生物制药重组蛋白酶系列


生物制药重组蛋白酶系列

生物制药重组蛋白酶系列

生物制药重组蛋白酶系列

◆重组赖氨酰肽链内切酶(RLys-C)

赖氨酸内肽酶最早从土壤细菌无色杆菌Achromobacter lyticus中分离得到,能够特异性识别与切割肽链中Lys羧基端肽键,常被用于蛋白测序及Lys-X化合物的酶催化合成。

本品系Achromobacter lyticus来源的,克服大肠杆菌重组表达技术难题进行制备。本品最适pH 9.0~9.5,等电点为pH 6.9~7.0;最适反应温度30~37℃,50℃以上稳定性下降。在适宜温度下,该酶稳定性良好,在4 mol/L 尿素或0.2%SDS溶液中30℃孵育6 hr后,生物活性未发生降低。可广泛用于蛋白组学分析,或蛋白、抗体类药物质量检测,多肽、蛋白类产品制备工艺中。


产品编号

产品名称

活性单位

包装

RLYS-C0401

rLys-C
重组赖氨酰肽链内切酶

3.0 AU/mg

20 μg

RLYS-C0403

1 mg

◆重组双碱性内肽酶(RKex2)

Kex-2(E.C.3.4.21.61)属于枯草杆菌蛋白酶家族,为酵母自身编码的一种前体加工酶,

Ca2+ 依赖型丝氨酸蛋白酶,能够专一性地识别和切割Lys-Arg,Arg-Arg,Pro-Arg等双碱性氨基酸※的羧基端肽键。不同于Trypsin,该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸(Arg或Lys)的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点,便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH为9.0,在偏酸性环境中稳定,稳定pH为5.0-6.0。最适温度为37 ℃,酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂(如PMSF、TPCK等)抑制。


产品编号

产品名称

比活

包装

RKex20202

RKex2
重组双碱性内肽酶

10 U/mg

10 mg

RKex20204

10 μg

重组羧肽酶B(RCPB)

羧肽酶B(E.C 3.4.17.2)属金属羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族,可选择性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪类氨基酸残基的羧肽酶A,羧肽酶B优先切割碱性氨基酸※,同时也能切割一些非碱性氨基酸。重组CPB的活性受到典型的金属螯合剂如EDTA,及Cu2+ ,Hg2+ 抑制;而Zn2+ ,Mn2+ 等金属离子则能够不同程度提高酶活。CPB的最适pH为8.0,偏酸或偏碱均会造成活性下降,pH接近5.0时活性接近零,pH>12.0时活性完全丧失。CPB在一定温度内(<60 ℃)活性随温度升高而上升。


产品编号

产品名称

比活

包装

RCPB0302

RCPB
重组羧肽酶B

150 U/mg

10 mg

RCPB0304

10 μg

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

胰蛋白酶(Trypsin; EC3.4.21.4)是一种丝氨酸蛋白酶,酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由毕赤酵母重组表达并采用层析色谱法纯化获得。氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致,分子量为24 kDa,最适pH为7.0-9.0。可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:重组胰岛素生产;细胞培养、细胞发酵;蛋白质的酶解、测序;各种组织的细胞分离等。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如TLCK、PMSF等的抑制,金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。


产品编号

产品名称

比活

包装

RTP0102

RTrypsin
重组胰蛋白酶

3800 USP/mg

10 mg

RTP0103

1 mg

RTP0104

10 μg

◆相关产品


重组赖氨酰肽链内切酶(RLys-C)

重组双碱性内肽酶(RKex2)

重组羧肽酶B(RCPB)

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

Stemsure® LIF, 小鼠, 重组

Stemsure® LIF, 小鼠, 重组

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

Stemsure® LIF, 小鼠, 重组

分化诱导·分化标记

Stemsure® LIF,小鼠,重组



  Stemsure® 系列使用小鼠 ES 细胞 D3 株进行实验测试(细胞增殖试验和菌落形成试验)和碱性磷酸酶(ALP)染色,是对细胞增殖和未分化能力有质量保证的产品系列。本产品是纯化自大肠杆菌中表达的小鼠 LIF。可用于小鼠 ES 细胞的培养。

 


◆产品概述


● 表达:大肠杆菌(在C端含有 6×His 标签)

● 活性:106 units/mL

● 单位的定义:在使用小鼠 ES 细胞株(D3 株)的细胞增殖促进试验中,当达到最大增殖度的 50% 时,在此增殖度下产品使用量的 1/20 相当于

●                     1 unit

● 使用浓度:培养小鼠 ES 细胞株(D3株),建议使用终浓度为 1,000 units/mL

● 形状:D-PBS,1%BSA

● 0.2 µm 过滤灭菌

● 保存条件:-20℃ 保存。融解后请在 2-10℃ 保存,并尽快使用。


◆试验项目


● 实用试验(小鼠 ES 细胞)

