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品牌：IMD
CAS No.： 储存条件：-15℃以下 纯度：≥90% by SDS-PAGE |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
IMD-RKEX-C010 |
– | 10 ug | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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品牌：IMD
CAS No.： 储存条件：2～8℃ 纯度：≥90% by SDS-PAGE |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
IMD-RKEX-M010 |
– | 10.0 mg/支 | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
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品牌：IMD
CAS No.： 储存条件：-15℃以下 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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IMD-IRLYSC-L001 |
– | 1.0 ml | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
测序级重组赖氨酰内肽酶/胰蛋白酶预混装
测序级重组赖氨酰内肽酶/胰蛋白酶预混装
◆概述
本品选用A. Lyticus 来源氨基酸序列，利用独特大肠杆菌重组表达技术制备的Lys-C，能够特异性识别并酶切肽链中Lys羧基端肽键；其与重组表达并经甲基化修饰的测序级胰蛋白酶，经研究和方法验证，按照特定比例混合后，能够在一次酶切或分步酶切中，保证特异性的前提下，酶切效率更高，便于进行序列分析。
◆优势
1）采用甲基化修饰重组表达胰蛋白酶，其赖氨酸残基经甲基化修饰有效防止酶切缓冲中胰酶自切或被Lys-C降解造成胰酶活性的降低。
2）独有的Lys-C重组表达制备技术，保证高纯度与高酶活性的同时，无任何杂酶活性，确保酶切反应的特异性。
◆纯度·来源
选用A. Lyticus 来源氨基酸序列，利用独特大肠杆菌重组表达技术制备的Lys-C
选用猪的胰腺来源阳离子型胰蛋白酶基因，利用毕赤酵母菌株重组表达技术制备的胰蛋白酶
◆使用方法
溶解缓冲：用无菌水或者50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5；溶解后分装，-15℃以下保存。
酶切缓冲：50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5
推荐条件：蛋白酶:融合蛋白质量比1:25~1:100（蛋白组学或肽图）37℃反应。
针对疏水性强、溶解性较差的蛋白，可添加变性剂或者封闭二硫键（烷基化）使其空间结构被打开，从而提高酶切效率或者提高肽图覆盖率。
可以参考以下方法：
两步溶出法消化：可以添加终浓度为5 mmol/L的DTT 在室温反应30 min ； 再加入终浓度为10 mmol/L 的碘乙酰胺，在室温避光反应30 min。蛋白溶液中补入终浓度6~8 mol/L 尿素，胰蛋白酶/Lys-C 与蛋白质或蛋白质混合物以1：25 的蛋白质∶蛋白酶比(w/w)混合并在37℃下孵育3~4 h，用酶切缓冲稀释尿酸降至1 mol/L 以下，在37℃反应过夜。
终止反应：加入终浓度0.5-1%三氟乙酸，14000-16000×g，离心10 min 去除沉淀颗粒。
◆保存条件
储存稳定性：冻干粉存于-15℃以下，24 个月稳定；50 mmol/L Tris-HCl pH 8.0~8.5 溶解后储存于-15℃以下，反复冻融5次，无活性损失。
运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定。
◆应用实例
Lys-C/Trypsin Mix 与Trypsin 特异性酶切抗体对比图
蛋白酶：单抗质量比1:25，37℃酶切反应过夜。
(更多范畴应用实例，请与我们联系)
◆产品列表
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
|
RME0101 |
RLys-C/MTP Mix |
20 μg/支 |
|
RME0102 |
20 μg/支，5 支 |
◆相关产品
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
|
RLYS-C0401 |
RLys-C |
20 μg |
|
RLYS-C0403 |
1 mg |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
重组双碱性氨基酸内肽酶（RKex2）
重组双碱性氨基酸内肽酶（RKex2）
◆概述
Kex-2（E.C.3.4.21.61）属于枯草杆菌蛋白酶家族，为酵母自身编码的一种前体加工酶，Ca2+ 依赖型丝氨酸蛋白酶，能够专一性地识别和切割Lys-Arg，Arg-Arg，Pro-Arg等双碱性氨基酸※ 的羧基端肽键。不同于Trypsin，该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸（Arg或Lys）的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点，便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH为9.0，在偏酸性环境中稳定，稳定pH为5.0-6.0。最适温度为37 ℃，酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂（如PMSF、TPCK等）抑制。
※碱性氨基酸：水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸，其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团。包括以下三种：
