whatman 903 Protein Saver Card蛋白保存卡10534612

whatman 903 Protein Saver Card蛋白保存卡

简要描述:

即用型卡片和工具包,节省样品收集、运输和归档所需的时间和成本。
严格的质量控制与GMP生产标准,确保高水平的质量、重现性和纯度。
本公司的903蛋白保存卡的样品收集区域有五个直径1.27厘米的圆圈。每圈可吸收75-80微升的样品。可折叠封面可以记录姓名和样品收集日期,并根据USPS规定印有通用的生物危害标志。蛋白保存卡可存放在Whatman铝箔分层自封袋中。

whatman 903 Protein Saver Card蛋白保存卡

订购信息:

10531014 903 BRUSSEL (DUTCH) 1/PK
10534104 903 PUERTO RICO 1/PK
10534108 903 BAYLOR 1/PK
10534168 903 UTAH DOUBLE 1/PK
10534173 903 MICHIGAN SINGLE I/PK
10534193 903 WEST VIRGINIA 1/PK
10534295 903 CDC PERF 1/PK
10534305 903 ADALTIS 1/PK
10534306 903 LOUISIANA RED 1/PK
10534307 903 WISCONSIN 1/PK
10534366 903 MARLAB 1/PK
10534367 903 MARLAB 1/PK
10534416 903 TENNESSEE 1/PK
10534440 903 LOUISIANA BLUE 1/PK
10534443 OLD 903 OREGON DOUBLE 1/PK
10534444 OLD 903 OREGON FOR NEVADA 1/PK
10534446 OLD 903 OREGON FOR IDAHO 1/PK
10534451 903 OREGON FOR NEVADA 1/PK
10534453 903 OREGON HAWAII RPT 1/PK
10534455 903 ORGEON MADIGAN SGL 1/PK
10534486 903 UMASS FOR MASS 1/PK
10534503 903 UMASS FOR PA HOSP 1/PK
10534523 903 KANSAS INIITIAL ENGH 1/PK
10534536 903 MARYLAND 77 1/PK
10534537 903 MARYLAND 79 1/PK
10534539 903 COLORADO DOUBLE 1/PK
10534540 903 COLORADO SUPP 1/PK
10534549 903 ALBERTA 1PK
10534567 903 CWH BC CANADA 1/PK
10534578 903 INDIANA UNIV 1/PK
10534587 903 MARLAB SSA 1/PK
10534595 903 ALABAMA A 1/PK
10534596 903 ALABAMA B 1/PK
10534603 903 DELAWARE 1/PK
10534605 903 UMASS FOR MAINE 1/PK
10534606 903 UMASS FOR NEW HAMP 1/PK
10534611 903 KENTUCKY 1/PK
10534635 903 OKLAHOMA 1/PK
10534639 903 IOWA 1/PK
10534640 903 NORTH DAKOTA 1/PK
10534649 903 MISSISSIPPI 1/PK
10534657 903 UMASS FOR VERMONT 1/PK
10534670 903 NEBRASKA 1/PK
10534672 903 UTAH MISC 1/PK
10534678 903 ST JOHN JANEWAY 1/PK
10534683 903 GEORGIA 1/PK
10534687 903 CDC NEONATAL (NOCIRC) 1/PK
10534690 903 SOUTH CAROLINA 1/PK
10534692 903 OREGON FOR ALASKA DBL 1/PK
10534693 903 OREGON MADISON DBL 1/PK
10534694 903 OREGON SINGLE 1/PK
10534695 903 OREGON FOR IDAHO SGL 1/PK
10534696 903 OREGON FOR ALASKA SGL 1/PK
10534697 903 OREGON FOR HAWAII SGL 1/PK
10534698 903 ORGEON PKU SINGLE 1/PK
10534708 903 CONNECTICUT GREEN 1/PK
10534724 903 MAYO SUPPORT 1/PK
10534726 903 NORTH CAROLINA 1/PK
10534731 903 UMASS FOR RHODE ISLD 1/PK
10534732 903 IWK 1/PK
10534734 903 MISSOURI REPEAT 1/PK
10534735 903 MISSOURI INITIAL 1/PK
10534749 903 FLORIDA SINGLE 1/PK
10534751 903 Quebec 1/PK
10534752 903 WHO NN KIT 1/PK
10534756 903 SINGLE CARD GREECE  1/200
10534759 903 CDC 15 SPOT 1/PK
10534769 903 CDC 10 SPOT 1/PK
10534780 903 BIOTECHA SGL 1/PK
10534781 903 Single card Poland
10534782 903 UNI OF IOWA 1/PK
10534784 903 NEW BRUNSWICK 1/PK
10534785 903 VWR FOR CHEO 25/PK
10534787 903 MADRID 1/PK
10534789 903 Alpha Kit card German
10534790 903 CALIFORNIA 1/PK
10534793 903 OREGON NEW MEX DBL 1/PK
10534794 903 NHLS MERCK 1/PK
10534795 903 SIMPLE SCREENING 1/PK
10534798 903 Texas Snap-A-Part 1/PK
10535072 903 SINGLE CARD MALLORCA 1/100
10535077 903 SINGLE CARD GOBIERNO VASCO
10535082 903 NEONATAL SCOTLAND 1/100
10535085 903 MULTIPART NEO FORM 1/100
10535089 903 SINGLE C. CANTABRIA 1/100
10535091 903 HEIDELBERG GERMAN 1/200
10535092 903 HEIDELBERG QATAR  1/100
10535093 903 SINGLE GALIZIA BLOOD 1/100
10535094 903 SINGLE GALIZIA URINE 1/100
10535095 903 MULTIPART DUBLIN  1/100
10535098 903 NEO CARD LEEDS 1/100
10535101 903 NEONATAL DRESDEN 1/200
10535104 903 NEONATAL BERLIN 1/200
10535108 903 SINGLE CARD BERLIN 1/100
10535120 903 SINGLE CARD ICELAND 1/200
10535125 903 PRINZ LEOPOLD SINGLE 1/100
10535128 903 MULTIPART ESTONIA 1/100
10535129 903 NEO CASS BRUGES 1/100
10535130 903 NEO CASSETTE GHENT 1/100
10535131 903 NEO CASS ANTWERP 1/100
10535132 903 MARLAB FOR COSTA RICA 1/PK
10535134 903 TEXAS MEDICAID 1/PK
10535136 903 TEXAS DBL PAID 1/PK
10535141 903 SIGMA ALDRICH STIX 1/PK
10535143 903 SINGAPORE 1/PK
10535146 903 NEONATAL RUSSIAN 1/PK
10535149 903 KASSARA BIOTINIDASE 1/PK
10535158 903 AUCKLAND NICU 1/PK
10535636 903 SINGLE CARD 1/PK
10535639 903 NEONATAL SAUDI ARABIA CARD
10535642 903 WALLAC 5 SPOT 1/PK
10535643 903 MONTANA SINGLE 1/PK
10536740 903 SINGLE CARD SLOVAKIA 1/200
10537279 903 MULTIPART NEONATAL 100/PK
10537518 903 NEONATAL LEIPZIG 1/100
10537560 903 NEONATAL BIOMNIS 1/100
10537630 903 NEONATAL NORWAY 1/200
10537646 903 SINGLE CARD AZIENDA MEYER FLORENZ
10537648 903 AUCKLAND NEWBORN 1/50
10537649 903 AUKLAND MON PAT PK
10537881 903 NEW YORK 1/PK
10538069 903 NEONATAL STD EU ENG 100/PK
10538070 903 NEO FLORENCE GREEN 1/100
10538072 903 NEOGEN SINGLE 1/100
10538073 903 WALLAC RUSSIA CE  1/200
10538074 903 NEONATE KAROLINSKA 1/100
10538075 903 UNI WIEN CARD 1/100
10538078 903 NEOSCREEN CARD 1/200
10539522 903 SINGLE CARD LILLE 1/1000
10539523 903 CRD NN CFOH 1/100 TAIWAN
10539639 903 AUSTRALIA SINGLE 1/10
10539649 903 SINGLE CARD BOLOGNA 1/100
10539695 903 NEONATAL GIESSEN 1/100
10539699 903 NEO SAUDI ARABIA 1/100
10539713 903 PE CASSETTE 1/PK
10539717 903 ST FRANCIS HOSPITAL
10539718 903 Kaiser Genetics Card
10539721 903 NN ISRAEL ENGLISH 100PK
10539735 903 MARCON 1/PK
10539755 903 Palestine card 200/PK
10539763 903 SINGLE CARD POLAND 1/100
10539764 903 CONNECTICUT BLUE 1/PK
10539765 903 SD FOR IOWA 1/PK
10539856 903 SINGLE CARD NEONATE 1/200
10539894 903 PHILIPPINES SINGLE 1/100
10539980 903 SINGLE CARD CHINA 1/200
10535201 903 GLASS ENV UK MULTI 1000/PK
10535073 CARTES 903CNTR CARIBEEN 100/PK
10535160 903 GLASSINE 1000/PK 10535082
10535200 903 DOWNSMONITRNG 100/PK CARDS
10539508 903 NBS ULB Card
10539509 903 SCREEN NBS CARE CHUDELIEGE
10539511 903 NBS – UCL Screening Card
10539514 903 LABORATORIO CENTRALE ROMA
10539719 903 TEMPLE ST MONITOR 100/PK
10539800 903 NN ISRAEL HEBREW 100PK
10534625 903 SSPR1 DPC 006- 0105 1/PK
10534802 903 PHRI CARD
