巨噬细胞/小胶质细胞特异性蛋白抗体Iba1的应用
免疫细胞化学⇒和光 Cat. No. 019-19741 (50μg (100μL))
免疫印迹⇒和光 Cat. No. 016-20001 (50μg (100μL))
众所周知，钙离子是中枢神经系统细胞信号传递的重要介质。钙离子通过与各种钙结合蛋白关联激活信号，其中大多数蛋白属于EF手性蛋白家族。
Iba1属于17-kDa EF蛋白，在巨噬细胞和小胶质细胞中特异性表达，起到正向调节的作用。
和光提供的兔多抗可识别Iba1羧基末端序列的合成肽，这段Iba1蛋白序列在人、大鼠和小鼠中均存在。这些抗体可特异性的识别小胶质细胞和巨噬细胞，适用于脑组织的双重免疫染色，以及细胞培养中与GFAP单抗联合使用（GFAP单抗可特异性的识别星形胶质细胞）。
特征：特异性识别人、大鼠、小鼠的小胶质细胞及巨噬细胞，无法作用于神经元和星形胶质细胞。
大鼠原代的细胞培养的双重免疫染色和同一位置的对比图像
绿色：Iba1，小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体作用 (Wako Cat. #019-19741)
红色：星形胶质细胞，与GFAP单抗作用
（此数据由 日本神经系统科学国家研究所神经化学部提供）
Iba1抗体用于免疫细胞化学(Wako Cat. #019-19741) 石蜡切片应用
1）去石蜡；
| 100%二甲苯 | 10分钟 | 2次 |
| 100%乙醇 | 5分钟 | 2次 |
| 80%乙醇 | 5分钟 | |
| 70%乙醇 | 5分钟 | |
| 蒸馏水 | 5分钟 | 2次 |
2）用0.01M缓冲液冲洗两次；
3）在含0.3%过氧化氢的甲醇里孵育30分钟；
4）用0.01M缓冲液冲洗三次；
5）在室温下，放进含有1.5%山羊血清和1%牛血清蛋白的0.001MPBS的封闭液里孵育2小时；
6）在4度下，与 Anti Iba1 Antibody (0.5 μg/mL)(Wako Catalog No. 019‐19741)在封闭液中孵育过夜；
7）用0.01M PBS冲洗3次；
8）在室温下，与生物素标记的anti‐Rabbit IgG Antibody (1:200)在封闭液中孵育1小时；
9）用0.01M PBS冲洗3次；
10）在室温下，与ABC试剂（试剂A（1：50）和试剂B(1:50)与0.01MPBS混匀）孵育1小时；
11）用0.01MPBS冲洗3次；
12）在过氧化物酶溶液（含0.01%过氧化氢，0.05%DAB的0.05MTris缓冲液）中孵育；
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