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品牌：IMD
CAS No.： 储存条件：-15℃以下 纯度：反相≥70%， |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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IMD-RLYSC-C010 |
for Proteome Research | 10 ug | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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品牌：IMD
CAS No.： 储存条件：-15℃以下 纯度：反相≥70% |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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IMD-RLYSC-C020 |
for Proteome Research | 20 ug | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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品牌：IMD
CAS No.： 储存条件：-15℃以下 纯度：反相≥70% |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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IMD-RLYSC-M001 |
for Proteome Research | 1 mg | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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品牌：IMD
CAS No.： 储存条件：-15℃以下 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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IMD-IRLYSC-L001 |
– | 1.0 ml | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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125-02543 |
for Biochemistry | 1 vial(2 AU) | – |
|
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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|
品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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129-02541 |
for Biochemistry | 1 vial(10 AU) | – |
|
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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品牌：IMD
CAS No.： 储存条件：-15℃以下 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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IMD-RME-C020X5 |
for Proteome Research | 20 ug×5 | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
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测序级重组赖氨酰内肽酶/胰蛋白酶预混装
测序级重组赖氨酰内肽酶/胰蛋白酶预混装
◆概述
本品选用A. Lyticus 来源氨基酸序列，利用独特大肠杆菌重组表达技术制备的Lys-C，能够特异性识别并酶切肽链中Lys羧基端肽键；其与重组表达并经甲基化修饰的测序级胰蛋白酶，经研究和方法验证，按照特定比例混合后，能够在一次酶切或分步酶切中，保证特异性的前提下，酶切效率更高，便于进行序列分析。
◆优势
1）采用甲基化修饰重组表达胰蛋白酶，其赖氨酸残基经甲基化修饰有效防止酶切缓冲中胰酶自切或被Lys-C降解造成胰酶活性的降低。
2）独有的Lys-C重组表达制备技术，保证高纯度与高酶活性的同时，无任何杂酶活性，确保酶切反应的特异性。
◆纯度·来源
选用A. Lyticus 来源氨基酸序列，利用独特大肠杆菌重组表达技术制备的Lys-C
选用猪的胰腺来源阳离子型胰蛋白酶基因，利用毕赤酵母菌株重组表达技术制备的胰蛋白酶
◆使用方法
溶解缓冲：用无菌水或者50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5；溶解后分装，-15℃以下保存。
酶切缓冲：50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5
推荐条件：蛋白酶:融合蛋白质量比1:25~1:100（蛋白组学或肽图）37℃反应。
针对疏水性强、溶解性较差的蛋白，可添加变性剂或者封闭二硫键（烷基化）使其空间结构被打开，从而提高酶切效率或者提高肽图覆盖率。
可以参考以下方法：
两步溶出法消化：可以添加终浓度为5 mmol/L的DTT 在室温反应30 min ； 再加入终浓度为10 mmol/L 的碘乙酰胺，在室温避光反应30 min。蛋白溶液中补入终浓度6~8 mol/L 尿素，胰蛋白酶/Lys-C 与蛋白质或蛋白质混合物以1：25 的蛋白质∶蛋白酶比(w/w)混合并在37℃下孵育3~4 h，用酶切缓冲稀释尿酸降至1 mol/L 以下，在37℃反应过夜。
终止反应：加入终浓度0.5-1%三氟乙酸，14000-16000×g，离心10 min 去除沉淀颗粒。
◆保存条件
储存稳定性：冻干粉存于-15℃以下，24 个月稳定；50 mmol/L Tris-HCl pH 8.0~8.5 溶解后储存于-15℃以下，反复冻融5次，无活性损失。
运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定。
◆应用实例
