinmate	60 µL×1	可冷藏保存（2～10°C）
Deoxyribonuclease（RT Grade）	20 µL×1
10× DNase（RT Grade）Buffer II	100 µL×1
Stop Solution（RT Grade）	100 µL×1
DEPC treated Water	500 µL×2	可室温保存

保存方法

　　冷冻保存（-20°C）

试剂盒以外必需的试剂

●　Lemosol^® 或Lemosol^® A

●　乙醇

●　氯仿

●　异丙醇

◆使用实例

操作前需知

　　从石蜡包埋组织提取RNA 时， RNA 的分解持续到包埋过程，其 RNA 的完整性比从新鲜组织提取的 RNA 低。

　　从哺乳动物的新鲜组织提取的 total RNA 经过电泳后，检测出明亮的 28S rRNA 和 18S rRNA 条带，其比例约为 2 : 1。使用石蜡包埋组织进行提取时，无法得出这个结果。实际上，使用小鼠的石蜡包埋组织进行提取实验，几乎无法检测 28S rRNA 。因此，在包埋过程中引导RNA分解。石蜡包埋状态关系到 RNA 的分解程度。有可检测出 18S rRNA 的石蜡块，也有 18S rRNA 降解太多而无法检测出来。Nippon Gene 将判断基准设定为剩余一个 18S rRNA，in situ hybridization 等、需要高保存度RNA时，建议设定标准。

　　即使 RNA 已分解（包括无法确认 18S rRNA 的情况），可使用 RT-PCR 检测出基因，使用 RT-PCR 时，RNA 的完整性较好。但是使用石蜡包埋组织切片进行 PCR 时，扩增效率比一般情况的低，请注意避免引物长度设置过大（400 bp 以下，尽量设置为 200 bp以下）。

操作流程

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒 ISOGEN PB Kit

操作实例1　从小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片提取RNA

　　按照操作流程，从4片10 µm小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片，提取RNA ，取1/4的量（5 µL），使用1% 福尔马林変性Agarose S 进行电泳。

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒 ISOGEN PB Kit

操作实例2　RT-PCR检测小鼠Gapd基因

从小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片提取500 ng RNA， DNase 处理后，进行RT-PCR，检测出小鼠glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase（Gapd）基因外显子5（258 bp）。

石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒 ISOGEN PB Kit

关于微量样本RT-PCR

　　对于无法得到提取RNA的电泳结果或10 ng 以下的情况，建议添加RT反应補助试剂RTmate，进行逆转录。

◆备注

●　本产品为实验研究用试剂。请勿用于医疗用途。

◆资料 Data Sheet

产品手册

ISOGEN PB Kit 第二版（PDF 261 KB）

SDS（Safety Data Sheet）

ISOGEN PB Kit （PDF）

◆相关产品

液体样本提取RNA用试剂　ISOGEN-LS

RT反应補助试剂　RTmate

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
315-06421	ISOGEN PB Kit ISOGEN石蜡组织切片RNA提取试剂盒	20次用量	–	–

ISOGEN、ISOGEN-LS RNA提取试剂

发表于2024年4月2日由Whatman官网

ISOGEN、ISOGEN-LS
RNA提取试剂

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

ISOGEN、ISOGEN-LS

RNA提取试剂

ISOGEN、ISOGEN-LS RNA提取试剂

ISOGEN

（从左到右200 mL，100 mL，50 mL）

ISOGEN

　　ISOGEN是从人、动物、植物及细菌提取RNA试剂。可通过液相分离方法从同一样本中分离DNA及蛋白质。可通过一系列的操作分离RNA、DNA、蛋白质，有助于分析珍贵的样本。操作简单，便于样本数量较多的检测。

　　适用样本：组织、细胞、植物、细菌

ISOGEN-LS

　　ISOGEN-LS是从血液或血清等容量较大（＞100 µL：使用1.5 mL塑料（离心）管进行处理），难以浓缩的液体样本中提取RNA的试剂。是将ISOGEN针对液体试剂进行改良。除了加入到样本的ISOGEN-LS量比不一样以外，得到的结果与使用 ISOGEN时一样。

