SCREEN-WELL® FDA approved drug library V2 Screen-Well FDA 批准药物 化合物库 V2 品牌:Enzo


SCREEN-WELL® FDA approved drug library V2

Screen-Well FDA 批准药物 化合物库 V2

品牌:Enzo
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BML-2843-0100

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日本同仁化学FDA试剂货号:F209 Fluorescein diacetate| DOJINDO

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FDA试剂货号:F209
Fluorescein diacetate
Fluorescein diacetate
商品信息
储存条件:0-5度保存,避光
运输条件:室温
分子式:

C24H16O7

分子量:

416.38

特点:

 

● 激发和发射波长分别为488 nm和530 nm

● 可用于流式细胞仪

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选择规格:
1mg

期货

细胞染色

FDA试剂货号:F209 Fluorescein diacetate

FDA试剂货号:F209 Fluorescein diacetate

规格性状
产品概述
荧光特性
参考文献
常见问题Q&A

规格性状

规格

特性:该产物为白色结晶粉末或固体,可溶于二甲基亚砜。

可溶于二甲基亚砜:试验成功

NMR光谱:试验成功

产品概述

FDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低,因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488 nm和530 nm。

荧光特性

荧光特性:λex=488 nm, λem=530 nm

参考文献

1) B. Rotman and B. W. Papermaster, “Membrane Properties of Living Mammalian Cells as Studied by Enzymatic Hydrolysis of Fluorogenic Esters”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1966, 55, 134.

2) H. R. Hulett, W. A. Bonner, J. Barrett and L. A. Herzenberg, “Cell Sorting: Automated Separation of Mammalian Cells as a Function of Intercellular Fluorescence”, Science, 1969, 166, 747.

3) K. H. Jones and J. A. Senft, “An Improved Method to Determine Cell Viability by Simultaneous Staining with Fluorescein Diacetate-Propidium Iodide”,J.Histochem.Cytochem., 1985, 33, 77.

4) K. McGinnes, G. Chapman, R. Marks and R. Penny, “A Fluorescence NK Assay Using Flow Cytometry”, J. Immunol. Methods, 1986, 86, 7.

5) W. M. J. Vuist, F. V. Buitenen, M. A. De Rie, A. Hekman, P. Ruemke and C. J. M. Melief, “Potentiation by Interleukin 2 of Burkitt’s Lymphoma Therapy with Anti-Pan B (Anti-CD19) Monoclonal Antibodies in a Mouse Xenotransplantation Model”, Cancer Res., 1989, 49, 3783.

6) E. Prosperi, “Intracellular Turnover of Fluorescein Diacetate. Influence of Membrane Ionic Gradients on Fluorescein Efflux”, Histochem.J., 1990, 22, 227.

常见问题Q&A

Q1:如何使用FDA。

 

 

 

 

 

A1:下面给出一个例子。请根据细胞的种类,观察条件讨论细胞的固定和试剂浓度。

【例1】HeLa细胞的形态观察

将1mg的FDA溶解在2ml的DMSO中(储存溶液)

用PBS(-)溶液稀释,设为2μmol/L。(用5ml PBS(-)稀释8μl贮存溶液)

1)用胰蛋白酶-EDTA等回收HaLa细胞,制备细胞悬浊液。

2)离心分离细胞悬浊液(1000rpm, 3min)

3)除去上清,添加PBS(-)(此时细胞数为105 ~ 106cells /mL)

4)通过粘贴等充分分散。

*因为培养液中的血清等有使背景上升的危险重复②~④的操作充分清洗。

5)在1.5 mL微管中添加用4)得到的30μL细胞悬浊液。

6)在此加入15μL的FDA溶液。

7)盖上微管,37℃下孵育15min。

8)在玻璃罩上放上7)的溶液10μL,从上面再盖上一层玻璃,夹入染色的细胞悬浊液。

9)将盖杯置于荧光显微镜下,用490nm滤光器激发,观察发出黄绿色荧光的活细胞。

例2:C57BL/6小鼠脾脏细胞的双重染色,使用FDA和PI。

k.h.j ones, j.a. senft, J.Histochem.Cytochem., 33, 77 (1985).

