活细胞成像荧光染料Ageladine A
一种新颖的活细胞成像荧光染料，具有细胞渗透性、无毒及pH依赖性等特点。
◆产品特性
● pH 范围广( pH 4-8 )，该荧光染料在紫外光激发下发出蓝绿色荧光，在酸性环境中荧光信号更强，碱性溶液中较难被检测；
● 无毒的高细胞渗透性染料，无酯类或酯酶，聚集于胞内酸性细胞器，与膜内侧有疏水作用；
● 几乎不会降解，表现出长期稳定性；
● 可以对酸性细胞器、囊泡、细胞、组织和小动物进行连续几天的无毒pH 监测。
Ageladine A（合成染料）
AG-CMA-1001-C200 200 μg
分子式：C12H8Br2F3N5O2 . C2HF3O2
分子量：357.0 . 114.0
CAS 号：643020-13-7
纯度：≥ 98%
激发光波长范围：325 – 415 nm
最佳波长：370 nm
发射光波长范围：415 – 500 nm 以上
最佳波长：415 nm
◆案例•应用
通过荧光显微镜观测酸性细胞器（比如溶酶体、内涵体）和小型动物（比如扁形动物、刺细胞动物、不同动物的幼虫和卵）•筛选• 活力检测• 流式细胞术• 荧光寿命成像（FLIM）技术。Licensed from Alfred Wegener Institute (EP2156193A1;US8198098B2).
成像参数
■ 孵育时间：
培养细胞：10-30 分钟；小型动物( 比如幼虫和扁形动物)：30-120 分钟；培养基中的血清和盐离子浓度对孵育时间没有任何影响，只需所有缓冲液的pH 达到7.5 即可。
■ 光谱性质：
激发光波长范围：325 – 415 nm；最佳波长：370 nm
发射光波长范围：415 – 500 nm 以上；最佳波长：415 nm
实验采用一般的滤光装置即可（比如FURA-2）。在pH 4-8 范围内，荧光强度与pH 呈线性负相关。可以通过比例量测法或荧光寿命成像技术得到定量实验结果。 会发生光漂白（Photobleaching），但是在常规实验低激发强度和曝光时间（即使好几天）的条件下对实验没什么影响。孵育好几天也不会发生泄露。使用浓度达到30 μM 时没有毒性效应。PC12 细胞的膜片钳实验结果表明，当浓度大于10 μM 时膜电位会发生轻微的改变。
■ 推荐使用浓度：
介于1 μM ( 细胞) – 30 μM ( 小型动物) 之间。
成像举例
PC12- 细胞用Ageladine A 染色的细胞成像图。
Aiptasia sp. 不同部位的刺细胞Ageladine A 染色图：左图：枪丝部位；右图：触须部分。用共焦激光扫描显微镜进行观察，红色区域显示荧光（伪色彩）。
◆抗血管新生试剂
Ageladine A 是一种独特的溴吡咯- 咪唑类生物碱，能够发出荧光。最初从海绵Agelas nakamurai 中分离得到。它表现出良好的体内外抗肿瘤血管活性，最初被认为与基质金属蛋白酶多种亚型的抑制有关，随后被证实其抗肿瘤血管活性是对激酶的选择性抑制造成的，包括酪氨酸- 磷酸化- 调节激酶(DYRK)1A、DYRK2、酪氨酸激酶2(TYK2) 和酵母Sps1/Ste20 相关激酶4(YSK4) 的双重特异性。它是一种高选择性的血管生成抑制剂，对一系列人肿瘤细胞系无毒性。
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
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AG-CMA-1001-C200 |
Ageladine A . TFA 海洋生物碱. 三氟乙酸 |
200 ug |
参考文献
[1] Ageladine A: An antigiogenetic matrix metalloproteinase inhibitor from themarine sponge Agelas nakamurai: M. Fujita, et al.; JACS 125, 1570 (2003)
[2] A one-pot synthesis and biological activity of ageladine A and analogues: S.R.Shengule, et al.; Med. Chem. 54, 2492 (2011)
[3] Marine-derived angiogenesis inhibitors for cancer therapy: Y.Q. Wang & Z.H. Miao; Mar. Drugs 11, 903 (2013)
[4] Ageladine A, a pyrrole-imidazole alkaloid from marinesponges, is a pH sensitive membrane permeable dye: U.Bickmeyer, et al.; BBRC 373, 419 (2008)
[5] Tracking of fast moving neuronal vesicles with ageladine A: U.Bickmeyer, et al.; BBRC 402, 489 (2010)
[6] The alkaloid Ageladine A, originally isolated from marinesponges, used for pH-sensitive imaging of transparent marineanimals: U. Bickmeyer; Mar. Drugs 10, 223 (2012)
[7] Incorporated nematocysts in Aeolidiella stephanieae(Gastropoda, Opisthobranchia, Aeolidoidea) mature byacidification shown by the pH sensitive fluorescing alkaloid Ageladine A: D. Obermann, et al.; Toxicon 60, 1108 (2012)