　　适用样本：全血、液体样本

◆原理

　　本产品是含有苯酚及硫氰酸胍的均一液体。往样本加入ISOGEN或ISOGEN-LS后使其溶解或均匀化，再加入氯仿进行离心分离，匀浆就会分离成水相、中间相及有机相。水相中只有RNA，DNA及蛋白质存在于中间相及其以下。首先，取出水相，加入异丙醇使RNA沉淀。往剩余的中间相及有机相里加入乙醇使DNA沉淀，加入异丙醇使蛋白质沉淀，从而依次分离出RNA、DNA及蛋白质。

ISOGEN、ISOGEN-LS RNA提取试剂

◆特点

　　・主要成分为苯酚及硫氰酸胍的均一溶液

　　・便于液层分离的染色溶液（ISOGEN : 蓝色、ISOGEN-LS : 红色）

　　・可通过一系列的操作分离RNA、DNA、蛋白质

　　・操作简单、迅速（RNA分离用时: 约1个小时、DNA : +2小时、蛋白质: +2.5小时）

　　・高回收率、组织及培养细胞样本请使用ISOGEN

　　・血液等容量大，难以浓缩的液体样本请使用ISOGEN-LS

◆产品列表

ISOGEN　（10 mL、50 mL、100 mL、200 mL）
产品	容量	保存	备注
ISOGEN	1瓶	2～10°C (遮光)	非医疗用，剧毒物外观：蓝色溶液容器（塑胶瓶）存放于保管袋。

ISOGEN-LS　（10 mL、100 mL）
产品	容量	保存	备注
ISOGEN-LS	1瓶	2～10°C (遮光)	非医疗用，剧毒物外观：红色溶液容器（塑胶瓶）存放于保管袋。

运输方法

　　本品在室温下运输。产品到达后，在2~10℃条件下保存即可正常使用。

◆使用案例

操作步骤

RNA分离	DNA分离	蛋白质分离
操作流程1-1 RNA分离	操作流程2 DNA分离	操作流程3 蛋白质分离
操作流程1-2 微量样本RNA分离
操作流程1-3 植物样本RNA分离

ISOGEN及ISOGEN-LS的操作流程请参考产品说明。

实验数据一览

　　·　取量的标准

　　·　＜ISOGEN＞ISOGEN法与硫氰酸胍-氯化铯（GT-CsCl）超速离心法比较

　　·　＜ISOGEN＞ISOGEN法分离总RNA电泳

　　·　＜ISOGEN＞ISOGEN法分离RNA、DNA及蛋白质Northern、Southern、Western印迹法

　　·　＜ISOGEN-LS＞ISOGEN法分离hepatitis C viral （HCV） RNA的RT-PCR

◆注意事项

　　·　如果您对试剂的基本的知识不了解，请不要使用。

　　·　ISOGEN及ISOGEN-LS是非医疗用医剧毒物（苯酚制剂），请小心操作。

　　·　使用时请穿着适当的防护设备（手套、眼镜等）。

　　·　如果接触皮肤或眼睛，请用大量的水冲洗15分钟或以上，并及时就诊。

　　·　请按照说明书进行操作。

　　·　对于因不按照说明书操作而导致的事故，Nippon Gene不负任何责任。

◆备注

　　本产品是实验研究用试剂，请勿用作医疗用途。

◆资料 Data Sheet

产品手册

　　·　ISOGEN,ISOGEN-LS　产品说明书（H18年7月修订版）（PDF 92KB）

SDS（Safety Data Sheet）

　　·　ISOGEN 　安全标签（PDF）

　　·　ISOGEN-LS 　安全标签（PDF）

◆相关产品

　　·　ISOGEN II total RNA及small RNA抽提试剂　

　　·　ISOGEN with Spin Column RNA抽提试剂

　　·　Ethachinmate 用于从微量样本抽提RNA的酒精沉淀共沉淀剂

　　·　缓冲剂

　　·　Deoxyribonuclease（RT Grade）for Heat Stop

　　·　Deoxyribonuclease（RT Grade）

　　·　DNase I (RNase free)