10534677 903 CARD CAL DOJ 100/PK
10535178 903 GENPROBE 1/PK
10535169 903 BIORAD NEO card
10535090 903NN NAPOLI ITALY 100/PK
10537631 903 NN HVD DE/UK/KUWAIT 100/PK
10534806 903 NN IT ROMA CASSETTE 100/PK
10536741 903 NN ITALY CATANIA 100/PK
10534805 903NN TAIPHAT VIETNAM 100/PK
10538087 903 NEO PISA CARD 1/PK
10534809 903 GANGARAM HOSPITAL
10536742 903 CENTOGENE
10539702 903 MOH UAE 1/PK
10534801 903 NEW MEXICO NBS KIT SINGLE
10539528 CF12 GENE SMART 1/PK
10535171 903 MALAYSIA NEONATAL 1/PK
10538089 903 NEO CAGLIARI CARD
10539529 903 ROMA CASSETTE 1PK
10534815 903 NN CIRCAGEN 1PK
10535172 903 GENERIC NEONATAL ITALY 1PK
10530000 903 NeoProgen 1/pk
10530001 903 Neo Croce Italy 1/pk
10530002 903 India Generic
10530003 903 U of Stirling
10530005 903 OREGON/OREGON TRIPLE
10530006 903 OREGON NICU NEVADA
10530015 903 NICU OREGON IDAHO
10530007 903 OREGON NICU ALASKA
10530004 903 OREGON NICU NEW MEXICO
10530009 903 BIOZEQ KENYA
10530010 903 QUEBEC RED
10530019 OREGON NICU HAWAII
10530011 903 QUEBEC GREEN
10534746 903 AC Alpha kit Card
10530008 903 OREGON MILITARY NICU
10530016 903 NEO NAPOLI
10530021 903 POTENZA
10530023 903 HVD GREECE FOR KUWAIT
10534740 903 NEONATAL CYPRUS CARD 1/100
10530029 903 EXPERTMED PALERMO
10530014 903 PATHLAB INDIA
10530030 903 VIETNAM HUE
10530033 903 ACEFE MURCIA BLOOD
10530037 903 EXPERTMED PADOVA
10530039 903 EXPERTMED NTD
10530046 903 MERCK ANGOLA
10530043 903 IMMUNOSCREEN RUSSIA
10530045 903 Ukraine Neonatal Card (903 Body Fluid Collection Paper)
10539858 903 UNI FREIBURG
10530047 903 NEO SCREEN ID LEIPZIG
10530041 903 NN ATHAL GREECE
10530051 903 MERCK VENEZUELA
10530052 903 FABHET PERU
10534222 903 QUEEN E HOSPITAL 1/pk
10530055 903 HEALTHPOINT DIAGNOSTICS 1/pk
10530056 903 DELAWARE NBS CODE 3007N
10530057 903 DELAWARE NBS CODE 3007
10530060 903 ATHAL NEOLAB
10530065 903 NEO MILANO
10530068 903 NEO CATANIA DDP CARDS
10530070 903 UNITED LAB KUWAIT W COVER
10530074 903 BOLOGNA CASSETTE
10530080 903 GIROLAB 1/PK
10530077 903 NEO BAMBINO GESU
10530083 903 CHAI perforated HIV card
10530084 903 Neonatal Saudi Arabia Card
10530078 903 Guatemala-SanJuan
10530079 903 Guatemala-Roosevelt
10530089 903 Neonatal Tu Du card
10530090 Neo ASL 8 Cagliari Card
10530092 903 Zentech Control Card
10530093 903 Neonatal Zentech Card
10530111 903 Neonatal CUHK card
10530112 903 Biotek RMA
10531019 903 TC UNI TUEBINGEN  1/100
10534358 903 SAS 1/PK
10534528 903 HEREDILAB 1/PK
10534545 903 HAHC HIV 1/PK
10534546 903 HAHC HCV 1/PK
10534682 903 YALE CF 1/PK
10534691 903 KANSAS LEAD 1/PK
10534705 903 DOCUSOURCE DNA 1/PK
10534711 903 GENECARE PRENATAL 1/PK
10534716 903 LABCORP 1/PK
10534719 903 NTD 1/PK
10534723 903 UCONN CF SGL W/ENV 1/PK
10534727 903 NORTH CAROL HEMOGLOB 1/PK
10534737 903 CDC 100/PK
10534738 903 TAMARAC LEAD CARD 1/PK
10534742 903 SEDIA BIOSCIENCES 1/PK
10534754 903 MACRO INT 1/PK
10534772 903 HANSON MEDICAL 1/PK
10534778 903 UAB CMV 1/PK
10534799 903 SOUTH BEND 1/PK
10535096 903 METAMETRIX FATTY ACID
10535147 903 PROBT 1/PK
10535153 903 ALPHA ONE 1/PK
10535155 903 CHROMSYSTEMS 1/PK
10535650 903 MANCHESTER NHS HPA 1/100
10538077 903 SINGLE CGC PORTUGAL  1/100
10538080 903 DBS COLL DEVICE 1/100
10538086 903 INTEGRATED GENETICS
10538416 903 SINGLE CARD HANNOVER 1/200
10539560 903 GENZYME LYSOSOMAL 1/100
10539570 903 GENZYME LYS KIT 1/100
10539762 903 SINGLE CARD IBL HH 1/100
10539627 903 BLOODSTEM CELLS CRD 100/PK
10535165 903MM IgG FOOD AB 100/PK
10539527 903CARD NACO INDIA 100/PK
10535164 903LG FOOD AB WOLOGO 1PK
10535202 903 ADUL-CHD AGENT KONSENS ENG
10539512 903 HEALTH POINT 1/PK DIAGNOST
10535203 903 CRDS SANFORD 1/PK
10539513 903 HEREDILAB ALPHA CARD
10535168 903 GENZYME FRANCE A/C 100/PK
10539629 903 Nationwide Lead Card
10534410 903 HHALA  HbA1c pk/1
10539206 903 S3 CARD DESICC BAG 1/PK
10534813 903 TRICORE LEAD 1PK
10539519 903 CRD RIGA LATVIA 100PK
10530013 903 UCS SENTINELA 1/pk
10530012 903 VT LEAD CARD
10530018 903 NACO INDIA KIT
10530032 903 ROCHE PERFORATED
10530024 ZIPLOCK BAGS 50/PK
10530026 903 SANCD INDIA
10530028 903 ALERE
10530025 903 ICON
10537441 CF12 0.25IN CIRCLES 1000/PK
10530034 903 LUMINEX CONTROL 3 CIRCLE
10530042 903 Alere UK
10530044 903 GENZYME EUROPE 1/PK
10530053 903 CHILDRENS NATIONAL MEDICAL 1/pk
10530054 903 GENE SMART (NEW) 1/pk
10530058 903 SC ADULT Hb 1/pk
10530059 903 PBM GRAPHICS
10530061 CF12 US BIOTEK 1/PK
10530066 903 PROdesign AC Perf Card
10530069 903 MAYO POST MORTEM CARD
10530072 903 PERFORATED 5 CIRCLES
10530076 903 AC SYNAGEVA
10530082 903 SYNAGEVA CARD
10530088 903 GGC Card
10531018 903  PROTSAVER 5 SPOT 100/PK
10534150 BIOHAZARD LABELS 1000/PK
10534320 PROTEINSAVER SNAP APART 100PK
10534321 ZIP LOCK BACK 100/PKG
10534612 903 PROTEINSAVER US 100/PK
10537173 DRYING RACK W/OUT VELCRO 10/PK
10539521 DRYING RACK WITH VELCRO 10/PK
10548232 PLASTIC ZIPLOCK BAG 100/PK
10548234 DESICCANT PACK 100/PK
10548236 GLASSINE ENVELOPE 100/PK
10534804 903 FTA OHS 1/PK
10530086 903 Luminex 3 Spots Card
10530087 903 Luminex 6 Spots Card
10530104 903 India Research Card 1pk
10530115 (INT) 903 50 INCH WIDE (600M NOMINAL) FINISHED GOOD
10384173 CF12 1INx200FT 1/PK
10535097 CF12 210X297MM 100PK
10538017 CF12 46X57CM 100PK
10538018 CF12 58X58CM 100PK
10538019 CF12 8X10IN 100PK
10538041 CF12 8X12IN 100PK
10530017 BIODESIX CUSTOM CARD
10530036 CF12 OMEGAMETRIX EU
10530073 903 16.25IN FOR EBF
10530075 CF12 BAYCOM DIAGNOSTICS
10534644 903 MP BIOMED SMALL 1/PK
10534645 903 MP BIOMED LARGE 1/PK
10535150 903 KASSARA CONTROL 1/PK
10535151 903 KASSARA MULTI CONTROL 1/PK
10535641 903 GEESTHACHT CONTROL CARD
10538091 903 MONOBIND CONTROL 1PK
10538092 903 MONOBIND CALIBRATOR 1PK
10530027 903 LUMINEX CONTROLS
10530031 903 AC SINGLE CARDS

