AgNO3 硅胶(10%)的配制


AgNO3 硅胶(10%)的配制

AgNO3 硅胶(10%)的配制

 

5.6g AgNO3溶于21mL超纯水中

逐滴加入到50g活化硅胶中(或者11.2g AgNO3+35mL水+100g硅胶)

用铝箔纸将装AgNO3硅胶的烧瓶全部包裹住,烧瓶口用铝箔纸疏松地盖住,置于干燥烘箱中

烘箱中30℃烘5hrs(至少5hrs)

升温到60℃停留3hrs

                      ↓中间慢点升温         

升温到180℃至少12hrs

干燥器中降温后加塞密闭(保存在棕色干燥器中备用)

 

Note:如果在制作过程中发现AgNO3硅胶颜色加深或者局部变为灰黑色,应该弃去此次配制。变色原因:升温过快。

Note:装AgNO3的小烧杯要尽快用超纯水洗净,否则AgNO3会粘到烧杯上,不容易洗干净。

Na2SO4: 660℃下马福炉中烘至少6 hrs(优级纯)

注意:提取筒洗过后要在马福炉里420℃烘一段时间

 

纯化注意事项:

1.所有纯化柱均采用干法装制;

2装好填料后轻拍柱子至填料表层平整;

3一旦加上洗脱液后,则不要再拍动柱子;

4一定量的hexane预淋洗进行稳定,并且除去部分污染杂质;

5预淋洗时流速控制在2滴/S;

6填料若出现断层则不能再使用;

7上柱样品后,用1mL正己烷清洗烧瓶;

8要等上一组分液面约1mm时再上样;

9若是做流出曲线,对体积要求就会严格一些,接流出物的量筒用铝箔包上,防止溶剂挥发。

 

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二噁英分析前处理柱

二噁英分析用硅胶

配制标准溶液: 举例


配制标准溶液: 举例

配制标准溶液: 举例


◆PBB标样转移到棕色小瓶A

 

小瓶A用DCM清洗3次(涡轮)

贴标签纸(标签纸不要贴太大,用透明胶贴一下)

称空瓶重量W0

将装标样的安培小瓶B按划线掰开

DCM清洗一下滴管,晾干,用滴管将标样安培瓶里的标准溶液吸出转移入小瓶A

称量装标后的小瓶与标的重量W1

那么W1-W0即为取的标的重量

C18柱结构式:  -Si-C18H37

目的:清除极性物质,ex: 蛋白,脂质

 


铜粉去S前铜粉的准备

 

铜粉置于烧瓶中

6MHCL倒入清洗,不锈钢药勺搅拌

倒掉HCL,超纯水清洗数次,洗净HCL为止

倒入丙酮清洗数次,将水洗净

将铜粉晾干备用(晾干的方法可以用N2吹干)

 

 

分析PBDE时所用的方法

 

1.5  g AgNO3装到柱子里(30cm×15mmID玻璃柱)

50mL or 30 mL Hexane预淋洗

100mL Hex洗PCB+dioxin

50mL 10%DCM+90% Hexane洗PBDE


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硅胶的活化及硅胶的配制


硅胶的活化及硅胶的配制

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◆硅胶的活化


  DCM(CH2CL2清洗硅胶)(进口的不需要清洗,国产的要清洗):

 

将硅胶装于玻璃柱中

3倍于硅胶体积的甲醇清洗(大约800-1000mL的甲醇)

↓ 

同体积的DCM清洗(大约500ML的DCM)

↓ 

将硅胶置于铝箔纸上,通风厨过夜让溶剂挥发干净(或者N2吹干)

马福炉中550℃烘烤至少12hrs,然后降温到180℃停留至少1hr

取出在干燥器中降温后,转制烧瓶中加塞密闭,于干燥器中备用。

 

Note: 在玻璃柱中清洗时防止硅胶有断层出现

 


◆酸性硅胶的配制


30%酸性硅胶的配制

于烧瓶中称取100g活化硅胶

于硅胶上逐滴滴入浓H2SO4共40g(硫酸密度为1.84g/mL)

计算公式为 x/(x+100)=30%, x=42.86g,    42.86/1.84=23.3mL

Note 边加边摇,以防结块,或置于摇床上至硅胶为均匀流动状态 

置于干燥器中保存

↓ 

若配制时用50g硅胶,那么H2SO4取11.65mL(大约为21.4g)

22%酸性硅胶:8mL浓H2SO4加50g活化硅胶

44%酸性硅胶:43mL浓H2SO4加100g活化硅胶

44%酸性硅胶:21.5mL浓H2SO4加50g活化硅胶

43×1.84/(100+43×1.84)= 44%

Note: 楼上的方法不能用于楼下,因为所用的硅胶不同,色谱行为就不同,即使柱形一样。因为楼上用的硅胶与楼下的不同,所以不能方法混用。楼上硅胶是国产,楼下的是进口的。


 

碱性硅胶的配制(1.2%)

100g活化硅胶 

↓ 

滴入30g 1 N的NaOH(1N NaOH: 1.2gNaOH溶于30mL水)

注意:不要使硅胶沾到烧瓶的内磨口上,否则盖子关上后容易粘住打不开 

          楼上用的是33%的碱性硅胶 (水+NaOH)/(水+NaOH+硅胶)=33%

          1g NaOH 加到25mL水里,即配制成了1mol/L的溶液,然后加入到50g活化硅胶中。

 

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配制 SDS-PAGE 凝胶・缓冲剂试剂

配制 SDS-PAGE 凝胶・缓冲剂试剂

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配制 SDS-PAGE 凝胶・缓冲剂试剂配制 SDS-PAGE 凝胶・缓冲剂试剂