Q：从革兰氏阳性菌提取RNA的方法

A：总体来说，革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，普通的操作流程回收到的RNA的量比革兰氏阴性菌少。因此，使用玻璃珠（0.1 – 0.15 mm）破坏

　革兰氏阳性菌的细胞壁后，用ISOGEN提取RNA。

　使用ISOGEN从革兰氏阳性菌抽提RNA – CN.pdf

Q：从酵母提取RNA的方法

A：酵母的细胞壁较厚，仅仅进行普通的ISOGEN/ISOGEN-LS处理，难以回收RNA。因此，使用作用于β -1,3结合的葡萄糖聚合物的 Zymolyase

　对细胞壁进行溶解，提取RNA。

　使用ISOGEN／ISOGEN-LS从酵母抽提RNA -CN.pdf

Q：从骨头提取RNA的方法

A：使用ISOGEN从大鼠脊椎提取总 RNA，并检测其回收量及纯度。　　

　使用ISOGEN从骨头抽提RNA – CN.pdf

Q：可以分开提取小RNA和高分子RNA吗？

A：本产品无法分开回收小RNA和高分子RNA，但是本产品的升级产品ISOGEN II可以分开回收高分子RNA（＞200 bases）和小RNA

　（＜200 bases）。

分离操作流程（前往ISOGEN II 产品页面链接）

参考文献

　　[ 1 ]　Chomczynski, P. and Sacchi, N.: Anal.Biochem., 162, 156 （1987）

　　[ 2 ]　Chomczynski, P.: BioTechniques, 15, 532 （1993）

　　[ 3 ]　Chomczynski, P., Bowser-Finn, R. and Sabatini, N.: The Jounal of NIH Research, 6,83 （1994）

　　[ 4 ]　Chomczynski, P. and Mackey, K., BioTechniques, 19, 942-945 （1995）

License

　　Licensed by Molecular Research Center, Inc.

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
315-02504	ISOGEN	10 mL	–	–
317-02503	ISOGEN	50 mL	–	–
311-02501	ISOGEN	100 mL	–	–
–	ISOGEN	200 mL	–	–
317-02623	ISOGEN-LS	10 mL	–	–
311-02621	ISOGEN-LS	100 mL	–	–

ISOGEN II 总RNA及小RNA提取试剂

发表于2024年4月2日由Whatman官网

ISOGEN II
总RNA及小RNA提取试剂

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

ISOGEN II

总RNA及小RNA提取试剂

ISOGEN II 总RNA及小RNA提取试剂

离心后的沉淀

ISOGEN II 100 mL

　　ISOGEN II 是从动物组织和培养细胞中提取总RNA和小RNA的试剂。本品是含有苯酚和胍的均匀液体，根据与细胞成分的相互作用，能一步分离RNA。

　　使用旧产品（ISOGEN和ISOGEN-LS）需要添加氯仿，要进行液相分离，而本产品则无需此步骤。在样品中加入ISOGEN II溶解或是均质之后，添加水， DNA、蛋白质、多糖类等沉淀（不溶化），进行离心分离后可以去除（右图）。用酒精沉淀、洗净、溶解上清液之后，能分离出高纯度的RNA。若配合ISOGENOME 使用，也能够跟ISOGEN一样从同一样本中提取DNA。

◆特点

　　•　无需使用氯仿分离RNA

　　•　相比旧产品（ISOGEN等），小RNA的提取率更高

　　•　可以把高分子RNA（＞200 bases）和小RNA（＜200 bases）分离（也有不分离的方案）

　　•　混入的DNA较少，提取的RNA可以直接使用RT-PCR和定量RT-PCR

　　•　约一小时内可提取出RNA

◆用途

　　从活体组织提取RNA等等

◆产品列表

ISOGEN II （10 mL、100 mL）

产品

包装

保存条件

备注

ISOGEN II

1瓶

2～10°C

(阴暗处)

非医疗用剧毒物

外观：青色溶液

容器（塑料瓶）外配有袋子。

运输方法

　　本品在室温下运输。产品到达后，在2~10℃条件下保存即可正常使用。

◆使用案例

操作流程

・除了本产品，根据需准备RNase free water、乙醇、4-溴甲氧基苯异丙醇。
・可使用聚丙烯管，使用前确认是否能够承受离心强度（12K × g）及ISOGEN II（苯酚）。
・离心操作建议在4-28℃进行。