小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精


小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精

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小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精 小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精 回到小鼠生殖工程冻存及培养试剂


材料

 

1、 用CARD以外的方法来冻存精子(冻存管或者吸管)
2、 过量排卵处理后的雌性小鼠
3、
FERTIUP®精子孵育培养基(Cosmo Bio Co., Ltd)
4、
CARD MEDIUM®Cosmo Bio Co., Ltd)
5、
mHTF
6、 恒温水箱(37°C)
7、 复苏精子用的漂浮装置
8、 剪刀
9、 吸水纸
10、1.5 mL  EP管(微型离心管)(Quality Scientific Plastics 1.5ml Graduated Microcentrifuge Tube with Flat Top Cap, Natural Cat.No. 509-GRD-Q)
11、离心分离机
12、电动移液器(GILSON PIPETMAN P-200 P-1000)
13、培养皿(Corning 35mm X 10mm Cat.No.430588)
14、流动石蜡(nacalai Cat.No.26137-85)
15、CO2培养箱

方法

制作复苏精子的漂浮装置

1、50ml的离心管与泡沫组合成漂浮装置如下图,用于精子复苏。
 

小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精



复苏精子前的准备


1、准备恒温水箱(37°C)
2、用37°C的温水装满漂浮装置的离心管后,放进水箱里,装置就会上浮,如下图


小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精



3、在复苏精子前30分钟,制作精子预孵培养皿(100μl FERTIUP® 精子预孵培养基滴液),静置在培养箱里。


小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精


4、采集卵子前10分钟,制作一个采集卵子用的培养皿(200μL的CARD MEDIUM®滴液),静置在培养箱里。

※根据体外受精用的精子的不同,CARD MEDIUM®调试方法也不同。具体请参考操作说明书。


小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精


5、制作清洗卵子用的培养皿(80µLmHTF滴液4个),在培养箱里静置30分钟以上。


小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精




未受精卵的采集和培养


1、让进行了过量排卵处理的雌性小鼠在注射了hCG 的15~17个小时后安乐死,然后把卵子块放进采集卵子用的培养皿的CARD MEDIUM®滴液里(一滴液里可放3~10只雌性小鼠的卵子块)。

※ 从雌性小鼠安乐死后到将输卵管取出,再把卵子放入受精用的CARD MEDIUM®滴液这一过程要在极短时间内完成(30秒内)。

※一个人实验的情况下,请不要一次性安乐死数只雌性小鼠,应该一只只地进行,并迅速采集卵子。
2、未受精卵在采集卵子培养皿里预孵培养60分钟。
 

小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精

解冻精子


1、从液氮储存器中取出样品(放有冻结精子的试管或吸管),迅速放置37°C恒温水箱里。
精子在冻存管的情况下,要迅速打开管盖,倒掉管内的液氮,然后浸泡在恒温水箱内。精子在吸管的情况下,要迅速将吸管放置恒温水箱的漂浮装置里。


小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精


2、把样品内的所有精子悬浊液移置到1.5ml的EP管内,慢慢加入37°C的mHTF (1.2mL),轻轻搅拌后进行离心(300g 5分钟 室温);

小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精


3、去除澄清层(mHTF 里含有约30μL的颗粒会沉淀在试管底部)。然后加入37°C的FERTIUP®精子预孵培养基70μL,轻轻摇匀)


小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精


4、用枪头吸取EP管内的全部液体,注射进精子预孵培养皿的滴液里,进行30分钟的预孵培养。
 

小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精



受精


1、用枪头吸取预孵后的未受精卵时,尽量少吸入培养液,然后把未受精卵注射到含有复苏精子的精子预孵培养皿的滴里,进行受精。


小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精


2、受精3小时后,在清洗卵子培养皿的mHTF滴液里清洗正常形态的卵子,培养至次日。


小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精


3、受精6个小时后,仔细观察卵子,去取单性生殖卵(卵子细胞内只有1个原核),其余卵子培养至次日。
4、次日,只把发育到2细胞期的胚胎移到清洗卵子用的培养皿内留下的滴液里,数完胚胎数后,就能将其用于移植或者冻存。

小鼠生殖工程学技术——9CARD以外的方法冻存的精子进行体外受精

参考文献

   [1]   Nakagata N., Takeo T., Fukumoto K., Haruguchi Y., Kondo T., Takeshita Y., Nakamuta Y., Umeno T., and Tsuchiyama 

          S. 2014. Rescue In VitroFertilization Method for Legacy Stock of Frozen Mouse Sperm. J Reprod Dev. 60(2): 168-171


小鼠超排卵诱发试剂 CARD HyperOva® F.D.

小鼠超排卵诱发试剂
CARD HyperOva® F.D.

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

CARD HyperOva® F.D.小鼠超排卵诱发试剂                              CARD HyperOva® F.D.