● 支原体检测

● 无菌试验

● ALP 染色(小鼠 ES 细胞)

● 内毒素测试等等

 


细胞形态/未分化标记物在小鼠 ES 细胞 D3 株中的确认

● 集落形态和 ALP 染色 ●

使用本产品培养小鼠 ES 细胞 D3 株,可以观察到小鼠 ES 细胞特有光泽的细胞集落。同时确认了 ALP 染色呈阳性。


Stemsure® LIF, 小鼠, 重组

Stemsure® LIF, 小鼠, 重组

细胞形态确认

ALP 染色

● 未分化标记物表达的确认 ●

使用本产品将小鼠 ES 细胞 D3 株继代培养8代,确认了各种未分化标记物呈阳性。


培养基组成

StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2 mmol/L L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1 mmol/L StemSure® 2ME + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000 units/mL StemSure® LIF

Stemsure® LIF, 小鼠, 重组

◆产品信息


产品编号

产品名称

规格

199-16051

StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution

StemSure® 白细胞抑制因子,小鼠,重组,溶液

106 units

195-16053

106 units×10

 


◆相关产品


产品编号

产品名称

规格

197-16275

StemSure® D-MEM(High Glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate

StemSure® D-MEM(高糖)含酚红和丙酮酸钠

500 mL

198-15781

StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution (×100)

StemSure® 10mmol/L 2-巯基乙醇溶液(×100)

100 mL

195-15791

StemSure® 50mmol/l Monothioglycerol Solution(×100)

StemSure® 50mmol/L 硫代甘油溶液(×100)

100 mL

191-18375

StemSure® Serum Replacement (SSR)

Stemsure® 血清替代品(SSR)

500 mL

073-05391

200mmol/l L-Glutamine Solution (×100)

200mmol/l L-谷氨酰胺溶液(×100)

100 mL

168-23191

Penicillin-Streptomycin Solution (×100)

青霉素 – 链霉素溶液×100

100 mL

 

独特的兔重组抗体,专为提升结果打造!


独特的兔重组抗体,专为提升结果打造!

独特的兔重组抗体,专为提升结果打造!

独特的兔重组抗体,专为提升结果打造!

RevMAb 兔单克隆抗体由特异性抗原B细胞分离得到,无法通过传统的杂交瘤技术获得。经广泛筛选和克隆选择后,RevMAb 抗体可以无动物来源的方式重组表达并进行纯化。

RevMAb 产品是敏感型的一抗,包括一系列对突变、组蛋白修饰、组蛋白突变体、DNA 甲基化、表位标签或PEG显示出特异性的兔单克隆抗体,是始终追求生产高质量的诊断研究工具。此外,我们还可提供独特的一致性高且可靠的山羊二抗。

 


◆突变特异性癌症生物标志物


抗AR(Arv7 var)(人),兔单克隆抗体(RM7)


雄激素受体(AR)是一种调节有丝分裂原激活蛋白激酶(MAP激酶)的磷蛋白,MEK1/2 途径的抑制与雄激素受体的磷酸化状态变化直接相关,AR 信号途径的突变与多种疾病有关,ARv7 拼接变异体常常在去势抵抗性前列腺癌(CRPC)中表达。

RevMAb的重组兔单克隆 RM7(货号:REV-31-1109-00)特异性检测人雄激素受体拼接变异体7(AR-V7),且不与野生型 AR 发生交叉反应。

独特的兔重组抗体,专为提升结果打造!

图:使用抗AR(ARv7 var)(人)、兔单克隆(RM7)对福尔马林固定和石蜡包埋的骨转移性前列腺癌组织进行免疫组

图:织化学染色。经临床验证该组织对 ARv7 显阴性、阳性分别如后图、前图所示。

 

产品列表


产品编号

产品名称

包装

REV-31-1109-00

anti-AR (ARv7 Splice Variant) (human),
Rabbit Monoclonal (RM7)
抗AR (ARv7 拼接变体) (人), 兔单克隆抗体 (RM7)

100 μL


其他突变特异性抗体

产品编号

产品名称

包装

REV-31-1042-00

anti-BRAF (V600E) (human), Rabbit Monoclonal (RM8)
抗BRAF (V600E) (人), 兔单克隆抗体 (RM8)

50 μg

100 μg

REV-31-1276-00

anti-IDH1 (R132H) (human), Rabbit Monoclonal (RM390)
抗IDH1 (R132H) (人), 兔单克隆抗体 (RM390)