将5mg的FDA溶解在1ml的丙酮中(储备溶液)

将上述0.04 mL溶液稀释为10ml PBS(-)。

PI将1mg溶解在50ml PBS(-)中。

在0.2 mL D-PBS溶液中混浊的细胞(2×106 cells/mL)溶液中添加0.1 mL的FDA溶液和0.03 mL的PI溶液。

孵化后观察。

【例3】使用HeLa细胞的细胞膜离子梯度对Fluorescein溶出的影响

·E.Prosperi, Histochem. J., 22, 227 (1990).

将5mg的FDA溶解在1ml的丙酮中(储备溶液)

用PBS(-),终浓度2.4μmol/L染色。

 

Q2:细胞染料的激发波长和发射波长是多少。

A2:

FDA试剂货号:F209 Fluorescein diacetate

Wako的LAL系统对内毒素检测技术的贡献-获得FDA认可


Wako的LAL系统对内毒素检测技术的贡献-获得FDA认可

Wako的LAL系统对内毒素检测技术的贡献-获得FDA认可




  内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁成分中的一种强效毒素。一旦进入到人的血液中,就会引起发热或致死性休克,因此,我们必须保证药物没有受到内毒素的污染。FUJIFILM Wako研发生产裂解试剂(鲎试剂)和检测仪器“Toxinometer”,不断推动内毒素检测技术的进步,30多年来一直支持药物的发展。

 

◆从裂解试剂的进口销售到内毒素检测仪器的开发


Wako的LAL系统对内毒素检测技术的贡献-获得FDA认可

FUJIFILM Wako位于美国的工厂(地址:弗吉尼亚州里士满)

 


  最初,内毒素检测采用的是兔热源试验。将试剂注射到兔子体内,再根据兔子体温的上升程度判断内毒素的含量。但该试验耗时长,而且使用动物的方法无法保证可靠的结果。

  1956年,美国动物学家F.B.Bang发现鲎的血液能使内毒素凝固,他利用鲎的血细胞提取物配制出内毒素检测试剂(鲎试剂,后改名为裂解试剂),随后又利用该试剂开发出了“凝胶法”。凝胶法在1980年被收录到美国药典中,而在此之前FUJIFILM Wako就已经开始进口和销售内毒素检测试剂。但凝胶法只是一种半定量法,其精确度会受检测者操作熟练度的影响。

  为解决上述问题,FUJIFILM Wako在1985年通过对传统原理的改进,首次开发出“浊度-时间分析法”和检测仪器“Toxinometer-ET-201”。与此同时,美国ACC公司(Associates of Cape Cod,.INC)利用相同的检测原理,开发出“LAL-5000”检测系统。基于这一情况,浊度-时间分析法在1987年被收录在美国食品药品监督管理局指南中。

  FUJIFILM Wako的技术开发仍在继续,1988年开发出面向少量样品用户的“Toxinometer-ET-208”,1994年升级的第二代“Toxinometer-ET-301”集收集检测数据和数据处理、报告输出等功能于一体,深受广大制药商的欢迎。

在2004年发售了第三代“ET-5000”后,目前,FUJIFILM Wako提供支持浊度法、显色法、凝胶法“Toxinometer-ET-7000”和多种试剂。作为内毒素检测的先驱,FUJIFILM Wako一直对药物的安全生产和品质管理做出贡献。

 


◆竭力推广内毒素检测技术


  目前,药典中记录的3种内毒素检测法分别为凝胶法、浊度法和显色法。除此之外还有药典未收录的β-葡聚糖检测、肽聚糖检测(SLP试剂)等多种试验法,每种试验法在操作时都有需要注意的地方。

