进一步发展干细胞研究
CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×)
CEPT是美国国立卫生研究院(NIH)开发的小分子混合物。由4种成分组成,并取其组成成分(Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB)的开头字母命名为“CEPT”。
研究表明,CEPT可防止人ES/iPS细胞(人多能干细胞;hPSCs)在细胞传代中的细胞应激和DNA损伤1)。与强效ROCK抑制剂Y-27632相似,可提高细胞传代和冻存时hPSCs的存活率。
此外,与基于hPSCs的胚状体和类器官形成、单细胞克隆和基因编辑等干细胞研究中所用的现有培养方法相比,CEPT还可改善细胞存活率1,2,3)。
FUJIFILM Wako已上线经无菌测试且无需制备的即用型CEPT Cocktail溶液。本产品为经过滤器灭菌的溶液,可直接添加至培养基使用。有助于再生医疗研究。
◆特点
● 从DNA损伤等细胞应激中保护ES/iPS细胞,维持细胞结构与功能
● 已进行过滤灭菌的即用型混合溶液
● 已通过内毒素测试以及支原体阴性检测的CultureSure系列
◆测试项目
● 浓度(HPLC):已通过测试
● 外观:液体
● 内毒素:<3 EU/mL
● 已完成无菌测试
● 已完成支原体阴性测试
◆使用方法
以1/1,000的量添加本品至培养基,充分混合后使用。
※使用注意
● 本产品为冻存品(-20°C)。为避免反复冻融,建议根据使用量分装冻存。
● 溶解时可能会出现沉淀,并非产品质量问题,请直接使用。
(沉淀于37°C下静置1~2 h可能会溶解,请避免反复冷冻和加热。)
◆适用范围
样品:人ES/iPS细胞
应用:
◆性能数据
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure® hPSC Δ培养基,在37°C,5% CO2的条件下培养人iPS细胞201B7株(6孔板 1 well=9.5cm2)。
培养经过16 h以后,更换不含CEPT或Y-27632的培养基,每2~3天更换培养基,继续培养。
培养第8天时,确认细胞后,使用4%多聚甲醛固定细胞,ALP染色后,计数细胞集落。
单细胞克隆测试
添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure® hPSC Δ培养基,在37°C,5% CO2的条件下培养人iPS细胞201B7株(96孔板)。
培养经过16 h以后,更换不含CEPT或Y-27632的培养基,每2~3天更换培养基,继续培养。
培养第13天时,确认细胞后,使用4%多聚甲醛固定细胞,ALP染色后,计数形成细胞集落的孔数与空孔数。
通过所有孔数与细胞集落形成孔数之比,计算细胞集落形成率。
【结果】
细胞接种数少时,添加CEPT的组比添加Y-27632的组形成的细胞集落更多。
未分化人iPS细胞的维持确认
【细胞株】人iPS细胞201B7株
【培养基】StemSure® hPSC培养基Δ+35 ng/mL bFGF
Red: rBC2LCN-635(人iPS细胞膜染色)
Blue: DAPI (细胞核染色)
※ BC2LCN是一种对存在与人ES/iPS细胞的膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素
添加CEPT时
|
添加Y-27632时
|
【结果】
添加CEPT时与添加Y-27632时都未观察到细胞形态的差异,均可确认未分化维持状态。
◆产品列表
产品编号 |
产品名称 |
产品等级 |
产品规格 |
033-26071 |
CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×) CultureSure™ CEPT混合物(1,000×) |
细胞培养用 |
300 μL |
相关产品
产品编号
|
产品名称
|
产品等级
|
产品规格
|
197-17571
|
StemSure® hPSC Medium Δ StemSure®人多能干细胞培养基
|
细胞培养用
|
100 mL
|
193-17573
|
100 mL×4
|
062-06661
|
bFGF Solution, MF 成纤维细胞生长因子溶液(碱性)
|
细胞培养用
|
50 μL
|
068-06663
|
50 μL×4
|
195-16031
|
StemSure® Freezing Medium StemSure® 细胞冻存液
|
细胞培养用
|
100 mL
|
192-19081
|
StemSure® hPSC Remover (rBC2LCN-PE38 ) StemSure® hPSC未分化干细胞清除剂
|
细胞培养用
|
100 μL
|
035-24593
|
CultureSure™ 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free CultureSure™ 10mmol/l Y-27632 溶液,无动物源
|
细胞培养用
|
1 mL
|
039-24591
|
300 μL
|
259-00613
|
Y-27632, MF 选择性强效ROCK抑制剂
|
细胞培养用
|
5 mg
|
257-00614
|
25 mg
|
030-24021
|
CultureSure™ Y-27632 CultureSure™ Y-27632(选择性ROCK抑制剂)
|
细胞培养用
|
1 mg
|
036-24023
|
5 mg
|
034-24024
|
25 mg
|
030-24026
|
100 mg
|
点击此处下载产品宣传页:CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×)
点击此处下载产品宣传页:iPSC用小分子宣传册