为什么要做3D细胞培养?
传统的常规细胞培养由于细胞在体外改变的环境下增生逐渐丧失了原有的性状,往往和体内情况不相符;而动物实验完全在体内进行, 但由于体内的多种因素制约以及体内和外界环境相互影响而变得复杂化, 难以研究单一过程,且难以研究中间过程。
而3D细胞培养是是以胶原水凝胶为细胞外基质支架,使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长。是介于单层细胞培养与动物实验之间的一种技术,既能较大程度的模拟体内环境,又能展现细胞培养的直观性及条件可控性的优势。
3D细胞培养的主要应用:
领域 |
课题 |
研究目的 |
肿瘤研究 |
法筛选抗肿瘤新药 |
药物毒理分析 |
筛选抗肿瘤新药 |
细胞间的相互作用 |
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生长支架优选化,药物筛选 |
细胞-基质-药物相互作用 |
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肿瘤侵入,肿瘤-周围组织相互影响 |
单一细胞类型的Sorting in和Sorting out |
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循环系统和心脏组织工程 |
胶原蛋白基质 |
发育生理学研究 |
再生过程 |
心内膜炎病理过程 |
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生长基质和生长因子 |
肿瘤生长抑制 |
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生长支架植入 |
主动脉瓣膜替代品 |
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弹性蛋白, 胶原蛋白 |
血管替代品 |
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增生和发育 |
血管植入 |
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软骨和骨组织工程 |
细胞外基质 |
干细胞发育潜力 |
聚合物生长支架 |
细胞分化 |
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复合组织培育 |
组织间相互作用 |
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牙本质再生 |
牙替代品 |
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模拟生物支架 |
生物材料研究 |
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氧气供应 |
骨血管化 |
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神经系统组织工程 |
药物测试 |
毒理实验 |
和生物材料的接触效应 |
生物材料的体内可降解性 |
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生长支架 |
再生过程 |
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信号识别 |
组织整合 |
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微质量培养 |
干细胞分化潜力 |
美国101Bio最新研发的3D细胞培养基质胶——Col-Tgel具有目前市场上产品无法媲美的优势:
- 产品为纯的胶原,无其他杂质,如生长因子,激素等,产品稳定,批间差极小,同时减少了干扰因素;
- 室温操作即可,无需在冰上进行;
- 耗时短,3D培养仅需3步完成,全程不超过1个小时;
- 有3种不同的硬度,可根据细胞样本选择最合适的硬度产品;
- 高透明度,便于观察;
- 2ml包装,使用方便,无需反复冻融;
Col-Tgel(101Bio)产品信息:
货号 |
硬度 |
包装 |
适用样本 |
P720S-1 |
Soft |
1 mL |
Circulating cells, Nerve cells, BT474, HL60, P39 |
P720S-10 |
Soft |
10 mL |
|
P720M-1 |
Med |
1 mL |
Muscle cells, Adipose cells, C2C12, HepG2 |
P720M-10 |
Med |
10 mL |
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P720H-1 |
Stiff |
1 mL |
Bone cells |
P720H-10 |
Stiff |
10 mL |
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P720SMH-3 |
S/M/H |
1 mL x 3 |
A combo of P720S-1, P720M-1, P720H-1 for customer testing their cells. |
细胞样本最适合硬度参考:
Col-Tgel(101Bio)与市场同类产品性能比较:
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Col-Tgel(101Bio) |
Matrigel(BD) |
Hystem gel(Sigma) |
成分 |
部分变性的胶原 |
由小鼠肉瘤细胞产生的凝胶蛋白 |
透明质酸,聚乙二醇二丙烯酸酯 |
无生长因子 |
是 |
否(低生长因子) |
是 |
稳定性 |
是 |
否,动物来源,差异大 |
否,保存困难,不稳定 |
不同硬度 |
是 |
否 |
是 |
室温操作 |
是 |
冰上操作 |
是 |
实验耗时 |
仅3步,60min |
复杂的多步操作,>2h |
过夜 |
凝固时间 |
可控,易于使用 |
不可控 |
不可控 |
透明度 |
是 |
半透明,不能通过显微镜观察 |
是 |
肿瘤生长 |
是 |
是 |
是 |
使用参考文献:
1. Kuwahara, Kenrick, Zhi Yang, Ginger C. Slack, Marcel E. Nimni, and Bo Han. “Cell delivery using an injectable and adhesive transglutaminase–gelatin gel.”Tissue Engineering Part C: Methods 16, no. 4 (2009): 609-618.
2. Kuwahara, Kenrick, Josephine Y. Fang, Zhi Yang, and Bo Han. “Enzymatic crosslinking and degradation of gelatin as a switch for bone morphogenetic protein-2 activity.” Tissue Engineering Part A 17, no. 23-24 (2011): 2955-2964.
3. Fang, Josephine, Zhi Yang, ShihJye Tan, Charisse Tayag, Marcel E. Nimni, Mark Urata, and Bo Han. “Injectable gel graft for bone defect repair.”Regenerative medicine 9, no. 1 (2014): 41-51.
4. Tan, ShihJye, Josephine Y. Fang, Zhi Yang, Marcel E. Nimni, and Bo Han. “The synergetic effect of hydrogel stiffness and growth factor on osteogenic differentiation.” Biomaterials 35, no. 20 (2014): 5294-5306.
5. Fang, Josephine Y., Shih-Jye Tan, Zhi Yang, Charisse Tayag, and Bo Han. “Tumor Bioengineering Using a Transglutaminase Crosslinked Hydrogel.” PloS one 9, no. 8 (2014): e105616.