细胞及组织冻存策略
在-80℃或-196℃冷冻保存,是细胞长期保存的唯一方法,有利于减少污染,减少因传代次数太多而引起的遗传变异和形态改变,以及避免有限细胞系出现衰老或恶性转化。细胞冻存为细胞培养工作带来很大的机动灵活性,降低了人力和物力的消耗。
细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,以最大限度的保存细胞活力。在过去的几十年中,科研工作者将培养基、血清和DMSO按照一定的比例配制成冻存液,并配合手工使细胞从4℃,-20℃,-80℃到液氮中逐步转移使其达到“慢冻”的效果。但这种自制的冻存液储存时间一般比较短,不能满足时间跨度大的实验项目的需求。且这样人力和时间成本大,人手操作的误差和血清制品的批间差也给实验结果带来了不稳定性。由此商品化的无血清即用型冻存液应运而生。初期的无血清细胞冻存液诞生在日本。
◆不需要程序降温的无血清细胞冻存液
在细胞冻存过程中会形成冰晶,导致水分子和溶质浓度不均匀,对细胞形成损伤。使用含DMSO的细胞冻存液,可使细胞受到的伤害减小。日本原装进口含DMSO的无血清细胞冻存液,均无不明动物源成分,高质量标准为实验效果带来保证。使用无血清细胞冻存液,不需要进行程序降温,细胞可以长期存放在-80℃或液氮。
品牌 |
货号 |
名称 |
规格 |
特点 |
应用 |
Wako
(日本)
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306-95921 |
BAMBANKER® Direct BAMBANKER直接冻存液 |
20 mL |
冻存前不需去除培养基,无需程序降温 |
干细胞(ES, MSCs, iPS)、免疫细胞、原代细胞、工具细胞等 |
306-14684 |
BAMBANKER™ BAMBANKER冻存液(Hot) |
20 mL×5 |
文献众多,验证过的细胞类型多,无需程序降温 |
302-14681 |
120 mL |
195-16031 |
StemSure® Freezing Medium StemSure干细胞冻存液 |
100 mL |
经过干细胞性能多重验证,无需程序降温 |
ES与iPS细胞 |
039-23511 |
CultureSure Freezing Medium CultureSure通用动物细胞冻存液(推荐) |
100 mL |
性价比首选!动物细胞通用,无需程序降温 |
通用动物细胞 |
Cosmo Bio
(日本)
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KOJ-COS-CFM01 |
COS banker[Cell Freezing Medium] (chemical difined)
COS banker细胞冻存液
(化学成分明确)
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120 mL |
化学成分限定 |
iPS、杂交瘤、工具细胞等 |
KOJ- COS-CFM02 |
COS banker II
COS banker II [细胞冻存液]
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120 mL |
无异源动物源成分 |
外周血活化淋巴细胞等 |
◆不含DMSO的玻璃化冻存液
有部分细胞不适用于DMSO冻存,或者根据实验需要需要避免引入DMSO。针对这部分细胞,我们提供玻璃化冻存策略。玻璃化冻存,是以玻璃化冻存液对细胞进行高浓度玻璃化保护及处理后,快速投入液氮保存,使保护剂和细胞内水分来不及形成冰,或冰晶没有充分的时间进行生长,从而进入一种人工的完全玻璃化的状态。在玻璃化状态下,水分子没有进行重排,不产生结构和体积的变化,因而不会由于机械损伤或溶液效应对组织和细胞造成伤害,保证解冻后细胞仍有活力。日本原装进口无DMSO、无血清的细胞玻璃化冻存液,是玻璃化冻存试剂的首选。
品牌 |
货号 |
名称 |
规格 |
特点 |
应用 |
ReproCell
(日本)
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RCHEFM001 |
Freezing medium for human ES/iPS cells 灵长类ES/iPS胞冻存液 |
25 mL |
玻璃化冻存 |
人ES/iPS细胞 |
Funakoshi
(日本)
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CPL-A1 |
CryoScarless DMSO-Free 灵长类ES/iPS玻璃化细胞冻存液(推荐) |
100 mL |
玻璃化冻存,无DMSO |
间充质干细胞及各种细胞 |
VPL-A1 |
Stem Cell Keep 玻璃化细胞冻存液 |
20 mL |
玻璃化冻存,无DMSO,无蛋白成分 |
ES/iPS细胞 |
◆组织冻存
随着移植医学研究的发展,出现了对组织的冷冻保存技术的实验需求。其中如皮肤等活组织薄而脆弱,需要有特定保护剂保护组织免受损伤。Funakoshi的ThelioKeep保存液,可维持上皮等组织的活性及生长的机能。
品牌 |
货号 |
名称 |
规格 |
保存条件 |
适用组织 |
Funakoshi
(日本)
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TPO-A1 |
ThelioKeep 无血清无DMSO组织保存液 |
100 mL |
4℃下保存1-2周 |
上皮,内皮组织,能恢复机能 |
神经研究中常用到小鼠、大鼠胚胎来源的原代神经细胞。在某些特定实验中,需要收集一定量的标本才进行下游实验,此时需要将有实验价值的实验动物脑组织进行冻存。
品牌 |
货号 |
名称 |
规格 |
保存条件 |
适用组织 |
Wako
(日本)
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029-19161 |
Brain Tissue Freezing Medium 脑组织冻存液 |
1 mL×10 |
液氮 |
大鼠、小鼠胚胎的脑组织,复苏后可进行原代培养 |
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