100 μL

REV-31-1266-00

anti-EGFR (L858R) (human), Rabbit Monoclonal (RM380)
抗EGFR (L858R) (人), 兔单克隆抗体 (RM380)

100 μL

◆组蛋白修饰&突变生物标志物


抗组蛋白H3.3 G34W(人),兔单克隆抗体(RM263)

组蛋白在转录调节、DNA修复、DNA复制及染色体稳定性中起核心作用,组蛋白H3是DNA结合蛋白之一,组蛋白修饰是表观遗传信息的形式之一,与基因调控密切相关。长期以来,异常的组蛋白甲基化都与癌症有关,最近在多种癌症中发现了复发性组蛋白突变(包括H3K4M、H3K9M、H3K27M、H3K36M和H3G34V/R/W),并已被证明可阻止组蛋白甲基化。

RevMAb的重组兔单克隆RM263(货号:REV-31-1145-00)特异性检测人组蛋白H3.3 G34W突变体,且不与野生型组蛋白H3.3发生交叉反应。

独特的兔重组抗体,专为提升结果打造!

图:使用组蛋白H3.3 G34W(人)、兔单抗(RM263)对福尔马林固定和石蜡包埋的293T细胞进行免疫组织化学染

图:色。经DNA编码组蛋白H3.3 G34W突变体转染的293T细胞(左)和经DNA编码组蛋白H3.3野生型转染的293T细

图:胞(右)。

产品列表

产品编号

产品名称

包装

REV-31-1145-00-R100

anti-Histone H3.3 G34W Mutant (human),
Rabbit Monoclonal (RM263)
抗组蛋白 H3.3 G34W突变 (人), 兔单克隆抗体 (RM263)

100 μL

REV-31-1145-00-R400

400 μL

其他组蛋白突变特异性抗体

产品编号

产品名称

包装

REV-31-1175-00

anti-Histone H3 K27M (human), Rabbit Monoclonal (RM192)
抗组蛋白 H3 K27M (人), 兔单克隆抗体 (RM192)

100 μL

400 μL

REV-31-1085-00

anti-Histone H3 K36M (human), Rabbit Monoclonal (RM193)
抗组蛋白 H3 K36M (人), 兔单克隆抗体 (RM193)

100 μL

400 μL

REV-31-1120-00

anti-Histone H3.3 G34R Mutant (human),
Rabbit Monoclonal (RM240)
抗组蛋白 H3.3 G34R突变 (人), 兔单克隆抗体 (RM240)

100 μL

400 μL

◆DNA甲基化生物标志物


抗5-甲基胞嘧啶,兔单克隆抗体(RM231)


众所周知,5-甲基胞嘧啶是表观遗传修饰之一,也是DNA碱基胞嘧啶的甲基化形式,可调节基因转录并参与表观遗传学。5-甲基胞嘧啶是基因组转录中非常重要的抑制子。当5-甲基胞嘧啶存在于启动子时,其与稳定的长期转录沉默有关。

RevMAb的重组兔单克隆RM231(货号:REV-31-1110-00)可在单链和双链DNA中特异性检测5-甲基胞嘧啶,且不与DNA中的非甲基化胞嘧啶和羟基甲基胞嘧啶发生交叉反应。


独特的兔重组抗体,专为提升结果打造!


图:使用抗-5-甲基胞嘧啶、兔单克隆(RM231)(红色)对HeLa细胞进行免疫细胞化学染色。

肌动蛋白丝经荧光鬼笔环肽标记(绿色),细胞核经DAPI染色(蓝色)。

产品列表


产品编号

产品名称

包装

REV-31-1110-00-C050

anti-5-Methylcytosine, Rabbit Monoclonal (RM231)
抗5-甲基胞嘧啶, 兔单克隆抗体 (RM231)

50 μg


其他DNA甲基化特异性抗体

产品编号

产品名称

包装

REV-31-1111-00

anti-5-Hydroxymethylcytosine, Rabbit Monoclonal (RM236)
抗5-羟甲基胞嘧啶, 兔单克隆抗体 (RM236)

50 μg

REV-31-1248-00

anti-N6-Methyladenosine, Rabbit Monoclonal (RM362)
抗N6-甲基腺嘌呤, 兔单克隆抗体 (RM362)

50 μg

◆PEG抗体药代动力学研究


抗PEG(甲氧基),兔单克隆抗体(RM105)


PEG共价结合(PEG化)通常用于修饰多种蛋白质和药物。PEG化分子的治疗益处包括增加生物利用度,增加药物血液循环,优化药代动力学,降低免疫原性以及减少给药频率。

RevMAb的重组兔单克隆RM105(货号:REV-31-1008-00)检测聚乙二醇(PEG)的甲氧基。本品对甲氧基聚(乙二醇)显示特异性。

 

独特的兔重组抗体,专为提升结果打造!