ISOGEN II 总RNA及小RNA提取试剂

实验数据

1. 提取的RNA的电泳

2. 检验出miRNA
3. RT-PCR
4. RNA提取共沉淀剂效果（测定吸光度）
5. RNA取量的基准
6. 使用ISOGEN II从植物提取总RNA
7. 使用ISOGEN II从植物提取高分子RNA及小RNA分离＜改变流程＞

Data 1：提取的RNA的电泳

　　按照ISOGEN及ISOGEN Ⅱ的操作顺序，提取RNA，进行电泳。

　琼脂糖凝胶电泳

ISOGEN II 总RNA及小RNA提取试剂

M: RNA Ladder (编号:311-06261)

道1：ISOGEN 提取总RNA (2 μg)

道2：ISOGENⅡ 提取总RNA (2 μg)

道3：ISOGENⅡ 提取高分子RNA (2 μg)

道4：ISOGENⅡ 提取小RNA (0.2 μg)

1.2% Agarose S （甲醛变性）

EtBr 染色

聚丙烯酰胺凝胶电泳

ISOGEN II 总RNA及小RNA提取试剂

道1：ISOGEN 提取总RNA (5 μg)

道2：ISOGENⅡ 提取总RNA (5 μg)

道3：ISOGENⅡ 提取高分子RNA (5 μg)

道4：ISOGENⅡ 提取小RNA (0.5 μg)

12% 聚丙烯酰胺凝胶（Urea 变性）

EtBr 染色

　　▶　道1、2中，ISOGENⅡ与ISOGEN一样，可提取全DNA。

　　▶　道3、4中，ISOGENⅡ可区分200bases以上的高分子RNA及10~200bases的小RNA。

Data 2：检验miRNA

　　对使用ISOGEN 及ISOGEN Ⅱ提取的总RNA进行3D-Gene Human miRNA Oligo chip分析

　▶　ISOGEN Ⅱ比ISOGEN更能显示miRNA。

ISOGEN II 总RNA及小RNA提取试剂

Data 3：RT-PCR

　　使用ISOGEN 及ISOGEN Ⅱ从Hela细胞提RNA作为模板。通过RT-PCR检测出β-actin基因。同时，进行不产生RT反应的控制组实验。

PCR条件

ISOGEN II 总RNA及小RNA提取试剂

1：模板RNA量 500 ng

2：模板RNA量 100 ng

3：模板RNA量 20 ng

M：Gene Ladder

（编号：316-06951）

　　▶　使用ISOGEN Ⅱ提取的RNA比使用ISOGEN抽提的RNA混入DNA较少。

Data 4：RNA提取共沉淀剂效果（测定吸光度）

　　ISOGEN Ⅱ的使用指南中分离小RNA时，对使用共沉淀剂Ethachinmate（Nippon Gene 产品编号：312-01791）或者Glycogen（和光纯药工业产品编号：077-05311）时提取到小RNA情况进行了比较。

方法

按照使用指南，从Hela细胞及小鼠肝脏回收小RNA，检测吸光度，计算小RNA的含量。将使用Ethachinmate提取到的数量看作1，在图表中列出了含量的相对值。

ISOGEN II 总RNA及小RNA提取试剂

　　▶　使用Glycogen作为共沉淀剂回收小RNA时的回收量较多，变异较少。

Data 5：RNA取量的基准

实验材料		高分子 RNA 的离析	总 RNA的离析
组织	肝脏	5～7 µg RNA/mg tissue	6～8 µg RNA/mg tissue
	肾脏、脾脏	3～4 µg RNA/mg tissue	3～4 µg RNA/mg tissue
	骨骼肌脑、肺	0.5～1.5 µg RNA/mg tissue	0.5～1.5 µg RNA/mg tissue
	胎盘	1～3 µg RNA/mg tissue	1～3 µg RNA/mg tissue
培养细胞	上皮细胞	5～8 µg RNA/106 cells	5～10 µg RNA/106 cells
培养细胞	成纤维细胞	3～5 µg RNA/106 cells	4～6 µg RNA/106 cells