小鼠超排卵诱发试剂



由熊本大学动物资源与开发中心(CARD)研发生产的 CARD HyperOva® F.D.(冻干粉)是一款可以高效诱发排卵的超排卵诱发试剂。CARDHyperOva®(日本专利号 5927588)与传统的超排卵诱导方法 PMSG-hCG 相比,其诱导排卵的效率更高。传统 PMSG-hCG 方法,平均每只 C57BL/6J 小鼠只能获得约 20 个卵子,但使用 CARD HyperOva® 可以高达3-4倍。由于该试剂为冻干产品,可冷藏保存于4°C下,与之前的 CARD HyperOva® 相比,其保存稳定性更好。



◆产品组成


1. 无菌蒸馏水×1 vial

2. 冻干CARD HyperOva® F.D. ×1 vial

 


◆制备方法

1)  使用注射器从小瓶中吸出所有无菌蒸馏水(2 mL)。


2)  将1)中吸出的无菌蒸馏水添加到 CARD HyperOva® F.D. 小瓶中,轻

2)  颠倒小瓶数次,以确保 CARD HyperOva® F.D. 充分溶于水中。


3)  通过注射 0.1-0.2 mL(i.p.)2)中所制的 CARD HyperOva® 溶液到雌

3)  小鼠的腹腔中。


4) 完成3)的 48-52 h 后,注射 5-7.5 IU(i.p.)的人绒毛膜促性腺激素(hCG)。

小鼠超排卵诱发试剂                              CARD HyperOva® F.D.


◆储存方式


CARD HyperOva® F.D. 小瓶储存于4°C下,使用前请勿开启。



◆注意


●  仅供研究使用。

●  不得用于动物药物治疗以外的研究。

●  该产品虽然不含有害成分,但请勿饮用或应用于人体。



◆产品列表


产品编号

产品名称

包装

KYD-015-EX

CARD HyperOva® F.D.

促小鼠排卵试剂(冻干品)小鼠超排卵诱发试剂                              CARD HyperOva® F.D.干粉状新品

1×2 mL

KYD-015-EX-X5

5×2 mL



◆相关产

产品编号

产品名称

包装

KYD-011-EX-2

CARD KSOM

2 mL

KYD-011-EX-5

5 mL

KYD-012-EX

CARD 1M DMSO

1 mL

KYD-013-EX-0.5

CARD DAP213

500 μL

KYD-013-EX-1

1 mL

KYD-003-EX

CARD MEDIUM

1 Kit

KYD-010-06-EX

CARD HyperOva®

600 μL

KYD-010-06-EX-X5

5×600 μL

KYD-010-EX

1 mL

KYD-010-EX-X5

5×1 mL

常见问题



1.  活性:剂量是否相同(0.1-0.2 mL)?

1.  是的。HyperOva F.D. 的活性与液体规格的一样。


2.  有报告称,使用液体规格的产品时,在管中有白色沉淀物(纤维蛋白)。F.D. 会出现这种情况吗?

1.  不会。冻干前已经去除了纤维蛋白。


3.  HyperOva FD 在复溶后,是否可以进行分装和冻存?若可以,分装后冻存可以储存多久?

1.  与标准 HyperOva 类似,HyperOva F.D. 在复溶后可以分装并冻存一次,且不影响功效。请注意,目前尚无有关复溶/冻存 HyperOva F.D. 后

     保质期的数据。


4.  复溶后,HyperOva 可在冰箱内储存多久?

1.  确保可储存一个月。超过该时限,我们暂无相关实验数据。


5.  复溶后的产品在什么温度下使用?

1.  请在“室温”(通常为 15-25°C )下复溶产品。

过量排卵诱导试剂 CARD HyperOva ®

过量排卵诱导试剂
CARD HyperOva ®

  • 产品特性
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  • 参考文献

过量排卵诱导试剂过量排卵诱导试剂                              CARD HyperOva ®

CARD HyperOva®

 


试剂概要


CARD HyperOva® 是一种与传统的过量排卵法(PMSG-hCG法)比较,以能诱导更多排卵为目的而研究出的优秀过量排卵催诱剂。

使用这款诱导剂,即使是以前只能提供少量卵子的小鼠也能获得更多的未受精卵。

在用体外受精的转基因小鼠时 ,体外受精使用 CARD MEDIUM®后,就能高效增加二细胞期胚胎数。


过量排卵诱导试剂                              CARD HyperOva ®

过量排卵诱导试剂                              CARD HyperOva ®

※产品外包装

 


组成

1. 抑制素 inhibin 抗体

2. 纯化马绒毛膜促性腺激素(eCG)。

 


◆案例应用


>>>使用过量排卵诱导剂进行的体外受精

 

取得的效果

 

转基因小鼠增产

●冻结卵子的制作(未受精卵、二细胞期胚胎、原核受精卵等)

●实现了 3Rs ——Replacement(替代)・Reduction(减少)・Refinment(改善)

 

过量排卵诱导试剂                              CARD HyperOva ®

※过量排卵后的卵子胀大部位  

过量排卵诱导试剂                              CARD HyperOva ®

※体外受精培养的小鼠


使用方法

 

保存温度:- 20度至 -80度

注射时间:注射到 26天~30 天的 C57BL/6J 雌性小鼠(出生日为0天开始计算)效果更显著;

1)     从冰柜里取出 CARD HyperOva® ,放置在37度的孵育器或者水浴10分钟;

2)     请于溶解后一个小时内注射试剂,注射前,请摇晃 CARD HyperOva® 试管,把内容物摇至均匀;

3)     极少数情况下可能会析出注射器吸取不了的浮游物,这时为了避开这些浮游物,请用注射器吸取 CARD HyperOva®

4)     请把一支 CARD HyperOva® 试剂(约 0.1mL – 0.2mL)注射到小鼠腹腔内;

5)     注射 CARD HyperOva®  48小时后,再注射 7.5 IU 的 hCG 注2到小鼠腹腔内;

6)     注射 hCG 注 217 小时后,取出小鼠内卵管胀大的部位,用 HTF 培养基等体外受精用培养基取出未受精卵。一个体外受精滴,跟多于100

       个的未受精卵受精,其受精率会急剧下降。

※注1  浮游物不会对效果 CARD HyperOva®产生影响

※注2  hCG 需要另外准备


 

相关资料


过量排卵诱导试剂                              CARD HyperOva ®

过量排卵诱导试剂                              CARD HyperOva ®FERTIUP®和CARD MEDIUM®系列


过量排卵诱导试剂                              CARD HyperOva ® 过量排卵诱导试剂                              CARD HyperOva ® 过量排卵诱导试剂                              CARD HyperOva ®
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【常见问题】                
                                                             
Q1:   CARD HyperOva® 的保质期是多久?                          
A1:    请在生产后2年半内使用。                          
                                                     
Q2:   CARD HyperOva® 开封后,可以少量分装吗?             
A2:    不可以,我们无法保证反复冻融后的产品质量,不建议这样做。
                                                               
Q3:  产品里含有对人体有害的物质吗?
A3:    产品里不含有对人体有害的物质。      
                   
Q4:   排卵数量不理想,这是次品吗?                               
A4:    此产品在生产后都通过质量检测,确认能达到我司规定的排卵数量,建议再次确认实验小鼠的周年龄。
            建议注射时间:建议用出生后 26 天至 30 天的 C57BL/6J 小鼠
          (以出生日为0日开始计算)来进行实验

Q5:    产品中混有杂质,是否能更换产品?
A5:    我司从生产到出货都实行严谨的品质管理体制,但是如果在商品中混入杂质,将会为您更换产品。

Q6:    产品里出现沉淀,会不会影响使用?
A6:    极少数情况可能会出现沉淀物析出况。虽然不会影响到产品质量,但请尽量用注射器把沉淀物吸走。


Q7:    CARD 超数排卵是 eCG 和抑制素抗血清的混合物吗?