图:使用抗聚乙二醇(甲氧基)、兔单克隆(RM105)对小鼠肝脏和肾脏进行免疫组织化学染色。

图:采样前,给小鼠注射PEG-BSA或BSA 3 h。

产品列表

产品编号

产品名称

包装

REV-31-1008-00-C100

anti-Polyethylene Glycol (methoxy group),
Rabbit Monoclonal (RM105)
抗聚乙二醇 (甲氧基), 兔单克隆抗体 (RM105)

100 μg


我们另外还提供:

● 范围广泛、一致性高且可靠的重组兔、山羊单克隆二抗。

● 高特异性anti-His、anti-FLAG® 以及anti-HA表位标签的重组单克隆抗体。

 

※ 以上产品仅供研究,切勿用于人体。


亲和性标签肽 重组蛋白提取用

亲和性标签肽
重组蛋白提取用

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

亲和性标签肽                              重组蛋白提取用

重组蛋白提取用

亲和性标签肽

亲和性标签肽                              重组蛋白提取用

亲和性标签肽                              重组蛋白提取用

◆亲和性标签肽


本产品是可用于竞争洗脱各种标签抗体珠回收到的重组蛋白的肽。


产品名称

备注

规格

产品编号

包装

DYKDDDDK标签肽

DYKDDDDK肽

DYKDDDDK Peptide

含量(HPLC)95%以上

基因研究用

044-30951

5 mg

040-30953

25 mg

His标签:HHHHHH(6×Histidine)

6×组氨酸肽

6×Histidine Peptide

含量(HPLC)95%以上

基因研究用

087-09251

5 mg

083-09253

25 mg

HA标签:YPYDVPDYA

HA 肽

HA Peptide

含量(HPLC)95%以上

基因研究用

088-09161

5 mg

084-09163

25 mg

c-Myc标签:EQKLISEEDL

c-Myc肽

c-Myc Peptide

含量(HPLC)95%以上

基因研究用

132-16361

5 mg

138-16363

25 mg

◆相关产品


内参照

下表为Western Blot实验中参照用单抗一览表。


产品名称

规格

产品编号

包装

抗β肌动蛋白单抗
  Anti β-Actin, Monoclonal Antibody

免疫化学用

013-24553

200 μg

011-24554

1 mg

017-24556

5 mg

抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记

Anti β-Actin, Monoclonal Antibody,   Peroxidase Conjugated

免疫化学用

017-24573

200 μL

抗α-微管蛋白, 单抗

Anti α-Tubulin, Monoclonal Antibody

免疫化学用

011-25034

10 μg

017-25031

200 μg

013-25033

1 mg

Anti β-Tubulin, Monoclonal Antibody
  抗β-微管蛋白, 单抗

免疫化学用

018-25044

10 μg

014-25041

200 μg

010-25043

1 mg

Anti GAPDH, Monoclonal Antibody
  抗GAPDH, 单抗

免疫化学用

016-25523

200 μg

014-25524

1 mg

010-25526

5 mg

Anti GAPDH, Monoclonal Antibody, Peroxidase   Conjugated
  抗GAPDH, 单抗, 过氧化酶结合

免疫化学用

015-25473

200 μL

 


蛋白酶抑制剂系列


产品名称

规格

产品编号

包装

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I,无动物源成分(通用型)

Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized

通用型

165-26021

1 mL用

161-26023

1 mL用×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III,   DMSO溶液(不含EDTA)(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution   (EDTA free) (×100)

动物细胞

163-26061

1 mL

169-26063

1 mL×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V (无EDTA)(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized

2D电泳

162-26031

1 mL

168-26033

1 mL×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI,DMSO溶液,用于植物(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)

植物细胞

164-26091

1 mL

160-26093

1 mL×5

蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII,DMSO溶液,组氨酸标签蛋白(×100)
  Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution   (for Histidine-tagged Protein) (×100)

His Tag 纯化

167-26101

1 mL

163-26103

1 mL×5

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


亲和标签比较表

亲和标签

TARGET

PA

6xHis

氨基酸序列

(YPGQ)5V

GVAMPGAEDDVV

HHHHHH

残基数

21

12

6

分子量 (kDa)

2.34

1.16

0.84

等电点(pI)

5.52

3.49

7.21

配体

TARGET tag

PA tag

Ni, Co, Zn, Cu

亲和珠回收

40% Propyleneglycol,
  1×TBS(pH7.5)

3M MgCl2, MES(pH6.0)

0.5M Imididazole(pH7.4)

单抗边界强度

(KD(M))

1.0×10-8

4.9×10-10

Ni-NTA:
  1.0×10-5~-6

单抗

Clone No.

