细胞重编程——2.概述


细胞重编程——2.概述



重编程工业

      ——来自Stemgent的解决方案


自从Dr. Shinya Yamanaka描述了体细胞重编程为多能性干细胞后,诱导性多能干细胞(iPS) 成为再生医疗,疾病模型,药物发现和细胞繁育基础研究的无价工具。

从传统的重编程方法(慢病毒,腺病毒)到非整合方式,非病毒方法(mRNA,蛋白),Stemgent为您提供重编程所需要的高质量产品,知识和经验。

选择重编程系统

Stemgent 提供一整套的细胞重编程系统。


非整合方式技术

高效,非病毒,操作简单。没有安全顾虑和与病毒相关的生物污染问题。


更快的重编程

可在16天内产生不含病毒的iPS细胞。节省了从接种细胞到筛选转染后细胞的时间。


◆重编程系统的比较

选择适合您的系统


mRNA

蛋白

腺病毒

逆转录病毒

慢病毒

产品描述

用于制备不含病毒的iPS细胞迅速、安全的非整合技术。

非整合方式,不非病毒方式。效率低。

瞬时病毒转绕方法。DNA转基因不需要整合后表达。

利用逆转录酶在宿主细胞内复制RNA产生RNA基因组的DNA。低效率。

使用病毒细胞制备iPS细胞。普遍使用的技术

重编程效率

>1%

0.00001%

0.0001 – 0.001%

0.001 – 0.01%

0.001 – 0.01%

不含病毒

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筛选

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不需要基因组整合

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制备iPS细胞的时间

>3周

~9 周

验证

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临床相关

细胞重编程——2.概述

生物安全要求Bio-safety requirements

BL2

BL2

BL2/BL2+

推荐使用

预期可用于临床,可扩展性,对照蛋白表达

研究重编程机理

可用于瞬时病毒系统

重编程机理研究

与其他重编程系统相比,Stemgent mRNA重编程系统的优势

细胞重编程——2.概述

与其他方法相比,mRNA的效率高于 1% ,重编程效率从0.00001-0.01%。mRNA重编程不需要使用多个步骤,包括细胞传代,筛选病毒,或者传代细胞的基因组整合情况等。



◆实验时间轴比较


使用mRNA重编程系统最快16天内制备克隆

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细胞重编程——指南目录

 

1.    什么是细胞重编程

2.    细胞重编程概述

3.    mRNA重编程

4.    病毒重编程

5.    产品列表 


水分测试方法概述


水分测试方法概述

水分测试方法概述

Q1:现有哪些水分测定方法?这些方法与卡尔费休滴定法有什么区别?


  除了多种现有的水分测定法,现在又出现了以新原理为依据的新方法。主要的水分测定方法如下表。其中,卡尔费休滴定法的定量范围和应用范围广泛,能测定绝对值,是一种有用的方法,关于它的进一步研究仍在继续。


测定方法

定量范围

对象

干扰成分

卡尔费休滴定法

数ppm~100%

固、液、气

氧化、还原性物质

干燥法

0.01%~

挥发性物质、不稳定物质

共沸蒸馏法

0.05%~

具有挥发性的水和混溶性物质

比色法

0.1~数%

固、液

着色物质

近红外光谱法

0.01~数%

固、液、气

酒精、胺等

气相色谱法

ppm~数%

液、气

具有相同保持时间的物质

露点法

ppm~数%

比水蒸气先结露的物质

电解法

1~1000ppm

ROH、RCHO、NH3、HF

电容电阻法

0.3~数%

液、气

导电性物质

介电常数法

1~数%

液、气

介电常数较大的物质

中子散射法

数%

含氢物质

晶体振荡法

1~1000ppm

与感应膜的反应性物质

Q2:请简要概括用卡尔费休试剂测定水分的方法。

1. 方法

  使用卡尔费休试剂进行水分测定的方法即卡尔费休滴定法分为以下两种。

(1)容量滴定法

(2)库仑滴定法


  充分理解两者的特点后再选择需要的滴定方法和试剂进行测定。下表比较了两种方法的特点,请参考。


项目

容量滴定法

库仑滴定法

原理

根据卡尔费休试剂的滴定量计算出水分的体积。

电解氧化反应产生的碘与水和KF试剂反应,碘的产生与电量成正比,因此能够从电解氧化所需的电量中求得含水量。

滴定试剂

滴定剂和脱水溶剂

阳极液和阴极液

特点

1.由于使用了卡尔费休试剂作为滴定剂,因此需要预先求出卡尔费休试剂的浓度(滴定率)。
2.测定范围广(低水分~高水分)。但不适用于微量水的测定。
3.多种脱水溶剂可供选择,试剂的应用范围广泛。

1.测定的是电流与时间。滴定剂转换成电子,无需添加标准溶液。它是一种以法拉第定律为基础的绝对定量法。
2.是一种良好的微量水分测定法。可以测定出相当小数值的电量,所以能测定以μg为单位的水分含量。
3.能用同一种阳极液进行多次测定。

. 滴定仪器

  卡尔费休滴定会在判断终点时使用电检法,因此必须使用以下专用滴定仪器来进行。

容量滴定法——容量法自动水分滴定仪

库仑滴定法——库伦法自动水分滴定仪

  目前,市面上销售的简便自动水分滴定仪操作简单。

  卡尔费休滴定会受到大气中水分的影响,因此必须使用气密性良好的滴定槽。

 


◆警告

其1

  卡尔费休滴定与普通的容量分析相同,将卡尔费休试剂加入滴定管中,样品加入锥形瓶或烧杯中,不能在通风的环境中进行滴定,因为卡尔费休试剂会迅速与大气中的水分反应,导致无法到达滴定终点。


其2

  现在已不通过目测来判定卡尔费休滴定终点的变色。所以检测微量的过量碘必须采用电终点检测法。

 


◆帮助

"如何进行电终点检测方法?"

  目前,市面上销售的滴定仪器采用容量法、库仑法,同时配合使用电流控制电压检测法(定电流分极电压检测法)。此方法通过向双铂金电极输入1~30μA的恒定电流,测定两极之间产生的电压(极化电压),最后检测终点。滴定溶液所含水分较多时,电压(极化电压)为300~500mV。这个电压会根据所用溶剂的种类或样品的不同而有所变化。一般来说,像碳化氢一类的电导率较低的物质会显示高电压。

  卡尔费休滴定一旦接近终点,电压就会急剧下降至10~50 mV。容量滴定法的话,当该电压保持一段时间时,可判断其到达滴定终点。市面上销售的滴定仪器的保持时间为30~60秒。库伦滴定法的话,先设定终点的电压,低于该电压时,可判断其为滴定终点。



更多相关产品信息,请点击:卡尔费休试剂-库伦法/容量法试剂