在Western Blotting中使用内参其实就是在WB过程中另外用内参抗体检测内参蛋白的表达。由于内参蛋白在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。就一般的蛋白检测来说，Actin抗体、Tubulin抗体等就可以了，而针对于核蛋白的定量，特别是样本蛋白就是核蛋白时，选择恰当的核蛋白内参则更能体现内部参照的价值。

当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H)，或者核纤层蛋白(nuclear lamina protein)等为核内参抗体。除了这些，其它常见的核蛋白内参还有K70, K80, Lamin A和B，在一些文献报道中，Erk2、TATA binding protein（TBP）以及c-Jun、c-Fos等都有使用。但是需要注意的问题是核蛋白内参的选择需要考虑实际的试验环境，比如在涉及细胞增殖相关试验中，c-Jun由于自身表达变化就不适合做内参；而在凋亡实验时，TBP、Lamin等也不适合作为内参。反之，组蛋白Histone H2A.X及Histone H3.1等由于是染色体的组成型表达组分，表达比较稳定，经常被作为最广泛的核内参使用。

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内参抗体应用简介
内参即是内部参照（Internal Control），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins)，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中，通过对内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。标签抗体内参抗体现货。此外通过内参可以检测蛋白转膜是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常等。在选择内参时需要综合考虑检测物种、待检蛋白的分子量大小以及在细胞中的位置。
标签抗体应用简介
随着蛋白质组学的迅猛发展，重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个多肽融合单体也就是亲和标签可用于辅助目标蛋白的纯化，这已经被广泛使用。一般在表达重组蛋白时，构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白，进而通过特异性标签抗体对其表达检测、示踪和纯化等，以满足不同研究的需求。标签抗体内参抗体现货。常用标签主要有Myc、Flag、His、GST、HA、GFP等，在检测时选用对应的标签抗体检测即可。

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上海金畔生物科技有限公司（以下简称上海金畔生物科技有限公司）于2006年成立，由留美归国生物领域专业人士创办。上海金畔生物科技有限公司坚持自己的经营理念，勤奋踏实地整合全球高性价比的产品资源与最先进的技术资源，为高校、科研院所的科研工作者以及生物品生产企业提供先进技术转让与优化的一站式产品服务方案，帮助科研及企业单位缩短研发周期、节约科研与生产成本、提升科研水平、增强企业市场竞争力。

上海金畔生物科技有限公司主营产品线与代理品牌
1.免疫学：全球知名二抗和底物生产商KPL的中国独家代理；著名抗体生产商Proteintech，Lifespan，Abnova，Cali-Bio，MBL，SAB等近10个品牌的中国一级代理。
2.分子与细胞生物学：全球较大基因库Source Bioscience、德国著名生化试剂Panreac-AppliChem、德国核苷酸原料著名品牌Jena Bioscience、外泌体分离专家101Bio等中国独家一级代理商；氧化应激检测最专业品牌Cell Biolabs、转染试剂专家Mirus、动物免注射给药工具Alzet等中国独家或一级代理。
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4.蛋白结构学：特色蛋白结晶试剂与耗材Jena Bioscience、Hampton、Anatrace、MiTeGen中国独家一级代理商与一级代理。
5.药物筛选开发：全球领先检测集团Eurofins的药物筛选服务与产品中国一级代理。
6.生物制药：覆盖制药从上游到下游环节，全球顶级药用辅料供应商Pfanstiehl(全球10大重磅生物药中7个药物的辅料供应商)、全球最著名细胞营养添加物KERRY(全球10大重磅生物药中7个药物的原料供应商)、欧洲著名制药生化原料供应商Panreac-AppliChem、无抗生素原核表达系统Delphi以及CHO细胞系合约开发PanGen等品牌中国独家一级代理商，以及世界权威HCP/Prot A/BSA残留检测试剂盒生产商Cygnus、RepliGen等中国制药领域独家代理。
7.诊断原料：全球知名二抗和底物生产商KPL以及权威自身免疫抗原抗体生产商Arotec中国独家一级代理商，以及免疫诊断原料知名供应商Meridian和Fitzgerald中国一级代理

在Western Blotting实验中，除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外，还需要使用内参抗体对内参进行检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。然而常用的GAPDH、Beta-Actin以及Tubulin等抗体通常是作为动物细胞的内参使用，针对植物蛋白，则需要选择合适的植物内参抗体。

核酮糖二磷酸缩化酶（Rubisco），是植物组织中广泛存在的一种高丰度蛋白，低等的细菌到高等的被子植物中都有其同源蛋白。该酶催化光合作用过程中二氧化碳固定的最有一个限速反应。该酶是双功能酶，在CO2浓度高的环境中，使RUBP进行羧化反应，起羧化酶的作用，形成磷酸甘油酸；在O2浓度高的环境中，使RUBP进行氧化反应，起加氧酶的作用，形成磷酸乙醇酸和磷酸甘油酸。

针对植物学研究中，需要对蛋白样品进行标准化定量或者使用蛋白内参对免疫学结果进行参照，上海金畔生物科技有限公司向您推荐Agrisera最全面的植物蛋白内参及定量方案。有抗Rubisco植物内参抗体（产品又包括抗Rubisco大亚基抗体、抗Rubisco小亚基抗体等），还有用于定量的Rubisco重组蛋白以及定量试剂盒。

上海金畔生物科技有限公司还向您推荐Rubisco quantitation kit即Rubisco定量试剂盒，该试剂盒通过免疫印迹的定量分析能对植物及藻类样本中的Rubisco蛋白进行定量。试剂盒内包括了抗Rubisco大亚基（RbcL）抗体（100 µg可完成100次WB分析）、作为标准品的Rubisco大亚基重组蛋白（250 µl的0.15 pmoles/µl重组蛋白，可进行85次标准曲线的分析实验）以及Agrisera专用于定量用的蛋白裂解液PEB缓冲液（3 x 2 ml的4倍贮液，可进行48次植物样本蛋白的提取或120次藻类样本蛋白提取）。

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