P20.1(Mouse)

NZ-1(Rat)

Merck:HIS. H8(Mouse)

亲和力

++++

+++++

+++

提纯成本

+

+

+

多肽洗脱

+++

+++

Imidazole

背景

(培养上清)

+

+

+++++

背景

(细胞裂解物)

+

+

++++

亲和标签

DYKDDDDK

c-Myc

HA

GST

氨基酸序列

DYKDDDDK

EQKLISEEDL

YPYDVPDYA

残基数

8

10

9

218

分子量 (kDa)

1.01

1.20

1.10

26

等电点(pI)

3.97

4.00

3.56

配体

DYKDDDDK tag

c-Myc tag

HA tag

GST

亲和珠回收

Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

Glutathione,
  Tris-HCl,
  Glycine Buffer(pH2~3.5)

单抗边界强度

(KD(M))

2.8×10-8

2.2×10-9

2.8×10-9

Glutathione:
  1.0×10-5~-6

单抗

Clone No.

M2(Mouse)

9E10(Mouse)

3F10(Mouse)
  HA-7(Rat)

Wako:5A7(Mouse)

亲和力

++++

++++

++++

++++

提纯成本

++

++

++

+

多肽洗脱

+++

++

++

Glutathione

背景

(培养上清)

++++

+++

+++

++++

背景

(细胞裂解物)

++++

++++

+++

++++

  本比较表为Wako独家调查的数据。样品、检测方法和手法的不同,特异性也会有所变化,因此无法保证各个亲和标签的功能。

 

RTrypsin 重组胰蛋白酶 品牌:IMD


RTrypsin

重组胰蛋白酶

品牌:IMD
CAS No.:
储存条件:-15℃以下
纯度:≥95% by SDS-PAGE
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

IMD-RTP-M001

for Proteome Research 1 mg 咨询


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

测序级重组胰蛋白酶MTrypsin

测序级重组胰蛋白酶MTrypsin

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

测序级重组胰蛋白酶MTrypsin测序级重组胰蛋白酶MTrypsin



◆概述


胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一种丝氨酸蛋白酶,酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由重组毕赤酵母表达并采用层析色谱法纯化获得,氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致。未经修饰的胰蛋白酶自切降解肽段,可能对蛋白质测序及液质联用质量肽图检测造成干扰,自切降解会造成消化样品过程中酶活性降低,且被证明可能产生胰糜蛋白酶活性。本品为重组表达胰蛋白酶,多步纯化无杂酶活性;经还原甲基化修饰,在蛋白组学及质量肽图研究中,对单独酶切或与Lys-C分步/混合酶切时,对蛋白酶水解具有抵抗力,从而保证其活性高稳定性好。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如TLCK、PMSF等的抑制,金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。



特点


●  优良的稳定性:0.1 mg/mL测序级胰蛋白酶MTP,于50 mmol NH4HCO3酶切缓冲中37℃水浴反应过夜(15 h),酶活保留超过90%。

●  良好的特异性:利用测序级胰蛋白酶MTP,1:50(w/w)酶切人胰岛素B链,RP-HPLC于214 nm波长检测酶切产物,酶切16 h产物与2 h产物相比,产物肽峰比例增加而个数为2个且不随时间延长增加。



特性


性状    白色或类白色冻干粉

纯度    ≥95%

相对分子量    23 kDa±2.3 kDa

酶比活性    ≥3800 USP/mg 



来源


由重组毕赤酵母表达并采用层析色谱法纯化获得,氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致。 



稳定性


酶稳定性对比研究


考察样品均为RTP冻干粉或MTP冻干粉用10 mmol/L HCl或50 mmol/L NH4HCO3溶解的酶溶液(含量为0.1 mg/mL)。


测序级重组胰蛋白酶MTrypsin



使用方法


溶解缓冲:10 mmol/L HCl或CH3COOH,20 mmol/L CaCl2;溶解后分装-15℃以下保存。

酶切缓冲:50 mmol/L Tris-HCl或50 mmol/ NH4HCO3,1 mmol/L CaCl2,pH 7.6~8.0;

推荐条件:50 mmol/L Tris-HCl或50 mmol/ NH4HCO3,1 mmol/L CaCl2酶切缓冲中,1:20~1:100比例与待消化蛋白(含量0.5~1.0 mg/mL)混合,30~37℃进行酶切反应;经变性处理的蛋白,尿素或盐酸胍建议稀释至1 mol/L以下。



应用实例


MTP与RTP用于酶切质量肽图对比


测序级重组胰蛋白酶MTrypsin

获取质谱分子量肽峰个数

备注

MTP(黑色)

13

1:50酶切15 h

RTP(蓝色)