◆ 1 mol/L(±)-二硫苏糖醇(DTT)溶液


  1 mol/L (±)-二硫苏糖醇的水溶液。用于保护蛋白质的 SH 基及切断二硫化物的结合。已经过 0.2 μm 过滤器过滤。

  开启后请尽快使用。

  用作 SDS-PAGE 的还原剂时,请将本产品的最终浓度调至 100 mmol/L添加到样品缓冲液。

配制 SDS-PAGE 凝胶・缓冲剂试剂

1 mL 包装

◆ 0.5 mol/L TCEP 溶液、中性


  本产品为已调至中性的 0.5 mol/L TCEP 水溶液(TCEP),不含硫醇的还原剂。

  已使用氢氧化钠调节pH值,已经过 0.2 μm 过滤器过滤。

  开启后请尽快使用。

  用作 SDS-PAGE 的还原剂时,请将本产品的最终浓度调至 50 mmol/L添加到样品缓冲液。

  ※TCEP : Tris(2-carboxyethyl)phosphine Hydrochloride

配制 SDS-PAGE 凝胶・缓冲剂试剂

1 mL 包装

蛋白质电泳相关化合物



产品编号

产品名称

规格

包装

甲叉双丙烯酰胺溶液

018-25625

30w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (37.5:1)

0w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(37.5:1)

用于电泳

500 mL

015-25635

30w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (29:1)

30w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(29:1)

500 mL

012-25645

30w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (19:1)

30w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(29:1)

500 mL

019-25655

40w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (37.5:1)

40w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(37.5:1)

500 mL

016-25665

40w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (29:1)

40w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(29:1)

500 mL

013-25675

40w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (19:1)

40w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(19:1)

500 mL

丙烯酰胺

017-08012

019-08011

011-08015


Acrylamide

烯酰胺

≧99.0%


用于电泳

25 g

100 g

500 g

012-24702

014-24701

016-24705

010-24703


Acrylamide

丙烯酰胺

≧99.0%,Protease, Nuclease-free


蛋白质组学

25 g

100 g

500 g

1 kg

交联剂(双丙烯酰胺)

138-06032

130-06031

N,N'-Methylenebis(acrylamide)

N,N-亚甲基双丙烯酰胺

≧99.0%


用于电泳

25 g

100 g

SDS

197-07142

199-07141

191-07145


Sodium Dodecyl Sulfate

十二烷基硫酸钠[SDS]

≧95.0%(capillary GC), ≧98.0%(Titration)


生物化学用

25 g

100 g

500 g

聚合促进剂(APS)

012-08023

016-08021

Ammonium Peroxodisulfate

硫酸[APS]

≧99%

用于电泳

10 g

100 g

019-15922

10w/v% Ammonium Peroxodisulfate Solution

10w/v%过硫酸铵溶液

[10w/v% APS]

用于电泳

25 mL

聚合引发剂(TEMED)

205-06313

N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine

N,N,N',N'-四甲基乙二胺[TEMED]

≧99.0%

用于电泳

25 mL

208-17452

200-17451

N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine

N,N,N',N'四甲基乙二胺[TEMED]

≧98.0%, Protease, Nuclease-free

蛋白质组学

25 mL

100 mL

Tirs

202-07881

204-07885

206-07884

2-Amino-2-hydroxymethyl-1,3-propanediol

2-2-氨基-2-羟甲基-1,3-丙二醇[Tris]

≧99.0%

生物化学用

100 g

500 g

2.5 kg

Tris-HCl

010-17451

012-17455

016-17453

2-Amino-2-Hydroxymethyl-1,3-propanediol Hydrochloride

2-氨基-2-羟甲基-1,3-丙二醇盐盐[Tris-HCl]

≧99.0

生物化学用

100 g

500 g

1 kg

还原剂

137-06862

133-06864

139-06861

2-Mercaptoethanol

2-巯基乙醇

≧98.5

生物化学用

25 g

100 g

2 mL×5

041-08971

047-08973

045-08974

041-08976

049-08972


(+/-)-Dithiothreitol

(+/-) – 二硫苏糖醇[DTT]

≧97.0%

预防SH组氧化

100 mg

1 g

5 g

10 g

25 g

207-09232

201-09235

3-Mercapto-1,2-propanediol

3--1,2-丙二醇

≧98.0

和光特级

25 mL

500 mL

209-19861

205-19863

203-19864

TCEP Hydrochloride

TCEP

≧98.0%

生物化学用

1 g

10 g

50 g

其他

079-00614

075-00616

075-00611

Glycerol

甘油

≧99.0%

试剂特级

100 mL

500 mL

3 L

021-02911

029-02912

Bromophenol Blue

试剂特级

1 g

25 g

043-16785

047-16783

045-16784


Distilled Water

蒸馏水


500 mL

2 L

2 L×6

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
044-33871 1 mol/l (+/-)-Dithiothreitol(DTT) Solution
1 mol/l (±)-二硫苏糖醇(DTT)溶液
1 mL
040-33873 1 mol/l (+/-)-Dithiothreitol(DTT) Solution
1 mol/l (±)-二硫苏糖醇(DTT)溶液
1 mL×10
207-20151 0.5 mol/l TCEP Solution, Neutral pH
0.5 mol/l TCEP溶液, 中性
1 mL
203-20153 0.5 mol/l TCEP Solution, Neutral pH
0.5 mol/l TCEP溶液, 中性
1 mL×10