（一）   定义：可与核酸亲和的荧光活体染料。荧光显微镜下核呈绿色，细胞质呈黄色。

（二）   检测激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm。

（三）   作用以及作用机理：a. 区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞

作用机理：它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光，与DNA结合发绿色荧光，与RNA结合发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。因此，在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染，因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞.

b 用作移码突变的诱变剂

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定PC12细胞凋亡

（1）细胞爬片：在6孔培养板中预先置入玻璃盖玻片，接种细胞悬液，置干后，予95%乙醇固定15分钟，微干，然后准备荧光染色。将吖啶橙5ul（100mg/L）和EB 5μl (100mg/L)，在照相前混匀后加入，轻轻吹打，30秒后用激光共聚焦显微镜观察照相。计取5个视野，共100个细胞中凋亡细胞百分数。

（2）如制成细胞悬液：取100μl PBS稀释的细胞悬液，加2μl的染色液，其中AO/EB，各含100μg/ml，加入染料30秒后观察摄像。

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