可清洗去除的细胞染色探针
CytoSeeing<Reversible Cytoplasm Blue>
CytoSeeing是一种新型细胞染色试剂,只需添加到培养基即可迅速对细胞质进行染色。荧光观察细胞质后,只需更换不含CytoSeeing的培养基,便可轻松去除细胞内的荧光染色。
※本产品基于北海道大学研究生院理学研究科的研究成果商品化而成。
※本产品仅供研究,研究以外不可使用。
◆关于CytoSeeing
已知细胞核与细胞质的形态变化与细胞分化、功能、信号反应相关。传统的细胞质染色探针,主要作为细胞示踪剂使用,一旦摄入细胞,即使去除培养基中的试剂也会残留在细胞内。随后,细胞内的染色试剂随着细胞分裂的过程逐渐褪色,通常在3~6代左右便会消失。但是如果染色试剂残留在细胞内的话,实时成像观察细胞质与细胞核的形态后,难以立即使用其他探针进行成像。
不同于传统试剂,CytoSeeing是一种仅对细胞质进行染色且可清洗的细胞染色试剂。
参考文献:
Kamada, et al., PLOS ONE, 11:e0160625(2016).
◆特点
● 只需添加到培养基即可对细胞质进行染色。
● 染细胞质,但不会进入细胞核内。可以通过细胞核的边界对其进行形态学上的观察。例如,适用于活细胞中血细胞的细胞核形态观察。
● 可使用DAPI滤光片进行检测,且能够与GFR和RFP等绿色或红色荧光物质同时使用。
● CytoSeeing的可视化不会影响细胞功能。
● 通过培养基或PBS清洗摄入细胞的CytoSeeing,可从细胞中去除CytoSeeing。
● 去除CytoSeeing后,可直接用于其他检测。
● 可用于贴壁细胞与悬浮细胞。
与现有的细胞质染色试剂比较
染色试剂
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细胞质染色
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判别细胞核形态
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导入细胞内所需时间
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Wash-out
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CytoSeeing
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○
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○
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3~9 min
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○
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T公司试剂
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○
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×
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15 min~1 h
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×
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A公司试剂
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○
|
×
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15 min~1 h
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×
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◆产品概述
● 分子式:C17H12N3
● 分子量:258.11
● 纯度:≧97%
● 激发/荧光波长(Ex/Em)*1:345 nm/456 nm
● 可溶性:DMSO*2
*1 可通过DAPI滤光片进行观察。
*2 建议使用10 mM作为母液。
◆操作方法概要
1. 取适量细胞进行培养;
2. 添加CytoSeeing溶液至培养基中使终浓度为10 μM~50 μΜ;
3. 在适合细胞的温度下孵育几分钟;
4. 使用荧光显微镜进行观察;
5. 去除CytoSeeing时,添加不含CytoSeeing的新鲜培养基清洗。
◆应用实例
使用CytoSeeing对CHO细胞进行染色
使用CytoSeeing(10 μM)对CHO细胞进行染色30 min。整个细胞质(cytoplasm)被染色,可以通过观察边界来观察细胞核的形态。
在A549细胞中CytoSeeing的时间依赖性摄取和分布
a)添加CytoSeeing(10 μM)至细胞中,并孵育。仅需9 min,CytoSeeing已被充分摄入到细胞内。
b)使用CytoSeeing(10 μM)染色细胞后,更换到不含CytoSeeing的培养基中孵育。仅需30 min CytoSeeing便脱离细胞。
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。