Data 6：使用ISOGEN II从植物提取总RNA

从植物抽提全RNA例子 (PDF 222KB)

Data 7：使用ISOGEN II从植物抽提高分子RNA及小RNA分离＜变化流程＞

从植物抽提高分子RNA及小RNA离析例子 (PDF 218KB)

◆注意事项

　　•　本品是实验研究用的试剂，不能作为医药品或其他目的使用。另外，如果您对试剂的基本的知识不了解，请不要使用。

　　•　ISOGEN II是非医疗用剧毒物（苯酚制剂），请小心操作。

　　•　使用时请穿着适当的防护设备（手套、眼镜等）。

　　•　操作场所保持通风，以免吸入蒸汽。

　　•　如果接触皮肤或眼睛，请用大量的水冲洗15分钟或以上，并及时就诊。

　　•　请按照说明书进行操作。

　　•　对于因不按照说明书操作而导致的事故，Nippon Gene不负任何责任。

◆备注

　　本产品是实验研究用试剂，请勿用作医疗用途。

◆资料 Data Sheet

产品说明书

　　•　ISOGEN II　产品说明书第三版（100 mL产品小冊子） (PDF 195KB)

　　•　(内容与册子相同） (PDF 168KB)

SDS(Safety Data Sheet)

　　•　ISOGEN II 　安全数据图表(PDF)

宣传单

　　•　册子（PDF 2MB）

◆相关产品

　　 •　RNA抽提用试剂　ISOGEN、ISOGEN-LS

　　 •　RNA抽提用试剂　ISOGEN with Spin Column

　　 •　酒精沉淀用共沉淀剂　Ethachinmate

　　 •　缓冲器　ddWater, TE（pH 8.0）

Q：可以从全血等血液样本中抽提RNA吗？

A：ISOGEN II 难以提取出高纯度的RNA，建议使用ISOGEN-LS。

Q：可以提取DNA或蛋白质吗？

A：旧法使用 ISOGEN，可以从同一样本回收DNA及蛋白质，但由于此次研发的是提取RNA的方法，ISOGEN II 中混入的DNA较少，无法提取DNA

及蛋白质。不过，配合使用DNA提取试剂 ISOGENOME，可回收DNA样本。

参考文献

[ 1 ]

Chomczynski, P. ： Reagents and methods for isolation of purified RNA, US and International Patents Pending.

[ 2 ]

Chomczynski, P. and Sacchi, N.：”Single step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol- chloroform extraction”, Anal. Biochem，162, 156-159（1987）

[ 3 ]

Chomczynski, P.：”A reagent for the single-step simultaneous isolation of RNA, DNA and proteins from cell and tissue samples”, Biotechniques,15, 532-537（1993）

[ 4 ]

Wilfinger, W., Mackey, K. and Chomczynski, P.：”Effect of pH and ionic strength on the spectrophotometric assessment of nucleic acid purity”,Biotechniques, 22, 474-481（1997）

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
317-07363	ISOGEN II	10 mL	–	–
311-07361	ISOGEN II	100 mL	–	–

ISOGEN II RNA 抽提试剂 ISOGEN II

发表于2024年4月2日由Whatman官网

ISOGEN II RNA 抽提试剂
ISOGEN II

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

ISOGEN II RNA抽提试剂

ISOGEN II

从动物组织和培养细胞中高效分离纯化含有小 RNA 的总 RNA

◆原理

ISOGEN II 是从动物组织和培养细胞中总 RNA 和小 RNA 的抽提试剂。本品是含有苯酚和胍的均相液体，根据与细胞成分的相互作用，能单一地分离 RNA 。
使用旧产品（ISOGEN 和 ISOGEN-LS）需要添加氯仿，要进行液相分离，而本产品则无需此步骤。在样品中加入 ISOGEN II 溶解或是均质化之后，再添加水，因为 DNA、蛋白质、多糖类等会形成不溶性沉淀，进行离心分离后可以去除。用乙醇沉淀并洗涤、溶解得到上清之后，能分离出高纯度的 RNA 。

