逆转录(也成为反转录病毒,Retrovirus)病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒载体在构建时,删去了pol、env基因和gag基因的3′端,但保留了病毒颗粒所需的ψ+序列。其目的是在于提高载体的安全性,防止反转录病毒进入宿主细胞后进行增殖并包装成病毒颗粒对宿主细胞造成可能的伤害。这样,反转录病毒载体就可利
Vector Names | Catalog Number |
pBABEhygro | RTV-001-HYGRO |
pBABEneo | RTV-001-NEO |
pBABEpuro | RTV-001-PURO |
pMCs-IRES-GFP | RTV-040 |
pMCs-Puro | RTV-041 |
pMXs | RTV-010 |
pMXs-IRES-Blasticidin | RTV-016 |
pMXs-IRES-GFP | RTV-013 |
pMXs-IRES-Neo | RTV-015 |
pMXs-IRES-Puro | RTV-014 |
pMXs-Neo | RTV-011 |
pMXs-Puro | RTV-012 |
pMYs | RTV-020 |
pMYs-IRES-GFP | RTV-021 |
pMYs-IRES-Neo | RTV-023 |
pMYs-IRES-Puro | RTV-022 |
pMYs-Puro | RTV-024 |
pMZs | RTV-030 |
用这些外壳蛋白包装成病毒颗粒在辅助细胞系内大量扩增。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的转染率感染宿主细胞,特别是分裂中的细胞。转入宿主的细胞后,反转录病毒载体随机整合到宿主细胞基因组内,这种载体还在不断改进之中。
逆转录表达载体种类较多,根据其基本载体骨架分为pBABE、pMCs、pMXs、pMYx等,又有不同筛选标记,hygro(潮霉素)、neo(新霉素)、puro(嘌呤霉素)、Blasticidin(杀稻瘟素)等。很多逆转录病毒载体包括pBABE和pMXs都是基于莫洛尼鼠白血病病毒 (MMLV),这种逆转录病毒载体在一些非成熟细胞里面被沉默表达,如胚胎瘤细胞、胚胎干细胞和造血干细胞,因此适应面受到限制。而骨髓瘤病毒(MPSV)和PCC4细胞来源的骨髓瘤病毒(PCMV)是MMLV的变种,能很好的在上述非成熟细胞内稳定表达。
Cell Biolabs的pMCs 、pMYs和pMZs都在MMLV启动子的基础上又加上了PCMV或MPSV启动子,后者能使逆转录病毒在EC肿瘤干细胞和ES胚胎干细胞内更稳定表达。特别的,pMYs系统更适合于造血干细胞中的外源基因表达,pMC则更适合在EC和ES细胞内使用。
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