A7:    是,是混合的。


Q8:    你能确定马促性腺激素来源… 重组还是纯化的?如果是重组的,来自什么动物?如果是纯化的,马来自哪个国家?

A8:     超排卵的马促性腺激素是纯化的,马来自日本。


Q9:    山羊来自哪个国家?

A9:  山羊是雄性 Saanen 山羊,出生和成长自日本。


Q10: 山羊和其他牲畜可以一起养殖?

A10: 不可以。只有与其他山羊。


Q11: 抗体是未处理的山羊血清?

A11: 山羊血清经过两次生理盐水稀释。马促性腺激素也溶于生理盐水中。


Q12: 山羊抗小鼠抑制素抗血清,免疫原是什么?

A12: 合成多肽。


Q13   瓶里有沉淀/沉积物/凝结成块。

A13: 凝结成块状物不影响 CARD 超排卵。请避开凝结物,只用液体部分。


Q14: 如果一次只用 0.3mL,是否可以将瓶内试剂用完后冷冻一下?

A14: 1mL 瓶一旦打开,请一次腹腔注射完所有试剂。0.1 mL~0.2 mL 可以注射小鼠。


【参考文献】        

[1] T.Takeo and N.Nakagata, Superovulation Using the Combined Administration of Inhibin Antiserum and Equine Chorionic 

      Gonadotropin Increases the Number of Ovulated Oocytes in C57BL/6 Female Mice. PLOS ONE on May 29, 2015.


参考URL:http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0128330

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
KYD-010-EX CARD HyperOva ® 
促小鼠排卵试剂
1 mL
KYD-010-EX-X5 CARD HyperOva ® 
促小鼠排卵试剂
5×1 mL

冷藏运输试剂盒 Card Cold Transport Kit

冷藏运输试剂盒
Card Cold Transport Kit

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

冷藏运输试剂盒 冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit

安全运输小鼠附睾尾和胚胎的装置

窗体底端

 

◆背景简介

       CARD 冷藏运输试剂盒是为了能经济安全地低温运输小鼠的附睾尾而专门研发的产品。使用 CARD 冷冻运输试剂盒能降低活鼠运输成本,同时降低小鼠在输送中死亡和逃跑的风险,使用者也能防止病菌传播。

 

◆优点特色

● CARD 冷藏运输试剂盒通过3重防护 (冰袋,保温瓶,泡沫运输箱)来确保内置物品的温度。

● CARD 冷藏运输试剂盒的设计能刚好容纳制冷剂・保温瓶・外箱及输送的样品,不留多余空隙,防止输过程中摇晃,保障运输的安全性。

 

制剂盒的组成

泡沫运输箱

1个

冰袋

4大包,2小包

保温瓶

1个

纸盒

1个

减震材料

1个

冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit

CARD 冷藏运输试剂盒安全运送附睾尾和胚胎。

◆案例应用

 

冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit

         

 

用法1:不需要雄性活鼠,只需要雄性小鼠的附睾尾就能轻易地繁殖幼鼠。用我们的冷藏运输试剂盒运送小鼠的附睾尾,安全又经济。在 FERTIUP®小鼠精子预孵培养基里预孵从附睾尾中取出的精子,然后把预孵后的精子加入到 CARD MEDIUM®里进行体外受精,最后移植所得的胚胎至代育小鼠体内。


冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit

用法2:通过使用 CARD 冷藏运输试剂盒运送小鼠胚胎。低温运送胚胎而不是活鼠,胚胎将会移植到代育小鼠的体内,就能简单地繁殖幼鼠。

我们推荐“CARD 冷藏运输试剂盒"用于冻存运输附睾尾。(Cat#. KYD-007-EX)" .

 

<小鼠生殖工程技术指南> 

冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit冻存小鼠精子
(使用FERTIUP®Cryoprotectant冻存液、
mHTF培养基、精子吸管、吸管接头和冷冻罐)
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit使用复苏精子进行体外受精
(使用FERTIUP® Preincubation medium预孵培养基、CARD MEDIUM®体外受精培养基、mHTF 培养基和吸管接头)
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit
低温采集运输附睾尾

(使用Cold Transport Kit冷藏运输试剂盒)
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit使用低温运输的附睾尾精子进行体外受精
(使用FERTIUP®Preincubation medium预孵培养基: PM 和mHTF培养基)
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit低温运输2-细胞期胚胎
(使用Cold Transport Kit冷藏运输试剂盒M2 和 KSOM)
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit
体外受精
(使用FERTIUP® Preincubation medium预孵培养基、CARD MEDIUM® 体外受精培养基和mHTF培养基)
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit
简易的玻璃化冷冻保存小鼠胚胎
(使用DAP213 和 DMSO)
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit胚胎移植入输卵管
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit用以前保存的冻存精子进行体外受精
(使用FERTIUP®Preincubation medium预孵培养基: PM, CARD MEDIUM® 体外受精培养基和mHTF培养基)
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit复苏玻璃化冷冻后的胚胎的步骤
(使用0.25M 蔗糖and KSOM)
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit
在氮气安瓿瓶里存储试剂和相关处理方法

冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit玻璃化冷冻小鼠卵母细胞

(使用mHTF培养基)
冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit
试剂的组成

1M DMSO, DAP213, 0.25M蔗糖, mHTF培养基和 KSOM

相关资料

冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 系列

冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit 冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit 冷藏运输试剂盒                              Card Cold Transport Kit
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使用方法

                                             

请按照以下指南,低温运输附睾尾及胚胎。

请利用快递(冷藏)运输样品。

另外推荐用温度数据记录器(KM实验室研发的超小型温度记录仪)来调节温度;

 


在线指南


用冷藏运输的小鼠附睾尾进行体外受精方法

用冷藏运输试剂盒运输附睾尾

用冷藏运输的附睾尾进行体外受精

(使用FERTIUP®(小鼠精子预孵育培养液)CARD MEDIUM®

 

小鼠2细胞期胚胎的冷藏运输

2细胞期胚胎的冻存・输送

复苏冷藏运输的2细胞期胚胎


【参考文献】


[1]

Takeo T., Kaneko T., Haruguchi Y., Fukumoto K., Machida H., Koga M., Nakagawa Y., Takeshita Y., Matsuguma T., Tsuchiyama S., Shimizu N., Hasegawa T., Goto M., Miyachi H., Anzai M., Nakatsukasa E., Nomaru K., and Nakagata N. 2009. Birth of mice from vitrified/warmed 2-cell embryos transported at a cold temperature. Cryobiology. 58(2): 196-202


[2]

Takeo T., Kondo T., Haruguchi Y., Fukumoto K., Nakagawa Y., Takeshita Y., Nakamuta Y., Tsuchiyama S., Shimizu N., Hasegawa T., Goto M., Miyachi H., Anzai M., Fujikawa R., Nomaru K., Kaneko T., Itagaki Y., and Nakagata N. 2010. Short-term storage and transport at cold temperatures of 2-cell mouse embryos produced by cryopreserved sperm. J Am Assoc Lab Anim Sci. 49(4): 415-419.


