热启动PCR用DNA聚合酶——Hot-Start Gene Taq

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热启动PCR用DNA聚合酶——Hot-Start Gene Taq

热启动PCR用DNA聚合酶——Hot-Start Gene Taq

　　本产品是Hot-Star PCR用的耐热型DNA聚合酶。进入PCR循环前先经过95℃，5分钟的热处理，对本产品进行酶活性化处理。

　　在PCR初期需要进行过量酶活抑制的热启动PCR，以抑制引导错误、无效酶失活。根据用途的不同，附有可分开使用的2种10倍浓度的反应缓冲液。

◆特点


●　高特异性和DNA高回收率
●　具有热启动功能，可在室温条件下配制反应液
●　适用于多路传输PCR
●　极少有宿主源DNA混入，纯度高

◆产品组成

Hot-Start Gene Taq

250 units

50 units

dNTP 混合物
  (2.5 mmol/L each)

800 μL×１瓶

160 μL×１瓶

10×Gene Taq通用缓冲液
  (15 mmol/Ll Mg2+)

1 mL×１瓶

1 mL×１瓶

10×Brilliant Buffer
  (20 mmol/L Mg2+)

1 mL×１瓶

200 μL×１瓶

◆产品信息


M.W.

68 kDa

活性

2.5 units/μL

单位的定义

1 unit是指以活化小牛胸腺DNA为引物/模板，在74℃下，30分钟内，将10nmol的脱氧核苷酸渗入不溶酸沉淀物，使其酶活化。

形状

20 mmol/L Tris-HCl (pH8.0)、100 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、0.5 % Tween 20、1 mmol/L DTT、50%甘油。

纯度

将10 units本酶和1μgλ/HindⅢ digest，在74℃下反应1小时，琼脂糖凝胶电泳显示样品条带不发生改变。


◆实验案例


　　以HeLa DNA（50ng）为模板，对下列三种扩增困难的引物进行Shuttle PCR。


【引物】


　　・A-1
　　F：5'-AGTGGGCAGAGCCAGTCACT-3'
　　R：5'-AGACTGGATGCCCAGCCTAA-3'
　　・A-2
　　F：5'-CAGACTCTGGGGCTGCCCAT-3'
　　R：5'-TCAAACACTGGCTTGGGGTA-3'
　　・A-3
　　F：5'-CCTTGGAGCAATGAGCAATG-3'
　　R：5'-CATCTTTCCAGGCTCCTTCC-3'



【实验方法】


模板DNA

50 ng

引物 (10 μM each)

1 μL

10×反应缓冲液

5 μL

聚合酶

5 μL

dNTP 混合物

0.2 mM

聚合酶

0.25 U

总量

50 μL

PCR条件

95℃, 5 分钟
  ↓
  (95℃, 30 sec→68℃, 1.5 min)×30 cyc
  ↓
  68℃, 3 分钟
  ↓
  4℃

【结果】

　　在热启动Gene Taq使用Brilliant Buffer，即使低特异性的引物，也可实现高特异性扩增，使目的扩增产物取得高回收率。


热启动PCR用DNA聚合酶——Hot-Start Gene Taq


◆产品信息


产品编号

产品名称

包装

313-07044

热启动基因Taq酶

Hot-Start Gene Taq

50 units

319-07041

250 units

315-07043

250 units×4