半微量柱规格对柱效的影响

和光纯药工业 大阪研究所 上森仁志

◆概要

       近年来随着分析样品的微量化和分析高灵敏度化，越来越多的人开始关注内径2mm的半微量色谱柱。主要是由于半微量柱能够节约LC/MS分析时的移动相溶剂，同时还能抑制溶质向柱壁扩散。但是，柱内径变小会对色谱柱造成一定的影响。首先，使用时压力会升高，加速了装置和柱的老化；其次难以把握柱子的合适的填充量，难以达到最好的柱效。为了选择适合的色谱柱规格，本文探讨了半微量色谱柱规格对性能的影响。柱体积保持不变，变化内径和长度填装了5种柱子后，分析多环芳香族化合物，探讨柱子的基本性能。结果如表1所示，理论塔板数（N/m）最高的是内径3.2~4.0mm，75~100mm的色谱柱，说明此微量色谱柱的填充效果更高。另外，此微量柱的压力是内径2.1mm的柱的1/3，也改善使用时的操作性。

◆应用

      图1为用梯度法分析PTH-氨基酸的例子，比起使用2.1mm I.D. × 225mm柱，使用3.2mm I.D. × 100mm的柱分离性能更好。

总结以上结果，使用比内径2mm的柱内径大一点，长度短一点的半微量柱，可使分析效果更佳。