亲和标签抗体系列的试用装活动来啦!!【本活动已结束】
【本活动已结束】
◆DYK标签:DYKDDDDK
DYK标签是识别DYKDDDDK肽链的单抗。可用于检测大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞中表达的DYKDDDDK标签融合蛋白。
将表达3×DYKDDDDK标签融合蛋白A的质粒转染至HEK293细胞中,经过24 h培养后,随机选取其中的克隆细胞。将选取的克隆细胞用RIPA缓冲液进行裂,对所得的细胞溶解液用Western blotting检测。
分别用Wako(克隆号 1E6)(产品编号:018-22381)抗体和A公司抗体进行Western Blot检测。
与A公司抗体相比,Wako(克隆号 1E6)抗体识别DYKDDDDK的特异性更高。
A公司产品和Wako产品在Western blotting检测中的灵敏度比较
Lane 1:293T细胞溶解液
Lane 2:瞬时表达蛋白A-DYKDDDDK的293T细胞溶解液
Lane 3:瞬时表达蛋白B-DYKDDDDK的293T細胞溶解液
封闭:含5% 脱脂奶的TBS-T、4℃,过夜
抗体反应:2 h、室温
发光剂:ImmunoStar® LD
检测:LAS-3000、曝光时间15 min
Wako 1E6-HRP比A公司产品有更高的灵敏度!!
◆PA标签系统 标签序列【GVAMPGAEDDVV】
● 超高亲和性抗体,实现高回收率、高纯度纯化
● 通过树脂再生,降低运行成本
● 在动物细胞表达系(HEK293T细胞、CHO细胞等)中,有效纯化蛋白
● PA标签系统是使用可识别肽标签(12个氨基酸残基)的单抗(NZ-1)。Wako开发了对应的亲和性纯化标签系统。
● NZ-1单抗对PA tag具有高亲和性和特异性,可应用于Western blotting、细胞流式分析、免疫组化(ICC)。
通过免疫沉淀,可纯化PA标签融合蛋白以及树脂再生。
● PA标签系统,可一步纯化高纯度PA标签融合蛋白。
使用案例:Western blotting
Lane 1
一抗:抗IDH1抗体(RcMab-1), 1 μg/mL
二抗:抗大鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释
Lane 2
一抗:抗PA tag抗体, 1 μg/mL
二抗:抗大鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释
Lane 3
一抗:抗DYKDDDDK标签抗体, 3.5 μg/mL
二抗:抗小鼠IgG-HRP标签, 1000倍稀释
上样量:各10 μg
曝光时间:10 min
◆6×His标签:HHHHHH (6×His)
可用于检测His(6×His)标签融合蛋白。克隆号不同,识别端的特异性、应用也有所不同。
克隆号
|
识别端
|
Western blotting
|
Immunoprecipitation
|
ELISA
|
产品编号
|
N端
|
C端
|
N端
|
C端
|
9F2
|
C端
|
ND
|
+++++
|
ND
|
++
|
–
|
010-21861
|
21-48
|
N端及C端
|
+++
|
++++
|
+++
|
+++
|
○
|
017-23211
|
28-75
|
N端及C端
|
++
|
++
|
+++++
|
+++++
|
○
|
014-23221
|
B公司产品和Wako产品各克隆号的Western blotting检测功能比较
N端His:HEK293T表达的6×His-Protein Z, 1×105 cells
C端His:Protein P-6×His+CHO细胞溶解液, 1×105 cells
一抗:1 μg/mL
二抗:抗小鼠IgG抗体, 5000倍稀释液
可确认其具有比B公司产品同等甚至更高的灵敏度。
GFP tag: Green Fluorescent Protein (GFP)
可识别Green Fluorescent Protein(GFP)的抗体。GFP是可实时检测目标蛋白局部或细胞、细胞器中的标签蛋白,可应用于各个研究领域。
c-Myc标签:EQKLISEEDL
可识别人c-Myc 来源(410-419aa)多肽EQKLISEEDL单抗。
抗c-Myc, 单抗(017-21871)
抗体浓度:0.25 μg/mL
抗原量:对10 ng c-Myc标签重组蛋白进行电泳操作。
用10000倍稀释的抗小鼠IgG-HRP抗体进行检测。
GST标签:Glutathione-S-transferase
可识别Glutathione S-transferase(GST)单抗。
亲和性标签抗体结合琼脂糖珠
<使用载体量>
抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠(Wako): 20 μL/assay
A社 Affinity Beads: 20 μL/assay