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
KYD-006-EX CARD Cold Transport Kit
CARD冷藏运输试剂盒
1SET
KYD-007-EX Cold storage solution for cauda epididymides
附睾尾冷存储液
1SET

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件 FERTIUP® &CARD MEDIUM® Peripheral Products

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件
FERTIUP® &CARD MEDIUM® Peripheral Products

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

FERTIUP® 和 CARD MEDIUM®  配件FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

FERTIUP® & CARD MEDIUM® Peripheral Products

 


以下为冻存小鼠精子的全过程需要各种的实验工具。这些工具你可以选择亲自制作,也可以选择购买成品。

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

 

 

精子吸管 Sperm Straws,10 套,每套 10 只

用于存放精子                                         

容量:0.25 mL

尺寸:10吸管×10套(EOG处理)

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

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冷冻桶 Freezing Canister


用于冷冻精子。你也可以用以下配件来组装:

>亚克力棒 ( 5 mm × 5 mm × 50 cm)
>50 mL一次性注射器
>30 mm厚泡沫塑料块
把注射器固定在亚克力棒上,加热密封该注射器的尖端。
你也可以选择购买成品:
尺寸:亚克力棒 ( 5 mm×5 mm×50 cm)
注射器容量:50 mL (加热密封)

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

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吸管接头 Straw Connector (包括5个部分)

构成部分:

硅胶帽,塑料管,硅胶管,

三路活塞和 1 mL 注射器

※不包括吸管接头

精子吸管 Sperm Straws(目录号 KYD-S020X10)

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

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三角冻存筒(短)Triangular Cassette Short (10 套)

尺寸:17×17×17×140 mm

在液氮易于操作旋钮部分:8 mm

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

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三角冻存筒(长)Triangular Cassette Long (10 套)

 

尺寸:17×17×17×270 mm

在液氮易于操作旋钮部分:8 mm

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

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胚胎操作套装 Embryo Manipulation Instrument Set

 

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products


套装的构成

微管(含20支,长8-10 cm)

玻璃吸管(为防污染已含棉塞)

硅胶管(60 cm)

接口管

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玻璃微管 Glass capillary 20PC

 

构成部分:微管(含20支,长 8-10 cm)

 FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products   FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

 

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触控燃烧器 Touch Burner APT-3

 

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

小巧的 APT 触控燃烧器不需要天然气管,按开关按钮就能燃烧。可以随意调节火焰,以便完成各种实验。

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安瓿瓶开瓶器 Ampoule Opener

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products


  为了防止玻璃碎片伤害医护人员。
  安瓿瓶开瓶器采用特殊工程塑料,它可应用于多种尺寸安瓿瓶。不仅携带方便,而且容易清洗和消毒。用75%酒精擦拭开瓶器后,浸泡在2%戊二醛(CIDEX)里3-10 小时,或高压灭菌(270°F 或 132℃/32 PSIG/4分钟)。

相关资料


FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 系列


FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 配件                              FERTIUP®  &CARD MEDIUM®  Peripheral Products
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产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
KYD-S020X10 Sperm Straws (10 Pieces x 10 Units) 
精子吸管(10支x10包)
10PC
KYD-S018 Freezing Canister
 冷冻筒
1UNIT
KYD-S025 Straw Connector 
吸管接头
1PC
KYD-S021 Triangular Cassette Short (10units) 
三角冻存筒(短)(10套)
10UNIT
KYD-S035 Triangular Cassette Long (10units) 
三角冻存筒(长)(10套)
10UNIT
KYD-S036 Embryo manipulation instrument set 
胚胎操作仪器套装
1SET
KYD-S037 Glass capillary 20PC 
玻璃微管20PC
1SET
PHD-APT3-EX Touch Burner APT-3 
触控燃烧器APT-3
10UNIT
NEW-OP1301-01 Ampoule Opener 
安瓿瓶开瓶器
1PC

小鼠精子冻存液和体外受精培养基 FERTIUP ® &CARD MEDIUM ®

小鼠精子冻存液和体外受精培养基
FERTIUP ® &CARD MEDIUM ®

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

小鼠精子冻存液和体外受精培养基小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

FERTIUP® 和 CARD MEDIUM®

该试剂可以保证和促进实验小鼠精子的冷冻保存效果,并能提高体外受精率。

FERTIUP® 小鼠精子冻存液
FERTIUP® 小鼠精子预孵培养基
CARD MEDIUM® 小鼠体外受精用培养

FERTIUP® PM -CARD MEDIUM® 套装

     


◆原理

 

       FERTIUP®(小鼠精子冻存液、小鼠精子预孵培养基)和 CARD MEDIUM®(高性能体外受精用培养基)是冻存小鼠精子、预孵培养、体外受精的高性能试剂。可以通过试剂冷冻保存精子,建立高效经济的小鼠系统(转基因小鼠等)。大大提高了传统 C57BL/6与129 品系小鼠“冻存-精子”的复苏和新鲜精子的体外受精率。

       使用了 FERTIUP® 和 CARD MEDIUM® 小鼠精子冻存・体外受精系统能够保证宝贵小鼠资源的安全性及可靠性。研究人员发现使用液氮低温保存小鼠品系的精子,成本约是单克隆保存的三十分之一。


小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

(图片是用 FERTIUP® 和 CARD MEDIUM® 的冻存精子进行体外受精而产出的小鼠)

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

FERTIUP® 和 CARD MEDIUM® 

系列

产品介绍

FERTIUP® 和 CARD MEDIUM® 是什么?

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®


FERTIUP® 和 CARD MEDIUM® 是能保证和促进实验小鼠精子的冷冻保存效果,并能提高体外受精率的试剂。产品系列如下:
1. FERTIUP® Mouse Sperm Cryoprotectant 小鼠精子冻存液 (KYD-001-EX)
该试剂用来冻存精子。

2. FERTIUP® Mouse Sperm Preincubation Medium 小鼠精子预孵培养 (KYD-002-EX)
→该试剂用于在体外受精前,预孵复苏后的精子。

3.CARD MEDIUM® Mouse Fertilization Medium 小鼠体外受精培养(KYD-003-EX)
该培养基用于体外受精

单独使用 FERTIUP 能得到较高的体外受精率,但如果配用上 CARD MEDIUM 就能达到更高的受精率,取得进一步成功。

◆优点・特色

FERTIUP®(小鼠精子冻存液)能防止冻存时的精子受到损伤。

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

FERTIUP®(小鼠精子预孵培养基)是能显著提高精子的受精能力。

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

CARD MEDIUM® 作用于卵子的透明带,使其更容易受精。

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®


●   受精率高达80%以上

●   有效维系转基因小鼠(Tg/KO)

●   降低人工、设备和养殖成本

●   缩短小鼠繁殖时间

●   高效繁殖了以往难以繁殖的品系

 

◆案例・应用

【案例1】用 FERTIUP® 和 CARD MEDIUM® 冷冻复苏精子的体外受精率

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®


【案例2】 不同品系小鼠的新鲜和冻存精子,使用了 FERTIUP® 预孵培养和 CARD MEDIUM® 后的体外受精率比较


小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

【使用流程】

       使用 FERTIUP®(小鼠精子冻存液),用冻存的精子代替新鲜的精子,能够保存小鼠的系统。此方法能大幅度减少饲养小鼠的成本及空间。复苏冻存的精子,使用 FERTIUP® (小鼠精子预孵培养基)和 CARD MEDIUM® ,进行高效受精,移植胚胎至代育雌鼠体内,才能繁衍后代。

 

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

 

       即使自然交配程序困难,但只要在 FERTIUP® (小鼠精子预孵培养基)中预孵从雄性小鼠取出新鲜的精子,接着和使用了 CARD MEDIUM® 的卵子进行体外受精,移植胚胎,就能在短期内繁殖小鼠。

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

 

       取替雄性小鼠,用冷藏运输试剂盒运输小鼠的附睾尾,即经济又安全。然后把从尾部取下的精子放在 FERTIUP®(小鼠精子预孵培养基)里预孵,接着和使用了 CARD MEDIUM®的卵子进行体外受精,移植胚胎,就能简便地预孵小鼠。

 

 

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®


 


       即使在低受精率的 129 和 BALB/c 系統中,ba取出的精子放在 FERTIUP®(小鼠精子预孵培养基)里预孵,与在 CARD MEDIUM® 的卵子进行体外受精,就能得到高受精率。


小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

   具体操作见“相关资料”。

 

 


【相关资料】


小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 系列

操作手册

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ® 小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ® 小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®CARD MEDIUM®.pdf

 注意:CARD MEDIUM®在体外受精时根据所用的精子的不同,调试方法液不一样。请详细阅读相关说明及正确使用试剂。

 


