Q&A导读:
◆关于组胺
◆关于龟甲万的组胺检测法
◆关于显色法组胺检测试剂盒
◆关于从样本中提取组胺
◆关于检测值有误的问题
◆关于组胺
Q1: 什么是组胺?
A1: 一种由组氨酸(氨基酸)合成的胺。如果红身鱼(金枪鱼,秋刀鱼,鲣鱼,竹荚鱼,青花鱼等)等含有大量
组氨酸的食物,被组胺菌污染的话,会产生组胺。
另外,一般来说,人的喉咙和鼻粘膜上皮都存在着很多肥大细胞、嗜碱性粒细胞等。一旦数量过多,也会引
起过敏症状。
Q2: 什么是过敏性食物中毒(组胺中毒)?
A2: 红身鱼被组胺菌污染的原因是,食品在制造加工、运输时,在家庭等地方的保存温度管理不当时,组胺菌繁
殖增多,产生大量组胺。(参照:Q1.什么是组胺?)
组胺非常耐热,一旦生成,普通的加热处理无法使它分解,还是会残留在鱼肉里。因此,人们食用了被组胺
污染的鱼或其加工食品,可能会出现过敏症状。在食品安全学上,这种症状被称为过敏性食物中毒(组胺中
毒)。
Q3: 食物中含有多少组胺时,会引起食物中毒?
A3: 一般来说,食物的组胺含量超过100 mg/100 g=1000 ppm以上的话,会引起食物中毒。
组胺是会引起过敏反应,胃酸分泌,血压等各种生理反应的化学物质。因此,摄取高浓度组胺的话,约30分
钟~60分钟后,会出现面部、特别是嘴巴周围以及耳垂的泛红症状,还会出现头痛,荨麻疹,发热等。一般
经过6~10小时后会恢复正常。
Q4: 对于食物中含有的组胺量标准,是否有相关规定?
A4: 日本:没有相关法制规定。
欧美:有相关规定。因此,出口到欧美国家的食品,必须要严格遵守规定。
Q5: 有什么方法可以检测组胺量?
A5: 检测鱼肉中的组胺量方法:生物检测技术,比色法,荧光法,高速色谱法(HPLC),抗原 – 抗体反应和毛
细管电泳等。
一般来说,日本是使用卫生检测法的HPLC法;美国则是使用荧光光度法(被记载于国际标准—-AOAC法
内)。
◆关于龟甲万的组胺检测法
Q1: 龟甲万的组胺检测法与其他检测法相比有什么优点?
A1: ・提取组胺的方法简单,无需进行除去阻碍检测物质的前处理。
・与HPLC法、其他公司的同类产品相比,操作更简单。
・可以快速、精准度高地检测组胺。
・与HPLC法有着很高的相关性。
Q2: 需要什么仪器或器具?
A2: 必需:组胺检测试剂盒(显色法检测组胺),分光光度计。
其他:请阅读说明书的第一页右下角(试剂盒所需的器具)。
注意:请使用塑料器具。因为组胺会附着在玻璃上。
Q3: 一般的分光光度计也可以检测吗?
A3: 可以。但需要是可以检测460 nm上下的吸光度的分光光度计。
注意:推荐使用的分光光度计(分光光度计BABS-B470,共立理化学研究所公司所制)的光路是2 cm。
如果使用光路是1 cm的分光光度计,一旦超出组胺的检测界限,标准溶液的检测值也会变化。
详情请阅读说明书:第一页左方— [试剂盒性能] 和 第2页右方—5)标准值的检测。
◆关于显色法组胺检测试剂盒
Q1: 显色法检测组胺试剂盒的检测浓度范围?
A1: 使用推荐的分光光度计B:可以检测的组胺浓度是0.4-6 ppm。如果是检测生鱼,罐头鱼等,将样品稀
释25倍,再换算样品的浓度,可以检测组胺的范围是10-150 ppm。
光路长1 cm的分光光度计:可以检测的组胺浓度是0.8-12 ppm。
如果是检测生鱼,罐头鱼等,将样品稀释25倍,再换算样品的浓度,可以检测组胺的范围是
20-300 ppm。
此外,若样本的组胺浓度超过检测范围的话,可以稀释样本后,再检测。
Q2: 1盒显色法组胺检测试剂盒可以检测多少个样本?
A2: 本试剂盒可以检测60次。但是,在实际的检测中,每进行一次连续的检测,就需要检测一次标准值。因
此根据每次连续检测的样本数的不同,一个试剂盒可以检测的样本数也不同。
例如:
如果一次的检测就把试剂盒用完的话,除去检测一次标准值之外,实际可以的样本数为59个。
如果每次检测的样本数为5个的话,再加上每次都需要检测一次标准值。实际可以检测的次数为10次,即
可以检测的样本数为50个。
注意:在一次连续的检测中,将没用完的冷冻、冷藏后的试剂替换成新的试剂时候,请再次重新检测标准
值。
Q3: 如果没有可以调制组胺提取溶液的设备,可以买其他的代替吗?
A3: 不好意思,无法提供组胺提取液的购买。若调制溶液时遇到问题,可以使用其他替代品,详情请咨询上海金畔生物科技有限公司。
Q4: 如何保存溶解后剩下的显色试剂?
