上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品,欢迎访问官网了解更多信息
特点:
● 荧光强度与细胞(核)呈正相关,线性好。
● 作为细胞数量的二次校正,用于计算各种指标在细胞中的平均值。
试剂盒内含
产品概述
本试剂盒包含细胞核染色试剂(Hoechst 33342)和优化微孔板法的专用缓冲液,只需添加到细胞培养基中即可轻松测得细胞数量。
原理
细胞计数校正的必要性
使用微孔板分析细胞时。细心的实验者会发现:每次获得的结果可能会有所不同,这是因为因为孔板中实际的细胞数量会有所不同。
在这种情况下,有必要根据样品中细胞的实际数量来校正测量值(达到归一化)。
主流方法比较
作为吸光度实验校正的方法,细胞计数检测的指标(细胞核、蛋白质的质量)有很多,
在这之中细胞核染色作为最简便的操作方法,并可以实验多样本同时检测。
本试剂盒
(细胞核染色法) |
细胞计数法 | 蛋白定量法 | |
操作简便性 | ○ | × | △ |
对应多种样品处理 | ○ | × | △ |
可检测活细胞 | ○ | ○ | × |
细胞裂解后检测 | × | × | ○ |
和实际细胞数的一致性 | △*1 | ○ | △*2 |
※1 : 细胞核数量改变的话,可能会有和实际数目不一致的情况。
※2 : 蛋白质的量改变的话,可能会有和实际数目不一致的情况。
与细胞数量的关联性
在微孔法测定实验中,需要进行数据校正时,必须使用与细胞数相对应的评估方法。 在下面的实验中,证实了荧光强度与细胞数一致性,并且作为实验例,证实了方法的可靠性。
荧光强度与细胞数的一致性比较
荧光强度根据细胞数而变化,并且获得高度线性的结果。
梯度稀释HeLa细胞,接种于96孔板上,培养过夜,然后用该试剂盒进行测量。
与细胞计数方法的比较
实验过程中,校正产生的结果与细胞计数方法。
HeLa细胞中添加2-DG(2-脱氧葡萄糖)后培养24小时,使用乳酸检测试剂盒Lactate Assay Kit-WST(货号:L256)测量培养基上清液中乳酸的含量。
然后分别使用本试剂盒或细胞计数法对获得的结果进行校正。
关联产品