用HPLC法进行快速分析

和光纯药工业 大阪研究所 上森仁志

笔者十年间一直从事HPLC填充剂的研发和使用，接触HPLC的机会很多，因此经常思考是否能更快速地完成分析。一般来说HPLC分析再快每个样品也需要10分钟的时间，完全不能与临床检测领域自动分析装置的样品处理速度相比。

当然这两种方法不能这样比较，同样完成一次检测，绝对是用HPLC法所得到的数据更多。因此如果HPLC分析时间可缩短，其优势就会更大。要缩短分析时间，需要考虑流速和分析温度，除此外①让柱规格更小②使用反相填充柱时把烷基链长缩短这两个是决定性因素。关于①，笔者使用3μm ODS硅胶填充剂进行的快速分析，在和光纯药时报Vol.61 No.1(1993)上已作介绍。实验虽然可重复，但如图1中护发素中的醋酸dl-α-维生素E的分析比较所示，填充剂的粒径变小，柱的性能提升，就此令柱规格变小尝试缩短分析时间，而实际分析时间缩短了约1/3。这次再度尝试从烷基链长度的方面（基于过去多位研究人员的报告）进行研究。

其结果，C8填充剂比起ODS填充剂，特别有减少保留疏水性化合物的效果，适合快速分析。使用ODS填充剂进行快速分析时会使用梯度法。但是要实现高灵敏度分析，分析完毕后需要平衡化到初期条件，因此每个循环的分析时间并不能缩少。反而使用C8填充剂就没有这些问题，真正能缩短分析时间。其状况如图2所示。缩短每个样品分析的时间，预计可以改善样品处理能力和减少溶剂使用量。

图2的分析里使用了RS型的填充剂，能做到可分析碱基强度高的三环类抗忧郁药的同时没有峰值拖尾。