  例如,在内毒素检测试验中需要关注试验用具、试验用水等细节。在以药典为基础的试验中则规定进行预试验和定量检测。内毒素的添加方法和求最大有效稀释率对于新手而言可能会有些困难。另一方面,试剂也有多种变化。需要根据试剂的水溶性或不同的动物血液和培养基适当调整检测方法。虽然FUJIFILM Wako会提供“内毒素试验法”手册,但其他手册中未涵括的试验法则需要在操作中多加注意。

  凭借1996年日本药典第13次改版中新收录了浊度法和显色法的契机,FUJIFILM Wako首创开展研讨会。此后,每年开展的研讨会都致力传播内毒素检测相关信息、药典中更正的注意事项以及国际动向等信息。自2008年以来,FUJIFILM Wako开始举行内毒素试验法技术研讨会,专注于实验技术的传播。

 


◆设立获FDA认可的工厂,开发世界唯一的内毒素特异性试剂


  世界上第一瓶裂解试剂是在美国开发的,而最初FUJIFILM Wako销售的裂解试剂也是从美国进口的产品。

  随着“Toxinometer”的面世,市场开始扩大,试剂需求逐步提高,FUJIFILM Wako在美国建立起了自己的工厂。除了因为当地有丰富的原料鲎以外,还能通过获得以监管严格著称的FDA认可来保证产品的质量。生产出来的试剂必须获得FDA的认可才能在美国及海外销售。

  2003年,FUJIFILM Wako收购了位于圣路易斯的Hemakem公司作为进入美国市场的立足点。然后在里士满建立新工厂,获得FDA认可并开始生产试剂。而且FUJIFILM Wako的产品是世界上唯一获得FDA认可的内毒素特异试剂。

  试剂会在试管内预先冻干,还有只需添加试剂即可进行检测的单一型试剂盒。在该领域中,世界上也是只有FUJIFILM Wako的内毒素特异试剂获得了FDA的认可。

  30年来,FUJIFILM Wako一直参与检测法的改进与“Toxinometer”的开发,并作为日本内毒素检测先驱的一员,竭力推进药物行业的发展。



更多产品详情请点击:Wako的内毒素检测系统

美国FDA鼓励利用CK-18作为药物性肝损伤生物标记物


美国FDA鼓励利用CK-18作为药物性肝损伤生物标记物


使用M65 EpiDeath® ELISA检测和定量肝损伤

肝毒性和药物性肝损伤
  检测潜在的肝毒性是药物开发和药物安全性测试期间的关键,以减少后期候选药物阶段的风险,并且药品在进入临床实践时需证明其对肝脏无副作用。

  如今,药物性肝损伤(DILI)是病人死亡率和发病率的首要原因,临床上急性肝衰竭病有超过50%的失败案例。标准肝损伤生物标志物在有限的预测值中没有足够的敏感性和特异性。在安全性研究中,大约有40%带有药物性肝损伤的患者未被发现,因此新的生物标志物是非常需要的。

NEWS!!!

2016-07-25

 
FDA向SAFE-T联盟发布药物性肝损伤(DILI)生物标志物的佐证信

  K18 角蛋白18(也为CK-18),能通过M65 EpiDeath® ELISA测量,是发布的评估性能的4个生物标志物之一,并且被FDA认为是十分有前途的生物标志物之一。在检测和预测DILI的结果时需要敏感性和特异性更好的生物标记物,而K18可满足其需要。


美国FDA鼓励利用CK-18作为药物性肝损伤生物标记物


  “我们发布这封信给SAFE-T联盟,以鼓励进一步发展和探索利用角蛋白18(CK-18)…单独或结合为可溶性检测生物标志物,以评估药物性肝损伤进展的风险。”



  “…根据现今方法一旦诊断为DILI,则新生物标志物存在明确的需要,特别是以监测为目的。”




  “这些生物标记物在检测DILI和预测急性DILI的成果中被评估出其功能。”

◆相关产品


M65 EpiDeath® ELISA

(产品编号:10040)