|
中文名 |
英文名 |
缩写 |
符号 |
等电点 |
|
精氨酸 |
Arginine |
Arg |
R |
10.76 |
|
赖氨酸 |
Lysine |
Lys |
K |
9.74 |
|
组氨酸 |
Histidine |
His |
H |
7.59 |
◆优势
● 单批次产量大，批间差小
● 高纯度，高比活性
● 无外源性病毒污染，无动物源生产原料
◆纯度
SDS-PAGE显示纯度>90%。
◆使用方法
溶解缓冲：20 mmol/L NaAc-HAc，2 mmol/L Ca2+，pH 5.0~5.5。
酶切体系：50~100 mmol/L Tris，2 mmol/L Ca2+，pH 7.0~9.0；或HEPES，5 mmol/L Ca2+，pH 7.0~9.0；
推荐使用量：蛋白酶：融合蛋白质量比1：20~1：1000
◆保存条件
储存稳定性：冻干粉存于-15 ℃以下，24个月稳定；20 mmol/L NaAc-HAc，2 mmol/L Ca2+，
储存稳定性：pH 5.0~5.5溶解后分装储存于-15 ℃以下，避免反复冻融；溶解后2~8 ℃保存建议不超过24 h。
运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定。
◆应用实例
RKex-2特异性酶切合成短肽
合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR及LWK，蛋白酶：合成多肽质量比1：1000，37 ℃酶切反应10 min，LC-MS验证酶切反应特异性。
|
Peak# |
R.T. |
M.W. |
Sequence |
|
Peak 1 |
2.79 min |
522.6 |
YGKR |
|
Peak 2 |
6.26 min |
445.56 |
LWK |
|
Peak 3 |
6.94 min |
950.15 |
YGKRLWK |
◆产品信息
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
比活 |
|
RKex20202 |
RKex2 |
10 mg |
10 U/mg |
|
RKex20204 |
RKex2 |
10 μg |
10 U/mg |
◆相关产品
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
储存温度 |
检测范围 |
|
MDRK0201 |
RKex2 ELISA Kit |
96 孔 |
2～8 ℃ |
1.0～4000 ng/mL |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
重组赖氨酰内肽酶RLys-C
重组赖氨酰内肽酶RLys-C
◆概述
赖氨酰内肽酶最早从土壤细菌无色杆菌Achromobacter lyticus中分离得到，能够特异性识别与切割肽链中Lys羧基端肽键，常被用于蛋白测序及Lys-X化合物的酶催化合成。
艾美迪选用Achromobacter lyticus来源的，克服大肠杆菌重组表达技术难题进行制备。本品最适pH 9.0~9.5,等电点为pH 6.9~7.0；最适反应温度30~37℃，50℃以上稳定性下降。在适宜温度下，该酶稳定性良好，在4 mol/L尿素或0.2%SDS溶液中30℃孵育6 hr后，生物活性未发生降低。可广泛用于蛋白组学分析，蛋白、抗体类药物质量检测，多肽、蛋白类产品制备工艺中。
◆特性
● 高比活性，高特异性，可消化难以酶切的位点，空间构象复杂或疏水性较强的蛋白（如膜蛋白）同样适用
● 活性稳定，对尿素、乙腈等变性剂耐受能力强
● 批量化生产，连续批次质量稳定，批间差小
● 高纯度，重组表达避免了可能存在的杂酶残留（e.g. Arg-C，Lys-N等）
◆来源
重组 E. coli 菌株，其克隆有来自的无色杆菌（A. lyticus）的蛋白酶I基因。
◆酶活定义
在0.2 mol/L pH 9.0的Tris-HCl缓冲中，温度为37±2℃的条件下， 1 min催化底物AC-Lys-PNA生成1 μmol PNA所需的酶量为一个活性单位（AU）。
◆纯度
将 rLys-C以DTT 还原处理后， 还原电泳显示纯度＞99%
◆使用方法
本品为冻干粉，使用前先使用超纯水或25 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5溶解。
◆应用实例
RLys-C酶切重组人门冬胰岛素原（Pro-Insulin-Aspart）
底物Pro-Insulin-Aspart分子量约为7 kDa，含有3个赖氨酸（K），采用 Lys-C 酶切的理论肽段示意图如下：
酶切条件：酶与底物的质量比为 1：10000，在50 mM Tris-HCl，pH 8.5中37℃酶切16 小时。
峰 A：酶切前肽段 Pro-Insulin-Aspart
峰 B：酶切后 B链+C肽+A链（去引导肽）
峰 C：酶切后B链+A链（去引导肽和C肽）
|
名称 |
RT |
Area |
Area% |
质谱量 |
酶切位点 |
对应肽段 |
|
Pro-Insulin-Aspart |
10.45 |
155.045 |
100% |
7096.94 |
/ |
酶切前 |
|
以IMD-RLys-C-酶切产物 |
11.57 |
201.6 |
100% |
5724.54 |
① ② ③ |
B链+A链 |
|
以其他公司重组Lys-C酶产物 |
10.49 |
146.9 |
61.78% |
7096.94 |
/ |
酶切前 |
|
10.62 |
81.5 |
34.29% |
6006.84 |
① |
B链+C肽+A链 |
艾美迪的 RLys-C 酶切产物为切除引导肽和 C 肽的门冬胰岛素前体，酶切位点①②③均酶切完全。
而其他公司产品仅部分切开酶切位点①，切除效率仅为34.29%，酶切位点②③均未被酶切，未能得到序列正确的门冬胰岛素前体。
◆与其他公司产品对比
|
底物 |
酶切位点对比 |
艾美迪 |
其他公司重组Lys-C |
|
重组人门冬胰岛素原 （Pro-Insulin Aspart） 分子量约为7 kDa，含有3个K |
①PK↓ |
++ |
+ |
|
②DK↓ |
++ |
– |
|
|
③GK↓ |
++ |
– |
|
|