其他操作方法:


采用新鲜精子的体外受精方法

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®小鼠的体外受精方法(使用FERTIUP®孵育培养基和CARD MEDIUM®


使用冷冻运输的附睾尾的体外受精方法

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®使用冷藏运输试剂盒进行附睾尾的低温运输

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®取出冷藏运输后的附睾尾进行体外受精(使用FERTIUP®孵育培养基和CARD MEDIUM®

 

小鼠精子的冻存、融解、解冻精子的体外受精方法

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®冻存小鼠精子(使用FERTIUP®冻存液)

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®解冻已冻存的精子后进行体外受精(使用FERTIUP®孵育培养基和CARD MEDIUM®

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®用CARD以外的方法来冻结的精子进行体外受精(使用FERTIUP®孵育培养基和CARD MEDIUM®

产品选择

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®


小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®冻存小鼠精子
(使用FERTIUP®Cryoprotectant冻存液、
mHTF培养基、精子吸管、吸管接头和冷冻罐)
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®使用复苏精子进行体外受精
(使用FERTIUP® Preincubation medium预孵培养基、CARD MEDIUM®体外受精培养基、mHTF 培养基和吸管接头)
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®
低温采集运输附睾尾

(使用Cold Transport Kit冷藏运输试剂盒)
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®使用低温运输的附睾尾精子进行体外受精
(使用FERTIUP®Preincubation medium预孵培养基: PM 和mHTF培养基)
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®低温运输2-细胞期胚胎
(使用Cold Transport Kit冷藏运输试剂盒M2 和 KSOM)
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®
体外受精
(使用FERTIUP® Preincubation medium预孵培养基、CARD MEDIUM® 体外受精培养基和
mHTF培养基)
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®
简易的玻璃化冷冻保存小鼠胚胎
(使用DAP213 和 DMSO)
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®胚胎移植入输卵管
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®用以前保存的冻存精子进行体外受精
(使用FERTIUP®Preincubation medium预孵培养基: PM, CARD MEDIUM® 体外受精培养基和mHTF培养基)
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®复苏玻璃化冷冻后的胚胎的步骤
(使用0.25M 蔗糖and KSOM)
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®
在氮气安瓿瓶里存储试剂和相关处理方法

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®玻璃化冷冻小鼠卵母细胞

(使mHTF培养基)
小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®
试剂的组成

1M DMSO, DAP213, 0.25M蔗糖, mHTF养基和 KSOM



产品系列


FERTIUP®

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

我们提供了各种尺寸方便你使用  (0.5ml, 1ml, 5*0.5ml, 5*1ml)。

请注意,一旦开封了安瓿瓶,建议尽快一次性使用完,不要留到下次使用。


小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

CARD MEDIUM®

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

[试剂盒的组成]
一个装有培养基的安瓿瓶(A):3 mL
一个装有粉末的小瓶(B):30 mg
一个1.5ml的塑料管(C)
一个1.5ml的塑料管(D)
一个2.5毫升的一次性注射器
一根针
一套过滤器(孔径:0.22μm)

套装产品(FERTIUP® + CARD MEDIUM®) 小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®

FERTIUP(R)   PM 1ML-CARD MEDIUM(R) 套装(KYD-004-EX)

[试剂盒的组成]
  一个装有培养基的安瓿瓶(A):3 mL
  一个装有粉末的小瓶r (B):30 mg
  一个1.5ml的塑料管(C)
  一个1.5ml的塑料管(D)
  一个2.5毫升的一次性注射器
  一根针
  一套过滤器(孔径:0.22μ)

一个装有PM的安瓿瓶 (1.0ml) 

FERTIUP(R)   PM 0.5ML-CARD MEDIUM(R) 套装(KYD-005-EX)

[试剂盒的组成]
  一个装有培养基的安瓿瓶(A):3 mL
  一个装有粉末的小瓶r (B):30 mg
  一个1.5ml的塑料管(C)
  一个1.5ml的塑料管(D)
  一个2.5毫升的一次性注射器
  一根针
  一套过滤器(孔径:0.22μ)
 
一个装有PM的安瓿瓶(0.5ml) 

小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ® 小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ® 小鼠精子冻存液和体外受精培养基                              FERTIUP ®  &CARD MEDIUM ®
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○常规问题

Q1:    请告知 FERTIUP®小鼠精子冻存液、小鼠精子孵育培养基以及 CARD MEDIUM® 的保存方法以和保质期。
A1:    1. 请在 2~10℃ 冷藏 FERTIUP®小鼠精子孵育培养基和 CARD MEDIUM®
            2. 请在 18~28℃ 室温,保存 FERTIUP®小鼠精子冻存液 。
            3. 关于保质期,请查看与产品附带的说明书或者安瓿瓶上的注释。

Q2:    产品开封后能否少量分装冻存?
A2:    不可以。因为无法保证冻存后的质量,所以不建议此做法;

Q3:    产品里面含有对人体有害的物质吗?
A3:    不,里面不含有对人体有害的物质。

Q4:    要怎样购买 FERTIUP®和 CARD MEDIUM® 试剂呢?
A4:    如需购买,请与我司联系。

Q5:    产品的货期需要多久?
A5:    我司产品均为日本原装进口,货期3~4周。

Q6:    如果产品中混有杂质,可以更换吗?
A6:    我司从生产到出货都实行严谨的品质管理体制,但如果在产品中混入类似玻璃片等杂物这情况,请立即拍照并与我们联系,会有专人为您

            解决。


Q7:    发现未开封的小鼠精子冻存液中出现结晶的现象。
A7:    极少数情况下,受低温影响会产生结晶。只要在使用前1小时,把小鼠精子冻存液放进 37℃ 的孵育器中保温,
搅拌后结晶就会融解。融

            解后冻存液的效力不会产生任何问题。

○关于FERTIUP®系列产品的疑问

Q1:    采用FERTIUP®小鼠精子冻存液/小鼠精子孵育培养基冷冻而成的精子进行体外受精的C57BL/6小鼠虽然得到了较高体外受精率,但是否也

            能提高其他系统小鼠的体外受精率呢?

A1:    经验证,几乎都能提高 C57BL/6 小鼠之外的系统的体外受精率。

Q2:    FERTIUP®小鼠精子冻存液不会一次性用完,如果用试管分装保存,冷藏数周后还可以使用吗?
A2:    不可以。建议尽快使用完开封后的冻存液。请尽量购买可以一次性使用完的规格。

Q3:    FERTIUP®小鼠精子冻存液在保质期间呈乳白色,请问能够使用呢?
A3:    可以使用。之所以呈乳白色是因为保存液成分中的脱脂牛奶里的酪蛋白胶团沉淀。酪蛋白胶团对冻存精子没帮助,生产过程中我们已尽

            量去除,但长期保存是还是有可能出现酪蛋白胶团沉淀。

            轻拍安瓿瓶混合溶液时,冻存液可能呈乳白的,但是不会影响体外受精率。

Q4:    FERTIUP®系列产品的使用方法中,用流动液体石蜡会不会造成不良影响。
A4:    不会。因为一般的精子悬浊液(保存液中悬浊的精子)不会与流动石蜡混合,所以不会造成不良影响。

Q5:    冻存精子在FERTIUP®小鼠精子孵育培养基里培养后,在体外受精培养基上进行体外受精时,精子浓度是多少?