◆优点・特色

●　不需使用氯仿分离 RNA
●　比起旧产品（ ISOGEN 等），小RNA 的抽提效率更高
●　可以把大 RNA（>200 bases）和小 RNA（<200 bases）分离（同时提供不分离的方案）
●　DNA 污染少，抽提的 RNA 可以直接用于 RT-PCR 和 RT-qPCR 上
●　约 1 h 可完成 RNA 的抽提

内容和保存条件

<span style="font-family: 微软雅黑, Microsoft YaHei;"><span style="font-family: 微软雅黑, 'Microsoft YaHei'; font-size: 14px;">无标题文档</span></span>

产品名称	构成
ISOGEN II	ISOGEN II	100 mL
ISOGEN II	使用手册	1本

冷藏保存
请在购买日起６个月内使用
本品可在室温下运输。产品到达后，在２~１０℃条件下保存即可正常使用

产品安全数据图表（MSDS）
ISOGEN II MSDS

使用手册
ISOGEN II 手册

◆案例・应用

操作流程

ISOGEN II RNA 抽提试剂 ISOGEN II

◆使用例子

Data 1 抽提得到的 RNA 电泳

根据 ISOGEN 和 ISOGEN II 的方案抽提 RNA，进行电泳

ISOGEN II RNA 抽提试剂 ISOGEN II

M：RNA Ladder (Code No.311-06261）
Lane1：ISOGEN 抽提总 RNA（2 μg）
Lane2：ISOGEN II 抽提总 RNA（2 μg）
Lane3：ISOGEN II 抽提高分子 RNA（2 μg）
Lane4：ISOGEN II 抽提小RNA（0.2 μg）
1.2% Agarose S（甲醛变性）EtBr 染色

ISOGEN II RNA 抽提试剂 ISOGEN II

Lane1：ISOGEN 抽提总 RNA（5 μg）
Lane2：ISOGEN II 抽提总 RNA（5 μg）
Lane3：ISOGEN II 抽提高分子 RNA（5 μg）
Lane4：ISOGEN II 抽提小 RNA（0.5 μg）
12% 聚丙烯酰胺（Urea 变性）EtBr 染色

ISOGEN II 能抽提和 ISOGEN 同等的总 RNA

ISOGEN II 能对 200 base 以上的高分子 RNA 和 10~200 base 的小 RNA 进行分离

Data 2 ISOGEN 和 ISOGEN II 抽提的总 RNA 用“3D-Gene”Human miRNA Oligo chip（东来株式会社）分析。

ISOGEN II RNA 抽提试剂 ISOGEN II

ISOGEN II 比 ISOGEN 能更完整地抽提 miRNA

Data 3 RT-PCR

用 ISOGEN 和 ISOGEN II 从 HeLa 细胞中提取出 RNA 并定性，再用 PT-PCR 检测出 β-Actin 基因。同时进行没有经过 RT 反应的对照实验。

ISOGEN II RNA 抽提试剂 ISOGEN II

1：模板RNA量 500 ng
2：模板RNA量 100 ng
3：模板RNA量 20 mg
M：Gene Ladder 100

实验证明以ISOGEN II抽提的RNA与以ISOGEN抽提的RNA相比，DNA残留更少。

Data 4 RNA 提取量的参考值

分别用 “大 RNA 的提取”和“总 RNA 的提取”方案得到的 RNA 的提取量的参考值如下：

试剂		大 RNA 的提取	总 RNA 的提取
组织	肝脏	5~7 g RNA/mg tissue	6~8 μg RNA/mg tissue
	肾脏、脾脏	3~4 g RNA/mg tissue	3~4 μg RNA/mg tissue
	骨骼肌、脑、肺	0.5~1.5 g RNA/mg tissue	0.5~1.5 μg RNA/mg tissue
	胎盘	1~3 g RNA/mg tissue	1~3 μg RNA/mg tissue
培养细胞	上皮细胞	5~8 g RNA/10⁸ cells	5~10 μg RNA/10⁶ cells
培养细胞	成纤维细胞	3~5 g RNA/10⁸ cells	4~6 μg RNA/10⁶ cells