<抗原添加量>
含DYKDDDDK标签融合蛋白的大肠杆菌细胞裂解液20 mg/assay
<免疫沉淀条件>
4℃、3 h
<洗脱方法>
150 ug/mL DYKDDDDK肽 (产品编号:044-30951) 20 μL/assay
→ 4℃、孵化30 min
添加20 μL/assay 的2% SDS sample buffer → 煮沸5 min。
<SDS-PAGE>
样品电泳量:10 μL
<检测方法>
银染法
配制可过量表达DYKDDDDK标签融合蛋白(约19 kDa)的大肠杆菌裂解液,分别用本产品和A公司产品免疫沉淀后,用DYKDDDDK肽进行抗原洗脱。将得到的抗原样品用SDS-PAGE分离、银染色后,比较抗原回收率。
可确认比A公司产品具有同等甚至以上的抗原回收性能!!
◆产品列表
产品编号
|
产品名称
|
应用
|
子类 克隆号
|
包装 (试用)
|
高特异单抗
|
010-21861
|
Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9F2) 6×His单抗(9F2)
|
WB
|
小鼠IgG1 9F2
|
20 μg
|
014-23221
|
Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(28-75) 6×His单抗(28-75)
|
WB,IP
|
小鼠IgG3・κ 28-75
|
20 μL
|
017-23211
|
Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(21-48) 6×His单抗(21-48)
|
WB、IP、ELISA
|
小鼠IgG1・κ 21-48
|
20 μg
|
018-22381
|
Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal AntibodyD YKDDDK标签单抗
|
WB、IP、FCM、ChIP
|
小鼠IgG2b 1E6
|
20 μg
|
017-21871
|
ANTI c-Myc, Monoclonal Antibodyc-Myc单克隆抗体
|
WB、IP
|
小鼠IgG1 9E10
|
20 μg
|
012-20461
|
Anti Green Fluorescent Protein, Monoclonal Antibody (Anti GFP, MoAb) 绿色荧光蛋白单克隆抗体
|
IHC
|
小鼠IgG2・κ mFX73
|
20 μL
|
HRP标记单抗
|
014-21901
|
Anti c-Myc, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated 过氧化物酶标记的c-Myc单抗
|
WB
|
小鼠IgG1 9E10
|
10 μL
|
015-22391
|
Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated 过氧化物酶标记的DYKDDDK标签单抗
|
WB
|
小鼠IgG2b 1E6
|
10 μL
|
010-23181
|
Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9C11), Peroxidase Conjugated 抗6×His,单克隆抗体(9C11),过氧化物酶偶联
|
WB
|
小鼠IgG1 9C11
|
10 μL
|
011-21891
|
Anti Glutathione S-transferase, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated 抗谷胱甘肽S-转移酶,单克隆抗体,过氧化物酶偶联
|
WB
|
小鼠IgG2b 5A7
|
20 μL
|
015-25951
|
Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated 抗 PA 标签, 大鼠 单克隆 抗体, 过氧化物酶标记
|
WB
|
大鼠IgG2a NZ-1
|
20 μL
|
抗体结合琼脂糖珠
|
012-22781
|
Anti DYKDDDDK tag Antibody Beads 抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠
|
IP
|
小鼠IgG2b 1E6
|
200 μL
|
019-23391
|
Anti 6×Histidine Antibody Beads 抗6×His抗体琼脂糖珠
|
IP
|
小鼠IgG3・κ 28-75
|
400 μL
|
014-23081
|
Anti HA Antibody Beads 抗HA抗体琼脂糖珠
|
IP
|
小鼠IgG1 4B2
|
200 μg
|
感兴趣的老师同学们请联系在线客服索要申请表连接~