A4: 最好可以一次性用完溶解后的显色试剂。
如果真的用剩了,请在按以下方法进行保存:
冷藏:2~8℃,可保存一周
冷冻:-10℃以下,可保存一个月。
在以上保存的情况下,冻结溶解操作只可进行3次。
(详情请阅读说明书第二页左方 “2.试剂的调制(显色试剂)”)
解冻时,请在流水中快速进行。解冻完请一定要冷却后再使用。
Q5: 如何保存溶解后剩下的酶试剂?
A5: 最好可以一次性用完溶解后的酶试剂。
如果真的用剩了,请在按以下方法进行保存:
冷冻:-10℃以下,可保存一个月。冻结溶解操作只可进行3次。(详情请阅读说明书第二页左方 “2.试剂
的调制(酶试剂)”)
还有,当用完冷冻溶解后的酶试剂后,换成新的酶试剂时,请重新检测标准值。
◆关于从样本中提取组胺
Q1: 为什么从活鱼提取组胺时,需要进行煮沸处理?
A1: 因为组胺是存在于鱼肉成分(肌肉蛋白、油等)中,所以加热后再提取,效率更高。而罐头类食品本身已经过
加热处理了,提取时不需要再煮沸。
Q2: 如果不能立刻检测样本,或者是已提取了组胺的样本的话,应该怎样做?
A2: 活鱼:请冷冻保存。保存方法没有什么需要注意的点,不过为避免解冻时的酶反应发生得太快,请尽快完
成解冻。
・经过煮沸提取组胺,再过滤后的样本,可以进行放入冷藏、冷冻格里保存。
・组胺提取没有经过煮沸的样本,以及对样本进行前处理的时候,由于样本中含有酶,需要进行冷冻。解
冻的时候,如果有沉淀物出现的话请用滤纸等进行除去。
Q3: 听说样本中含有杂质时,是不能进行检测的。那么杂质是什么物质?
A3: 影响组胺检测试剂盒反应的杂质是氧化还原物质。
鱼粉:饲料不新鲜时,由此而增殖的微生物形成的氧化还原物质就是杂质。
罐头:调味料可能具有氧化还原能力。
Q4: 如果样本有杂质,检测值是偏高还是偏低?
A4: 如果还原物质多的话,检测值会偏高,如果氧化物质多的话,检测值会偏低。因此检测值是偏高还是偏低,
是根据两种物质的比例来决定的。氧化还原物质是抗氧化物质(维生素和细胞色素等)或者是氧化物质,在
食品中以多种类的方式存在,因此无法确认是哪个种类物质造成的影响。
Q5: 如何知道样本中是否含有杂质?
A5: 对新的食品进行组胺检测时,可以在样本添加定量的组胺,然后进行检测(添加回收实验)。由此可以知道
是否有杂质的影响,以及是否需要进行前处理。
Q6: 是否有排除杂质影响的方法?
A6: 鱼肉、金枪鱼罐头、鱼酱油等食品,只要按照说明书操作(一般的操作的提取、检测),是可以除去杂质的
影响。
但是,如果使用一般方法,也不能排除杂质影响的话,可以通过稀释样品或固相萃取柱将氧化还原物质进行
前处理。(详情请咨询上海金畔生物科技有限公司)
◆关于检测值有误的问题
Q1: 标准溶液的数值偏低。
A1: 如果使用了溶解后再保存的酶溶液,因为在保存情况下酶活性降低,标准值可能也会降低。但只要达到正常
数值(0.85)的80%以上,检测就没有问题。
注意:使用光路为1 cm的光度计的时候,检测值达到一半以上即可(0.5左右)。(详情请阅读说明书:第
二页右方检测5)
Q2: 样本的组胺量比实际要低。
A2: ・样本的均化没有很好地进行。
(如果样本的均化没有很好地进行,将无法完全地提取组胺)
・样本中含有杂质(参考Q.如果样本有杂质,检测值是偏高还是偏低?)
Q3: 样本的组胺浓度超出检测界限。
A3: 稀释组胺提取液后,再次检测。计算出组胺浓度时,注意要考虑稀释倍数,再进行计算。
Q4: 计算样本的组胺量后,得到负数。
A4: 该样本的组胺量,在检测范围的10 ppm以下。(使用推荐的仪器分光光度计B的情况下)
得到负数的原因:
・样本中不存在组胺。
・组胺浓度在检测范围以下时,因有检测误差,计算样本检测值和样本空白值的差值,得到负数。
推荐仪器(分光光度计B)的检测范围的下限是10 ppm。因此,得到负数是因为,样本的组胺浓度会出现
10 ppm以下。
Q5: 检测完的反应液在放置一阵之后,再次检测后发现,检测值变高。那么,哪个数值才是正确?
A5: 反应结束后的检测值是正确的。
试剂盒的显色试剂,是通过阳光来显色的。如果把反应液放置在有阳光照射的地方,检测值会变高。因此,
反应结束后,请迅速进行检测。
Q6: 活的红身鱼在常温下放置了几天。检测后发现,鱼中并不含有组胺。
A6: 红身鱼(金枪鱼,秋刀鱼,鲣鱼,竹荚鱼,青花鱼等)等含有大量的组氨酸的食物,若被组胺菌污染的话,
会产生组胺。因此,还未被组胺菌污染的红身鱼即使腐烂了,也不会被检出组胺。