重组人普通胰岛素原 （Pro-Insulin） 分子量约为7 kDa，含有3个K |
①PK↓ |
++ |
+ |
|
②PK↓ |
++ |
+ |
|
|
②AK↓ |
++ |
+ |
|
|
PJ-10S小肽 |
①DK↓ |
++ |
+ |
相同底物浓度的酶切条件下艾美迪的 RLys-C 的酶切效率显著高于其他品牌同类产品。以生成的肽段 YDDDDK 计算，艾美迪的RLys-C 的酶切率比其他品牌同类产品高约9倍；以生成的肽段 RGWK 计算，艾美迪的RLys-C的酶切效率比其他品牌同类产品高约8.6倍。
◆产品信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 |
| RLYS-C0401 |
RLys-C 重组赖氨酰内肽酶 |
20 μg |
| RLYS-C0403 |
RLys-C 重组赖氨酰内肽酶 |
1 mg |
◆相关产品
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 |
| RME0101 |
Lys-C + Trypsin 重组赖氨酰内肽酶/重组胰蛋白酶混合装 |
20 μg |
| RME0102 |
Lys-C + Trypsin 重组赖氨酰内肽酶/重组胰蛋白酶混合装 |
20 μg×5 |
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 储存条件 | 其他 |
| IRLys-C0401 | immobilized RLys-C 固定化重组赖氨酰内肽酶 |
1.0 mL | -15℃以下 | 1.0 mL含1.0 mg |
| MDRK0401 | RLys-C ELISA Kit 重组赖氨酰内肽酶检测试剂盒 |
96孔 | -15℃以下 |
检测范围： 1.0～4000 ng/mL |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
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重组双碱性氨基酸内肽酶检测试剂盒
重组双碱性氨基酸内肽酶检测试剂盒
◆原理
本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术测定样品中双碱性氨基酸内肽酶的微量残留。用捕获抗体包被96孔酶标板，制成固相抗体，往酶标板中加入标准品和检测样品，与检测抗体桥联结合，再加入辣根过氧化物酶标记物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算待测样品中双碱性氨基酸内肽酶的残留量。
◆特点
● 高灵敏度，能检测低至0.98 ng/mL的双碱性氨基酸内肽酶残留
● 采用双抗体夹心法，特异性更高，能检测不同来源的双碱性氨基酸内肽酶
● 提供预包被的96孔板，检测更稳定
● 可拆卸的96孔板，操作更灵活
● 适用于重组蛋白药物残留检测
◆操作流程
◆产品信息
重组蛋白药物或融合表达工艺中，使用到了重组或天然的双碱性氨基酸内肽酶进行酶切，可以以本试剂盒进行以检测样品中微量双碱性氨基酸内肽酶残留量。
|
样品类型 |
重组蛋白药物 |
|
检测范围 |
0.98 ng/mL～4000 ng/mL |
|
检测对象 |
天然提取或重组表达的双碱性氨基酸内肽酶： imed 重组双碱性内肽酶（产品编号：RKex20202） imed 重组双碱性内肽酶（产品编号：RKex20204） |
|
特点 |
● 可进行定量检测 |
|
有效期 |
12个月 |
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
|
MDRK0201 |
RKex2 ELISA Kit 重组双碱性内肽酶检测试剂盒 |
96 wells |
◆相关产品
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
比活 |
|
RKex20202 |
RKex2 |
10 mg |
10 U/mg |
|
RKex20204 |
RKex2 |
10 μg |
10 U/mg |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
重组赖氨酰内肽酶检测试剂盒
重组赖氨酰内肽酶检测试剂盒
◆原理
本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术测定样品中赖氨酰内肽酶（Lys-C）的微量残留。用捕获抗体包被96孔酶标板，制成固相抗体，往酶标板中加入标准品和检测样品，与检测抗体桥联结合，再加入辣根过氧化物酶标记物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算待测样品中赖氨酰内肽酶的残留量。
◆特点
● 高灵敏度，能检测低至0.98 ng/mL的赖氨酰内肽酶残留
● 采用双抗体夹心法，特异性更高，能检测不同厂家无色杆菌来源的Lys-C
● 提供预包被的96孔板，检测更稳定
● 可拆卸的96孔板，操作更灵活
● 适用于重组蛋白药物残留检测
◆操作流程
◆产品信息
重组蛋白药物或融合表达工艺中，使用到了重组或提取的无色杆菌来源赖氨酰内肽酶进行酶切，可以以本试剂盒进行以检测样品中微量赖氨酰内肽酶残留量。
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样品类型 |
重组蛋白药物 |
|
检测范围 |
0.98 ng/mL～4000 ng/mL |
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检测对象 |
天然提取或重组表达的无色杆菌来源赖氨酰内肽酶： imed重组赖氨酰内肽酶（产品编号：RLys-C04） |
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特点 |
● 可进行定量检测 |
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有效期 |
12个月 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| IMD-MDRK0401 | RLys-C ELISA Kit 重组赖氨酰内肽酶检测试剂盒 |
96 wells |