A5:    通常冻存液的精子浓度是 100,000~200,000 精子/μL,在小鼠培养基(90μL)里加入冻融后的精子悬浊液(10μL),被稀释了 10 倍后,

            精子孵育培养基中的精子浓度变成10,000~20,000精子/μL。

            然后,加入孵育精子悬浊液(10μL),又被稀释了 10 倍,体外受精培养基中精子的浓度是 1,000~2,000 精子/μL。

            最后冻融后的运动精子比例大约是 20%,体外受精培养基中运动精子的浓度是 200~400 精子/μL。

Q6:    我想下载 FERTIUP®系列产品说明,要去哪里下载呢?
A6:    请在官网查找,或者联系我们。

Q7:    请告知能确认精子冻结融解的方法。
A7:    1. 比较简单地确认冻融后精子的质量的方法是,冻结后在孵育培养基培养,以滴液周边活跃的精子数来作判断。

            2. 采取精子的方法是先确认未受精卵进行体外受精时,受精率是否最低达到 30%。
             (现销售的产品,在确保质量时,进行体外受精,已确认了 C57BL/6 小鼠的体外受精率达到 30% 以上。)

Q8:    请问有没有传统方法和在国外冻结精子的溶解方法?
A8:    请参考熊本大学的网上指南,里面提供了除 CARED 以外用冻结精子进行体外受精的方法。


○关于CARD MEDIUM®的疑问

Q1:    CARD MEDIUM®生产后能保质几个月呢?
A1:    目前为“生产后18个月”,今后若技术进步有可能进一步延长保质期。

Q2:    如果不与FERTIUP®系列一起使用的话,就不能得到较高的受精率吗?
A2:    是的。FERTIUP®对精子起作用,CARD MEDIUM®对卵子起作用,从而提高受精率。因此,如果两者同时使用,C57BL/6 小鼠就得到

            高达 80% 的受精率。


Q3:    除 C57BL/6 小鼠以外的系统也能得到很高的体外受精率吗?
A3:    可以。其他系统也能得到较高的体外受精率。

【参考文献】


[1] 

Takeo, T., Hoshii, T., Kondo, Y., Toyodome, H., Arima, H., Yamamura, KI., Irie, T. and Nakagata, N. Methyl-beta-cyclodextrin improves the fertilizing ability of C57BL/6 mouse sperm after freezing and thawing by facilitating cholesterol efflux from the cells. Biol Reprod. 78(3):546-51. 2008.

[2] 

Takeo, T and Nakagata, N. Combination medium of cryoprotective agents containing L-glutamine and methyl-{beta}-cyclodextrin in a preincubation medium yields a high fertilization rate for cryopreserved C57BL/6J mouse sperm. Lab Anim. 44(2):132-7. 2010


[3] 

Nakagata N. 2011. Cryopreservation of mouse spermatozoa and in vitro fertilization. Methods Mol Biol. 693: 57-734

[4] 

Cryopreservation of mouse spermatozoa and in vitro fertilization.Nakagata N.Methods Mol Biol. 2011 693:57-73. PMID: 21080274,<链接>

[5] 

Combination medium of cryoprotective agents containing L-glutamine and methyl-{beta}-cyclodextrin in a preincubation medium yields a high fertilization rate for cryopreserved C57BL/6J mouse sperm.Takeo T,Nakagata N.Lab Anim. 2010 Apr;44(2):132-7. PMID: 20357317<链接>

[6] 

Short-term storage and transport at cold temperatures of 2-cell mouse embryos produced by cryopreserved sperm.Takeo T, Kondo T, Haruguchi Y, Fukumoto K,Nakagawa Y, Takeshita Y, Nakamuta Y, Tsuchiyama S, Shimizu N, Hasegawa T, Goto M, Miyachi H, Anzai M, Fujikawa R, Nomaru K, Kaneko T, Itagaki Y,Nakagata N.J Am Assoc Lab Anim Sci. 2010 Jul;49(4):415-9. PMID: 20819385<链接>

[7] 

Birth of mice from vitrified/warmed 2-cell embryos transported at a cold temperature.Takeo T, Kaneko T, Haruguchi Y, Fukumoto K, Machida H, Koga M, Nakagawa Y, Takeshita Y, Matsuguma T, Tsuchiyama S, Shimizu N, Hasegawa T, Goto M, Miyachi H, Anzai M, Nakatsukasa E, Nomaru K, Nakagata N.Cryobiology. 2009 Apr;58(2):196-202. PMID: 19168045<链接>

[8] 

Methyl-beta-cyclodextrin improves fertilizing ability of C57BL/6 mouse sperm after freezing and thawing by facilitating cholesterol efflux from the cells.Takeo T, Hoshii T, Kondo Y, Toyodome H, Arima H, Yamamura K, Irie T, Nakagata N.Biol Reprod. 2008 Mar;78(3): 546-51. PMID: 18046011<链接>

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
KYD-001-EX FERTIUP((R)) Mouse Sperm Cryoprotectant: CPA
小鼠精子冻存液
1 ml
KYD-001-EX-X5 FERTIUP((R)) Mouse Sperm Cryoprotectant: CPAx5
小鼠精子冻存液
5*1 ml
KYD-001-05-EX FERTIUP((R)) Mouse Sperm Cryoprotectant: CPA
小鼠精子冻存液
0.5 ml
KYD-001-05-EX-X5 FERTIUP((R)) Mouse Sperm Cryoprotectant: CPAx5
小鼠精子冻存液
5*0.5 ml
KYD-002-EX FERTIUP((R)) Mouse Sperm Preincubation Medium: PM
小鼠精子预孵培养液
1 ml
KYD-002-EX-X5 FERTIUP((R)) Mouse Sperm Preincubation Medium: PM
小鼠精子预孵培养液
5*1 ml
KYD-002-05-EX-X5 FERTIUP((R)) Mouse Sperm Preincubation Medium: PM
小鼠精子预孵培养液
5*0.5 ml
KYD-003-EX CARD MEDIUM((R))
小鼠精子体外受精稳定剂
1 kit
KYD-004-EX FERTIUP((R)) PM 1ML-CARD MEDIUM((R)) set
小鼠精子预孵培养液 &受精液 套装
1 set
KYD-005-EX FERTIUP((R)) PM 0.5ML-CARD MEDIUM((R)) set
小鼠精子预孵培养液 &受精液 套装
1 set

非指示性FTA微卡_1个样品区 总体积125 μl 250/PK


whatman非指示性FTA微卡

  FTA Micro Card, 1 sample area per card

  • Improves process efficiency by enabling direct amplification for STR analysis.
  • Ideal for colored samples, like blood.
  • Immediate stabilization and protection of nucleic acids due to FTA technology.
  • Different card options to support manual or automated processing for fast and efficient sampling.
  • Long term archiving of samples at room temperature due to FTA card technology.

FTA Cards

Whatman FTA technology consists of two distinct chemistries, both of which have the ability to lyse cells on contact, denature proteins, and protect DNA from degradation. FTA chemistry contains chemical denaturants and a free radical scavenger. With FTA, the DNA remains tightly bound while proteins and inhibitors are washed from the matrix. There are three options for DNA analysis with FTA cards: direct amplification, standard amplification with rinsing (“punch-in” method), and extraction of DNA from the card.

FTA cards are available as non-indicating cards for use with colored samples, such as blood.

非指示性FTA迷你卡_2个样品区 总体积250 μl 250PK


whatman 非指示性FTA迷你卡

FTA Mini Card, 2 sample areas per card

  • Improves process efficiency by enabling direct amplification for STR analysis.
  • Ideal for colored samples, like blood.
  • Immediate stabilization and protection of nucleic acids due to FTA technology.
  • Different card options to support manual or automated processing for fast and efficient sampling.
  • Long term archiving of samples at room temperature due to FTA card technology.

FTA Cards

Whatman FTA technology consists of two distinct chemistries, both of which have the ability to lyse cells on contact, denature proteins, and protect DNA from degradation. FTA chemistry contains chemical denaturants and a free radical scavenger. With FTA, the DNA remains tightly bound while proteins and inhibitors are washed from the matrix. There are three options for DNA analysis with FTA cards: direct amplification, standard amplification with rinsing (“punch-in” method), and extraction of DNA from the card.

FTA cards are available as non-indicating cards for use with colored samples, such as blood.