◆注意事项

●　本品是实验研究用的试剂，不能作为医药品或其他目的使用。另外，如果您对试剂的基本的知识不了解。请不要使用。

●　因为 ISOGEN II 是医药用外有害物质（苯酚制剂），所以请小心操作。
●　使用时请穿着适当的防护设备（手套、眼镜等）。
●　请不要吸入蒸汽，进行充分的通风。
●　如果接触皮肤或眼睛，请用大量的水冲洗至少15分钟，并前往医院就诊。
●　本品的操作请按照手册记载的内容进行
●　对于和手册记载内容不同的操作带来的事故，日本基因不负任何责任。

ISOGEN II RNA 抽提试剂 ISOGEN II

ISOGENII 使用说明书

参考文献

1.	Chomczynski, P. Reagents and methods for isolation of purified RNA, US and International Patents Pending.
2.	Chomczynski, P. and Sacchi, N:Single step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol- chloroformextraction”, Anal. Biochem., 162, 156-159（1987）
3.	Chomczynski, P.:A reagent for the single-step simultaneous isolation of RNA, DNA and proteins from cell and tissue samples”, Biotechniques, 15, 532-537(1993)
4.	Wilfinger, W., Mackey, K. and Chomczynski, P.:Effect of pH and ionic strength on thespectrophotometric assessment of nucleic acid purity”, Biotechniques, 22, 474-481(1997)

产品列表

ISOGEN/ISOGEN-LS 总 RNA 精制 Poly(A+)RNA ISOGEN/ISOGEN-LS Poly(A)+ Isolation Pack

发表于2024年4月2日由Whatman官网

ISOGEN/ISOGEN-LS 总 RNA 精制 Poly(A+)RNA
ISOGEN/ISOGEN-LS Poly(A)+ Isolation Pack

产品特性
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ISOGEN/ISOGEN-LS 总 RNA 精制 Poly(A+)RNA

ISOGEN/ISOGEN-LS Poly(A)+ Isolation Pack

◆原理

　　本产品是由 ISOGEN 和 Poly A⁺ ISOLATION Kit From Total RNA 组合而成的 Poly A⁺ RNA 萃取试剂盒。本产品能够在短时间内得到高纯度的 Poly A⁺ RNA，而且，本产品还附有 Ethachinmate，能够简单地对得到的 Poly A⁺ RNA 进行浓缩。

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
314-05651	ISOGEN Poly(A)+ Isolation Pack ISOGEN 总RNA 精制Poly(A+)RNA	20次用	–	–
311-05661	ISOGEN/ISOGEN-LS Poly(A)+ Isolation Pack ISOGEN/ISOGEN-LS 总RNA 精制Poly(A+)RNA

ISOGEN-LS 液体样本 RNA 抽提试剂 ISOGEN-LS

发表于2024年4月2日由Whatman官网

ISOGEN-LS 液体样本 RNA 抽提试剂
ISOGEN-LS

产品特性
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ISOGEN-LS 液体样本 RNA 抽提试剂

ISOGEN-LS

◆原理

　　ISOGEN-LS 是对血清、血液中的RNA进行萃取的试剂，是由 ISOGEN 改良而成的液体试剂专用规格。除了在液体样品中添加的 ISOGEN-LS 的量和 ISOGEN 不同外，所得的结果与 ISOGEN 一致。

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
317-02623	ISOGEN-LS 液体样本RNA抽提试剂	10mL	–	–
311-02621	ISOGEN-LS 液体样本RNA抽提试剂	100mL	–	–

ISOGEN RNA 快速提取试剂 ISOGEN

发表于2024年4月1日由Whatman官网

ISOGEN RNA 快速提取试剂
ISOGEN

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ISOGEN RNA 快速提取试剂

ISOGEN

◆原理

　　ISOGEN 是对人、动物、植物及细菌的 RNA 进行萃取的试剂。采用液相分离的方法，能够在同一试剂中将 DNA 和蛋白质进行单独分离。由于一步操作就能将 RNA、DNA、蛋白质进行单离，能够有效用于贵重的样品的分析中，而且操作简单，十分方便。