  M65 EpiDeath® ELISA 检测新一代的生物标记物 keratin 18 角蛋白18。M65 EpiDeath® ELISA检测细胞培养上清,血清和血浆样品中可溶性的角蛋白18(K18)。K18 的含量反应了所有上皮细胞的死亡情况,不管是由于凋亡还是坏死引起的死亡都可以检测到。

  M65® ELISA在欧洲按照CE-IVD指示作为一种体外诊断的医疗器械注册。所有试剂即开即用,更加方便。

美国FDA鼓励利用CK-18作为药物性肝损伤生物标记物

  更多试剂盒的相关内容请点击http://www.peviva.com.cn/pro2.php?id=4

  FDA报告请联系我们索取。


◆产品列表

产品编号 产品名称 包装
10040 M65 EpiDeath® ELISA
细胞死亡M65 EpiDeath ELISA试剂盒 
96 wells
10020  M65® ELISA
细胞死亡M65 ELISA试剂盒 
96 wells
10011 M30 Apoptosense® ELISA
细胞凋亡M30 ApoptosenseELISA试剂盒 
96 wells
10900 M30 CytoDEATH™ ELISA
M30 CytoDEATH 上皮细胞凋亡ELISA试剂盒 
96 wells

SCREEN-WELL® FDA 批准药物 化合物库 SCREEN-WELL® FDA approved drug library

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  • Q&A
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SCREEN-WELL®  FDA approved drug library

◆原理


    药物再定位或用于新的疾病治疗是药物研发非常重要的一部分,使用这种方法已经研发出好几种畅销药品(比如 Viagra 和 Rogaine)。高内涵筛选,新型生物标记物和非侵入性成像技术都为探索认证化合物创造了机遇。SCREEN-WELL® FDA 认证化合物库可应用于临床研究,其所有化合物都具有已知生物活性、安全性和生物利用度等特性,可加速药物研发和优化。该化合物库不含有无关的化合物,比如除草剂、杀虫剂、防晒剂和细胞毒素等。为您提供大量具有生物活性和药物类似的化合物。该化合物库是您开展药物筛选的良好开端。为了方便您进一步的研究,大多数化合物都可单独出售。

◆优点特色


●   用于心脏病学、神经精神病学、免疫学和肿瘤学等相关疾病的药物研发。

   在以前 FDA 认证化合物库的基础上增加了 100 多种化合物。

   提供 100% 已知生物活性和较大程度药物类似化合物。

●   包含近期得到 FDA 认证的化合物。

●   每一种化合物都附有详细的产品说明。

    

SCREEN-WELL® FDA 批准药物 化合物库                              SCREEN-WELL®  FDA approved drug library

◆案例应用

 药物 repositioning 或者 repurposing(重利用)是药物研发进程的重要部分,该技术已经发现了几种畅销药(比如,万艾可和落健)。高通量筛选,新的生物标记物,非入侵式影像技术可用于批准药物鉴定(批准药物的新鉴定方法)。所有的 SCREEN-WELL® FDA approved drug library V2 化合物都是已知的,FDA 已经批准并且在临床使用。已经鉴定了生物活性,安全性和生物利用度,可以明显加速研发和优化的速度。该化合物库不含有类似化合物库中的无关化合物,比如除草剂,农药、遮光剂和细胞毒素。该化合物提供了丰富生物活性的化合物,与药物类似的化合物商品。这个库的候选化合物是药物优化进程的首选。


运用:高通量筛选。

试剂盒组分:超过 780 种化合物。具有多种化学和药理特性。

浓度:10 mMDMSO 溶解,部分是用不含核酸酶的水溶解)。

保存:-80℃。

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
BML-2842-0500 FDA approved drug library   (10mM) 500 µL/well、100 µL/well
BML-2842-0100 FDA approved drug library   (10mM) 500 µL/well、100 µL/well
BML-2841-0500 FDA approved drug library 500 µL/well、100 µL/well
BML-2841-0100 FDA approved drug library 500 µL/well、100 µL/well