9


保存条件


储存稳定性:冻干粉存于-15℃以下,24个月稳定;HCl或CH3COOH溶解后,分装冻存于-15℃以下。

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
MTP1504 测序级重组胰蛋白酶MTrypsin 20 μg
MTP1505 测序级重组胰蛋白酶MTrypsin 20 μg×5

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

◆概述


胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一种丝氨酸蛋白酶,酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由毕赤酵母重组表达并采用层析色谱法纯化获得。氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致,分子量为24 kDa,最适pH为7.0-9.0。可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:重组胰岛素生产;细胞培养、细胞发酵;蛋白质的酶解、测序;各种组织的细胞分离等。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如TLCK、PMSF等的抑制,金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。

 


◆优势


● 批量生产规模大,批间小

● 高纯度,高比活性

● 重组表达生产,无外源性病毒污染,生产过程不使用动物来源原料

 


◆纯度


SDS-PAGE显示纯度>95%。

 


◆来源


重组毕赤酵母菌株,其克隆有来自猪的胰腺来源阳离子型胰蛋白酶基因。

 

◆使用方法


保存:10 mmol/L HCl,20 mmol/L CaCl2;溶解后分装-15 ℃以下保存。

酶切体系:25 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6~8.0。

推荐使用量:蛋白酶:融合蛋白质量比1:20~1:100(肽图或蛋白组学研究),1:200~1:2000(多肽/蛋白生产工艺)。

 

◆保存条件


储存稳定性:冻干粉存于-15 ℃以下,24个月稳定;10 mmol/L HCl,20 mmol/L CaCl2溶解后分装储存于-15 ℃以下,反复冻融5次,未能观察

                    到活性损失;溶解后2~8 ℃保存建议不超过7 d。

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定

 

◆应用实例

 

RTrypsin特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR、LWK、YGK、R、RLWK,蛋白酶:合成多肽质量比1:100,37 ℃酶切反应10 min,LC-MS验证酶切反应特异性。

重组胰蛋白酶(RTrypsin)

Peak#

R.T.

M.W.

Sequence

Peak 1

6.70 min

366.42

YGK

Peak 2

7.61 min

552.6

YGKR

Peak 3

17.67 min

445.56

LWK

Peak 4

19.53 min

601.75

RLWK

Peak 5

19.97 min

950.15

YGKRLWK

◆产品信息


产品编号

产品名称

规格

比活

RTP0102

RTrypsin

10 mg

3800 USP/mg

RTP0103

RTrypsin

1 mg

3800 USP/mg

RTP0104

RTrypsin

10 μg

3800 USP/mg



◆相关产品


产品编号

产品名称

规格

储存温度

其他信息

MDRK0101 

RTrypsin  ELISA Kit
重组胰蛋白酶检测试剂盒

96 孔

2~8 ℃

检测范围
4.0~250 ng/mL

IRTP0101 

immobilized Recombinant Trypsin
固定化重组胰蛋白酶

1.0 mL

-15 ℃以下

1.0 mL含1.0 mg


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重组羧肽酶B(RCPB)

重组羧肽酶B(RCPB)

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

重组羧肽酶B(RCPB)重组羧肽酶B(RCPB)

 

重组羧肽酶B(RCPB)

◆概述


羧肽酶B(E.C 3.4.17.2)属金属羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族,可选择性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪类氨基酸残基的羧肽酶A,羧肽酶B优先切割碱性氨基酸,同时也能切割一些非碱性氨基酸。重组CPB的活性受到典型的金属螯合剂如EDTA,及Cu2+,Hg2+抑制;而Zn2+,Mn2+等金属离子则能够不同程度提高酶活。CPB的最适pH为8.0,偏酸或偏碱均会造成活性下降,pH接近5.0时活性接近零,pH>12.0时活性完全丧失。CPB在一定温度内(<60 ℃)活性随温度升高而上升。


※碱性氨基酸:水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸,其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团。包括以下三种:

中文名

英文名

缩写

符号

等电点

精氨酸

Arginine

Arg

R

10.76

赖氨酸

Lysine

Lys

K

9.74

组氨酸

Histidine

His

H

7.59

◆优势


● 单批次产量大,批间差小

● 高纯度,高比活性

● 无外源性病毒污染,无动物源生产原料

 


◆应用范围


生产工艺:重组胰岛素及其类似物的生产制备工艺,重组多肽类药物的生产制备工艺等。

质控与科研:单克隆抗体的质量检测,蛋白质C-末端氨基酸测定等。

 


◆纯度


SDS-PAGE显示纯度>90%。



◆使用方法


保存:25 mmol/L Tris-HCl, pH 7.6或无菌水;溶解后分装-15 ℃以下保存。

酶切体系:pH 7.5~9.0;

推荐使用量:蛋白酶:融合蛋白质量比1:50~1:1000

 


◆保存条件


储存稳定性:冻干粉存于-15 ℃以下,24个月稳定;25 mmol/L Tris-HCl,pH 7.6溶解后分装储存于-15 ℃以下,反复冻融5次,活性无损失;

                    溶解后2~8 ℃保存建议不超过3 d。

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。

 


◆应用实例


RCPB特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKRLW及K,蛋白酶:合成多肽质量比1:5000,37 ℃酶切反应10 min,LC-MS验证酶切反应特异性。

 

重组羧肽酶B(RCPB)

Peak#

R.T.