Lys-C/Trypsin Mix 与Trypsin 特异性酶切抗体对比图
蛋白酶：单抗质量比1:25，37℃酶切反应过夜。
(更多范畴应用实例，请与我们联系)
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
|
RME0101 |
RLys-C/MTP Mix |
20 μg/支 |
|
RME0102 |
20 μg/支，5 支 |
◆相关产品
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
|
RLYS-C0401 |
RLys-C |
20 μg |
|
RLYS-C0403 |
1 mg |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
重组赖氨酰内肽酶RLys-C
重组赖氨酰内肽酶RLys-C
◆概述
赖氨酰内肽酶最早从土壤细菌无色杆菌Achromobacter lyticus中分离得到，能够特异性识别与切割肽链中Lys羧基端肽键，常被用于蛋白测序及Lys-X化合物的酶催化合成。
艾美迪选用Achromobacter lyticus来源的，克服大肠杆菌重组表达技术难题进行制备。本品最适pH 9.0~9.5,等电点为pH 6.9~7.0；最适反应温度30~37℃，50℃以上稳定性下降。在适宜温度下，该酶稳定性良好，在4 mol/L尿素或0.2%SDS溶液中30℃孵育6 hr后，生物活性未发生降低。可广泛用于蛋白组学分析，蛋白、抗体类药物质量检测，多肽、蛋白类产品制备工艺中。
◆特性
● 高比活性，高特异性，可消化难以酶切的位点，空间构象复杂或疏水性较强的蛋白（如膜蛋白）同样适用
● 活性稳定，对尿素、乙腈等变性剂耐受能力强
● 批量化生产，连续批次质量稳定，批间差小
● 高纯度，重组表达避免了可能存在的杂酶残留（e.g. Arg-C，Lys-N等）
◆来源
重组 E. coli 菌株，其克隆有来自的无色杆菌（A. lyticus）的蛋白酶I基因。
◆酶活定义
在0.2 mol/L pH 9.0的Tris-HCl缓冲中，温度为37±2℃的条件下， 1 min催化底物AC-Lys-PNA生成1 μmol PNA所需的酶量为一个活性单位（AU）。
◆纯度
将 rLys-C以DTT 还原处理后， 还原电泳显示纯度＞99%
◆使用方法
本品为冻干粉，使用前先使用超纯水或25 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5溶解。
◆应用实例
RLys-C酶切重组人门冬胰岛素原（Pro-Insulin-Aspart）
底物Pro-Insulin-Aspart分子量约为7 kDa，含有3个赖氨酸（K），采用 Lys-C 酶切的理论肽段示意图如下：
酶切条件：酶与底物的质量比为 1：10000，在50 mM Tris-HCl，pH 8.5中37℃酶切16 小时。
峰 A：酶切前肽段 Pro-Insulin-Aspart
峰 B：酶切后 B链+C肽+A链（去引导肽）
峰 C：酶切后B链+A链（去引导肽和C肽）
|
名称 |
RT |
Area |
Area% |
质谱量 |
酶切位点 |
对应肽段 |
|
Pro-Insulin-Aspart |
10.45 |
155.045 |
100% |
7096.94 |
/ |
酶切前 |
|
以IMD-RLys-C-酶切产物 |
11.57 |
201.6 |
100% |
5724.54 |
① ② ③ |
B链+A链 |
|
以其他公司重组Lys-C酶产物 |
10.49 |
146.9 |
61.78% |
7096.94 |
/ |
酶切前 |
|
10.62 |
81.5 |
34.29% |
6006.84 |
① |
B链+C肽+A链 |
艾美迪的 RLys-C 酶切产物为切除引导肽和 C 肽的门冬胰岛素前体，酶切位点①②③均酶切完全。
而其他公司产品仅部分切开酶切位点①，切除效率仅为34.29%，酶切位点②③均未被酶切，未能得到序列正确的门冬胰岛素前体。
◆与其他公司产品对比
|
底物 |
酶切位点对比 |
艾美迪 |
其他公司重组Lys-C |
|
重组人门冬胰岛素原 （Pro-Insulin Aspart） 分子量约为7 kDa，含有3个K |
①PK↓ |
++ |
+ |
|
②DK↓ |
++ |
– |
|
|
③GK↓ |
++ |
– |
|
|
重组人普通胰岛素原 （Pro-Insulin） 分子量约为7 kDa，含有3个K |
①PK↓ |
++ |
+ |
|
②PK↓ |
++ |
+ |
|
|
②AK↓ |
++ |
+ |
|
|
PJ-10S小肽 |
①DK↓ |
++ |
+ |
相同底物浓度的酶切条件下艾美迪的 RLys-C 的酶切效率显著高于其他品牌同类产品。以生成的肽段 YDDDDK 计算，艾美迪的RLys-C 的酶切率比其他品牌同类产品高约9倍；以生成的肽段 RGWK 计算，艾美迪的RLys-C的酶切效率比其他品牌同类产品高约8.6倍。
◆产品信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 |
| RLYS-C0401 |
RLys-C 重组赖氨酰内肽酶 |
20 μg |
| RLYS-C0403 |
RLys-C 重组赖氨酰内肽酶 |
1 mg |
◆相关产品
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 |
| RME0101 |
Lys-C + Trypsin 重组赖氨酰内肽酶/重组胰蛋白酶混合装 |
20 μg |
| RME0102 |
Lys-C + Trypsin 重组赖氨酰内肽酶/重组胰蛋白酶混合装 |
20 μg×5 |
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 储存条件 | 其他 |
| IRLys-C0401 | immobilized RLys-C 固定化重组赖氨酰内肽酶 |
1.0 mL | -15℃以下 | 1.0 mL含1.0 mg |
| MDRK0401 | RLys-C ELISA Kit 重组赖氨酰内肽酶检测试剂盒 |
96孔 | -15℃以下 |
检测范围： 1.0～4000 ng/mL |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
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|
品牌：IMD
CAS No.： 储存条件：-15℃以下 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
IMD-RME-C020 |
for Proteome Research | 20 ug | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