　　本产品是含有苯酚和硫氰酸胍的均一液体，在样品中加入 ISOGEN 溶解后均一化，加入氯仿后进行离心分离，分为水相、中间相和有机相。RNA 只存在在水相中，DNA 和蛋白质会存在于中间相以下。所以首先在水相中加入异丙醇使 RNA 沉淀，然后在剩下的中间相和有机相中加入乙醇使 DNA 沉淀后，加入异丙醇使蛋白质沉淀就能按顺序地分离 RNA、DNA 和蛋白质。

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ISOGEN 石蜡包埋组织 RNA 提取试剂盒 ISOGEN PB Kit

发表于2024年4月1日由Whatman官网

ISOGEN 石蜡包埋组织 RNA 提取试剂盒
ISOGEN PB Kit

产品特性
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ISOGEN 石蜡包埋组织 RNA 提取试剂盒

ISOGEN PB Kit

◆原理

　　ISOGEN PB kit 是从石蜡包埋切片中萃取 RNA 的试剂盒，脱石蜡后从用 Proteinase K 处理过的组织中用 ISOGEN-LS 萃取出 RNA 大概只需要２小时。萃取出的 RNA 能用于 RT-PCR 。

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
315-06421	ISOGEN PB Kit ISOGEN 石蜡包埋组织RNA提取试剂盒	for 20tests	–	–

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
315-02504	ISOGEN ISOGEN RNA 快速提取试剂	10 mL	–	RNA抽提用试剂医药用外有害物质
317-02503	ISOGEN ISOGEN RNA 快速提取试剂	50 mL	–	RNA抽提用试剂医药用外有害物质
311-02501	ISOGEN ISOGEN RNA 快速提取试剂	100 mL	–	RNA抽提用试剂医药用外有害物质
317-02623	ISOGEN-LS ISOGEN-LS 液体样本 RNA 抽提试剂	10 mL	–	RNA抽提用试剂医药用外有害物质
311-02621	ISOGEN-LS ISOGEN-LS 液体样本 RNA 抽提试剂	100 mL	–	RNA抽提用试剂医药用外有害物质
015-22411	Anti Ago1, Monoclonal Antibody (2A7) Ago1 单抗（2A7）	50 μL	–	抗Argonaute（Ago）抗体
014-22023	Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 抗小鼠 Ago2 单抗	50 μL	–	抗Argonaute（Ago）抗体
018-22021	Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 抗小鼠 Ago2 单抗	100 μL	–	抗Argonaute（Ago）抗体
011-22033	Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 抗小鼠 Ago2 单抗	50 μL	–	抗Argonaute（Ago）抗体
015-22031	Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 抗小鼠 Ago2 单抗	100 μL	–	抗Argonaute（Ago）抗体

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
315-02504	ISOGEN ISOGEN RNA 快速提取试剂	10 mL	–	RNA抽提用试剂医药用外有害物质
317-02503	ISOGEN ISOGEN RNA 快速提取试剂	50 mL	–	RNA抽提用试剂医药用外有害物质
311-02501	ISOGEN ISOGEN RNA 快速提取试剂	100 mL	–	RNA抽提用试剂医药用外有害物质
317-02623	ISOGEN-LS ISOGEN-LS 液体样本 RNA 抽提试剂	10 mL	–	RNA抽提用试剂医药用外有害物质
311-02621	ISOGEN-LS ISOGEN-LS 液体样本 RNA 抽提试剂	100 mL	–	RNA抽提用试剂医药用外有害物质
015-22411	Anti Ago1, Monoclonal Antibody (2A7) Ago1 单抗（2A7）	50 μL	–	抗Argonaute（Ago）抗体
014-22023	Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 抗小鼠 Ago2 单抗	50 μL	–	抗Argonaute（Ago）抗体
018-22021	Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 抗小鼠 Ago2 单抗	100 μL	–	抗Argonaute（Ago）抗体
011-22033	Anti Human Ago2, Monoclonal Antibody 抗人 Ago2 单抗	50 μL	–	抗Argonaute（Ago）抗体
015-22031	Anti Human Ago2, Monoclonal Antibody 抗人 Ago2 单抗	100 μL	–	抗Argonaute（Ago）抗体

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ISOGEN 石蜡包埋组织 RNA 提取试剂盒 ISOGEN PB Kit