M.W.

Sequence

Peak 1

7.06 min

950.15

YGKRLWK

Peak 2

8.27 min

821.98

YGKRLW

◆产品信息

产品编号

产品名称

规格

比活

RCPB0302

RCPB

10 mg

150 U/mg

RCPB0304

RCPB

10 μg

150 U/mg

◆相关产品

产品编号

产品名称

规格

储存条件

其他信息

MDRK0301

RCPB ELISA Kit
重组羧肽酶B检测试剂盒

96 孔

2~8 ℃

检测范围:
15.6~1000 ng/mL

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)

重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)

重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)



◆概述


Kex-2(E.C.3.4.21.61)属于枯草杆菌蛋白酶家族,为酵母自身编码的一种前体加工酶,Ca2+ 依赖型丝氨酸蛋白酶,能够专一性地识别和切割Lys-Arg,Arg-Arg,Pro-Arg等双碱性氨基酸 的羧基端肽键。不同于Trypsin,该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸(Arg或Lys)的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点,便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH为9.0,在偏酸性环境中稳定,稳定pH为5.0-6.0。最适温度为37 ℃,酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂(如PMSF、TPCK等)抑制。

 

※碱性氨基酸:水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸,其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团。包括以下三种:

中文名

英文名

缩写

符号

等电点

精氨酸

Arginine

Arg

R

10.76

赖氨酸

Lysine

Lys

K

9.74

组氨酸

Histidine

His

H

7.59

◆优势


● 单批次产量大,批间差小

● 高纯度,高比活性

● 无外源性病毒污染,无动物源生产原料

 


◆纯度


SDS-PAGE显示纯度>90%。

 


◆使用方法


溶解缓冲:20 mmol/L NaAc-HAc,2 mmol/L Ca2+,pH 5.0~5.5。

酶切体系:50~100 mmol/L Tris,2 mmol/L Ca2+,pH 7.0~9.0;或HEPES,5 mmol/L  Ca2+,pH 7.0~9.0;

推荐使用量:蛋白酶:融合蛋白质量比1:20~1:1000



◆保存条件


储存稳定性:冻干粉存于-15 ℃以下,24个月稳定;20 mmol/L NaAc-HAc,2 mmol/L Ca2+

储存稳定性:pH 5.0~5.5溶解后分装储存于-15 ℃以下,避免反复冻融;溶解后2~8 ℃保存建议不超过24 h。

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。



◆应用实例


RKex-2特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR及LWK,蛋白酶:合成多肽质量比1:1000,37 ℃酶切反应10 min,LC-MS验证酶切反应特异性。

重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)

Peak#

R.T.

M.W.

Sequence

Peak 1

2.79 min

522.6

YGKR

Peak 2

6.26 min

445.56

LWK

Peak 3

6.94 min

950.15

YGKRLWK

◆产品信息


产品编号

产品名称

规格

比活

RKex20202

RKex2

10 mg

10 U/mg

RKex20204

RKex2

10 μg

10 U/mg

◆相关产品

产品编号

产品名称

规格

储存温度

检测范围

MDRK0201

RKex2 ELISA Kit
重组双碱性内肽酶检测试剂盒

96 孔

2~8 ℃

1.0~4000 ng/mL

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

重组赖氨酰内肽酶RLys-C

重组赖氨酰内肽酶RLys-C

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

重组赖氨酰内肽酶RLys-C重组赖氨酰内肽酶RLys-C

重组赖氨酰内肽酶RLys-C



◆概述


赖氨酰内肽酶最早从土壤细菌无色杆菌Achromobacter lyticus中分离得到,能够特异性识别与切割肽链中Lys羧基端肽键,常被用于蛋白测序及Lys-X化合物的酶催化合成。

艾美迪选用Achromobacter lyticus来源的,克服大肠杆菌重组表达技术难题进行制备。本品最适pH 9.0~9.5,等电点为pH 6.9~7.0;最适反应温度30~37℃,50℃以上稳定性下降。在适宜温度下,该酶稳定性良好,在4 mol/L尿素或0.2%SDS溶液中30℃孵育6 hr后,生物活性未发生降低。可广泛用于蛋白组学分析,蛋白、抗体类药物质量检测,多肽、蛋白类产品制备工艺中。

