CARD HyperOva^® F.D.

小鼠超排卵诱发试剂

由熊本大学动物资源与开发中心（CARD）研发生产的 CARD HyperOva^® F.D.（冻干粉）是一款可以高效诱发排卵的超排卵诱发试剂。CARDHyperOva^®（日本专利号 5927588）与传统的超排卵诱导方法 PMSG-hCG 相比，其诱导排卵的效率更高。传统 PMSG-hCG 方法，平均每只 C57BL/6J 小鼠只能获得约 20 个卵子，但使用 CARD HyperOva^® 可以高达３-４倍。由于该试剂为冻干产品，可冷藏保存于４°C下，与之前的 CARD HyperOva^® 相比，其保存稳定性更好。

◆产品组成

1.　无菌蒸馏水×1 vial

2.　冻干CARD HyperOva^® F.D. ×1 vial

◆制备方法

◆储存方式

CARD HyperOva^® F.D. 小瓶储存于４°C下，使用前请勿开启。

◆注意

●  仅供研究使用。

●  不得用于动物药物治疗以外的研究。

●  该产品虽然不含有害成分，但请勿饮用或应用于人体。

◆产品列表

◆相关产品

常见问题

1.  活性：剂量是否相同（0.1-0.2 mL）？

1.  是的。HyperOva F.D. 的活性与液体规格的一样。

2.  有报告称，使用液体规格的产品时，在管中有白色沉淀物（纤维蛋白）。F.D. 会出现这种情况吗？

1.  不会。冻干前已经去除了纤维蛋白。

3.  HyperOva FD 在复溶后，是否可以进行分装和冻存？若可以，分装后冻存可以储存多久？

1.  与标准 HyperOva 类似，HyperOva F.D. 在复溶后可以分装并冻存一次，且不影响功效。请注意，目前尚无有关复溶/冻存 HyperOva F.D. 后

     保质期的数据。

4.  复溶后，HyperOva 可在冰箱内储存多久？

1.  确保可储存一个月。超过该时限，我们暂无相关实验数据。

5.  复溶后的产品在什么温度下使用？

1.  请在“室温”（通常为 15-25°C ）下复溶产品。

过量排卵诱导试剂

CARD HyperOva^®

◆试剂概要

CARD HyperOva^® 是一种与传统的过量排卵法（PMSG-hCG法）比较，以能诱导更多排卵为目的而研究出的优秀过量排卵催诱剂。

使用这款诱导剂，即使是以前只能提供少量卵子的小鼠也能获得更多的未受精卵。

在用体外受精的转基因小鼠时 ，体外受精使用 CARD MEDIUM^®后，就能高效增加二细胞期胚胎数。

※产品外包装

组成

1. 抑制素 inhibin 抗体

2. 纯化马绒毛膜促性腺激素（eCG）。

◆案例・应用

＞＞＞使用过量排卵诱导剂进行的体外受精

取得的效果

● 转基因小鼠增产

●冻结卵子的制作（未受精卵、二细胞期胚胎、原核受精卵等）

●实现了 3Rs ——Replacement（替代）・Reduction（减少）・Refinment（改善）

使用方法

保存温度：- 20度至 -80度

注射时间：注射到 26天~30 天的 C57BL/6J 雌性小鼠（出生日为０天开始计算）效果更显著；

1)     从冰柜里取出 CARD HyperOva^® ，放置在37度的孵育器或者水浴10分钟；

2)     请于溶解后一个小时内注射试剂，注射前，请摇晃 CARD HyperOva^® 试管，把内容物摇至均匀；

3)     极少数情况下可能会析出注射器吸取不了的浮游物，这时为了避开这些浮游物，请用注射器吸取 CARD HyperOva^®；

4)     请把一支 CARD HyperOva^® 试剂（约 0.1mL – 0.2mL）注射到小鼠腹腔内；

5)     注射 CARD HyperOva^®  48小时后，再注射 7.5 IU 的 hCG 注２到小鼠腹腔内；

6)     注射 hCG 注 217 小时后，取出小鼠内卵管胀大的部位，用 HTF 培养基等体外受精用培养基取出未受精卵。一个体外受精滴，跟多于100

       个的未受精卵受精，其受精率会急剧下降。

※注1  浮游物不会对效果 CARD HyperOva^®产生影响

※注2  hCG 需要另外准备

相关资料

FERTIUP^®和CARD MEDIUM^®系列

ARK and KYD-宣传页	CARD&FERTIUP-宣传页	HyperOva-宣传页

【常见问题】                
                                                             
Q1：   CARD HyperOva^® 的保质期是多久？                          
A1：    请在生产后２年半内使用。                          
                                                     
Q2：   CARD HyperOva^® 开封后，可以少量分装吗？             
A2：    不可以，我们无法保证反复冻融后的产品质量，不建议这样做。
                                                               
Q3：  产品里含有对人体有害的物质吗？
A3：    产品里不含有对人体有害的物质。      
                   
Q4：   排卵数量不理想，这是次品吗？                               
A4：    此产品在生产后都通过质量检测，确认能达到我司规定的排卵数量，建议再次确认实验小鼠的周年龄。
            建议注射时间：建议用出生后 26 天至 30 天的 C57BL/6J 小鼠
          （以出生日为０日开始计算）来进行实验

Q5：    产品中混有杂质，是否能更换产品？
A5：    我司从生产到出货都实行严谨的品质管理体制，但是如果在商品中混入杂质，将会为您更换产品。

Q6：    产品里出现沉淀，会不会影响使用？
A6：    极少数情况可能会出现沉淀物析出况。虽然不会影响到产品质量，但请尽量用注射器把沉淀物吸走。

Q7：    CARD 超数排卵是 eCG 和抑制素抗血清的混合物吗？

A7：    是，是混合的。

Q8：    你能确定马促性腺激素来源… 重组还是纯化的？如果是重组的，来自什么动物？如果是纯化的，马来自哪个国家？

A8：     超排卵的马促性腺激素是纯化的，马来自日本。

Q9:    山羊来自哪个国家？

A9：  山羊是雄性 Saanen 山羊，出生和成长自日本。

Q10： 山羊和其他牲畜可以一起养殖？

A10： 不可以。只有与其他山羊。

Q11： 抗体是未处理的山羊血清？

A11： 山羊血清经过两次生理盐水稀释。马促性腺激素也溶于生理盐水中。

Q12： 山羊抗小鼠抑制素抗血清，免疫原是什么？

A12： 合成多肽。

Q13   瓶里有沉淀/沉积物/凝结成块。

A13： 凝结成块状物不影响 CARD 超排卵。请避开凝结物，只用液体部分。

Q14： 如果一次只用 0.3mL，是否可以将瓶内试剂用完后冷冻一下？

A14： １mL 瓶一旦打开，请一次腹腔注射完所有试剂。0.1 mL~0.2 mL 可以注射小鼠。

【参考文献】        

[1] T.Takeo and N.Nakagata, Superovulation Using the Combined Administration of Inhibin Antiserum and Equine Chorionic 

      Gonadotropin Increases the Number of Ovulated Oocytes in C57BL/6 Female Mice. PLOS ONE on May 29, 2015.

参考URL：http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0128330