 


◆特性


● 高比活性,高特异性,可消化难以酶切的位点,空间构象复杂或疏水性较强的蛋白(如膜蛋白)同样适用

● 活性稳定,尿素、乙腈等变性剂耐受能力强

● 批量化生产,连续批次质量稳定,批间差小

● 高纯度,重组表达避免了可能存在的杂酶残留(e.g. Arg-C,Lys-N等)



◆来源


重组 E. coli 菌株,其克隆有来自的无色杆菌(A. lyticus蛋白酶I基因。

 


◆酶活定义


0.2 mol/L pH 9.0Tris-HCl缓冲中,温度为37±2℃的条件下, 1 min催化底物AC-Lys-PNA生成1 μmol PNA所需的酶量为一个活性单位(AU)。

 


◆纯度


将 rLys-C以DTT 还原处理后, 还原电泳显示纯度>99%


重组赖氨酰内肽酶RLys-C

◆使用方法


本品为冻干粉,使用前先使用超纯水或25 mmol/L Tris-HCl,pH 8.0~8.5溶解。



◆应用实例


RLys-C酶切重组人门冬胰岛素原(Pro-Insulin-Aspart)

底物Pro-Insulin-Aspart分子量约为7 kDa,含有3个赖氨酸(K),采用 Lys-C 酶切的理论肽段示意图如下:


重组赖氨酰内肽酶RLys-C

酶切条件酶与底物的质量比为 1:10000,在50 mM Tris-HCl,pH 8.5中37℃酶切16 小时。


重组赖氨酰内肽酶RLys-C


峰 A:酶切前肽段 Pro-Insulin-Aspart

峰 B:酶切后 B链+C肽+A链(去引导肽)

峰 C:酶切后B链+A链(去引导肽和C肽)



名称 

RT 

Area 

Area% 

质谱量 

酶切位点 

对应肽段

Pro-Insulin-Aspart
    未酶切对照 

10.45

155.045

100%

7096.94

酶切前

以IMD-RLys-C-酶切产物
(酶:底物1:10000)

11.57

201.6

100%

5724.54

B链+A链

以其他公司重组Lys-C酶产物
(酶:底物1:10000)

10.49

146.9

61.78%

7096.94

酶切前

10.62

81.5

34.29%

6006.84

① 

B链+C肽+A链

艾美迪的 RLys-C 酶切产物为切除引导肽和 C 肽的门冬胰岛素前体,酶切位点①②③均酶切完全。

而其他公司产品仅部分切开酶切位点①,切除效率仅为34.29%,酶切位点②③均未被酶切,未能得到序列正确的门冬胰岛素前体。

◆与其他公司产品对比


底物 

酶切位点对比 

艾美迪 

其他公司重组Lys-C

重组人门冬胰岛素原

(Pro-Insulin Aspart)

分子量约为7 kDa,含有3个K

①PK

++ 

+

②DK

++ 

③GK

++ 

重组人普通胰岛素原

(Pro-Insulin)

分子量约为7 kDa,含有3个K

①PK 

++ 

+

②PK 

++ 

+

②AK 

++ 

+

PJ-10S小肽
分子量约为1 kDa,含有3个K

①DK 

++ 

+


相同底物浓度的酶切条件下艾美迪的 RLys-C 的酶切效率显著高于其他品牌同类产品。以生成的肽段 YDDDDK 计算,艾美迪的RLys-C 的酶切率比其他品牌同类产品高约9倍;以生成的肽段 RGWK 计算,艾美迪的RLys-C的酶切效率比其他品牌同类产品高约8.6倍。



◆产品信息

产品编号 产品名称 规格
RLYS-C0401

RLys-C

重组赖氨酰内肽酶

20 μg
RLYS-C0403

RLys-C

重组赖氨酰内肽酶

1 mg



◆相关产品


产品编号 产品名称 规格
RME0101

    Lys-C + Trypsin

重组赖氨酰内肽酶/重组胰蛋白酶混合装

20 μg
RME0102

Lys-C + Trypsin

重组赖氨酰内肽酶/重组胰蛋白酶混合装

20 μg×5

产品编号 产品名称 规格 储存条件 其他
IRLys-C0401 immobilized RLys-C
固定化重组赖氨酰内肽酶
1.0 mL -15℃以下 1.0 mL含1.0 mg
MDRK0401 RLys-C ELISA Kit
重组赖氨酰内肽酶检测试剂盒
96孔 -15℃以下

检测范围:

1.0~4000 ng/mL


※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


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