ISOGEN、ISOGEN-LS
RNA提取试剂
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
ISOGEN、ISOGEN-LS
RNA提取试剂
ISOGEN
(从左到右200 mL,100 mL,50 mL)
ISOGEN
ISOGEN是从人、动物、植物及细菌提取RNA试剂。可通过液相分离方法从同一样本中分离DNA及蛋白质。可通过一系列的操作分离RNA、DNA、蛋白质,有助于分析珍贵的样本。操作简单,便于样本数量较多的检测。
适用样本:组织、细胞、植物、细菌
ISOGEN-LS
ISOGEN-LS是从血液或血清等容量较大(>100 µL:使用1.5 mL塑料(离心)管进行处理),难以浓缩的液体样本中提取RNA的试剂。是将ISOGEN针对液体试剂进行改良。除了加入到样本的ISOGEN-LS量比不一样以外,得到的结果与使用 ISOGEN时一样。
适用样本: 全血、液体样本
◆原理
本产品是含有苯酚及硫氰酸胍的均一液体。往样本加入ISOGEN或ISOGEN-LS后使其溶解或均匀化,再加入氯仿进行离心分离,匀浆就会分离成水相、中间相及有机相。水相中只有RNA,DNA及蛋白质存在于中间相及其以下。首先,取出水相,加入异丙醇使RNA沉淀。往剩余的中间相及有机相里加入乙醇使DNA沉淀,加入异丙醇使蛋白质沉淀,从而依次分离出RNA、DNA及蛋白质。
◆特点
・主要成分为苯酚及硫氰酸胍的均一溶液
・便于液层分离的染色溶液(ISOGEN : 蓝色、ISOGEN-LS : 红色)
・可通过一系列的操作分离RNA、DNA、蛋白质
・操作简单、迅速 (RNA分离用时: 约1个小时、DNA : +2小时、蛋白质: +2.5小时)
・高回收率、组织及培养细胞样本请使用ISOGEN
・血液等容量大,难以浓缩的液体样本请使用ISOGEN-LS
◆产品列表
ISOGEN (10 mL、50 mL、100 mL、200 mL) |
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产品 |
容量 |
保存 |
备注 |
ISOGEN |
1瓶 |
2~10°C |
非医疗用,剧毒物 |
ISOGEN-LS (10 mL、100 mL) |
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产品 |
容量 |
保存 |
备注 |
ISOGEN-LS |
1瓶 |
2~10°C |
非医疗用,剧毒物 |
运输方法
本品在室温下运输。产品到达后,在2~10℃条件下保存即可正常使用。
◆使用案例
操作步骤
RNA分离 |
DNA分离 |
蛋白质分离 |
操作流程1-1 RNA分离 |
操作流程2 DNA分离 |
操作流程3 蛋白质分离 |
操作流程1-2 微量样本RNA分离 |
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操作流程1-3 植物样本RNA分离 |
ISOGEN及ISOGEN-LS的操作流程请参考产品说明。
实验数据一览
· 取量的标准
· <ISOGEN>ISOGEN法与硫氰酸胍-氯化铯(GT-CsCl)超速离心法比较
· <ISOGEN>ISOGEN法分离总RNA电泳
· <ISOGEN>ISOGEN法分离RNA、DNA及蛋白质Northern、Southern、Western印迹法
· <ISOGEN-LS>ISOGEN法分离hepatitis C viral (HCV) RNA的RT-PCR
◆注意事项
· 如果您对试剂的基本的知识不了解,请不要使用。
· ISOGEN及ISOGEN-LS是非医疗用医剧毒物(苯酚制剂),请小心操作。
· 使用时请穿着适当的防护设备(手套、眼镜等)。
· 如果接触皮肤或眼睛,请用大量的水冲洗15分钟或以上,并及时就诊。
· 请按照说明书进行操作。
· 对于因不按照说明书操作而导致的事故,Nippon Gene不负任何责任。
◆备注
本产品是实验研究用试剂,请勿用作医疗用途。
◆资料 Data Sheet
产品手册
· ISOGEN,ISOGEN-LS 产品说明书(H18年7月修订版) (PDF 92KB)
SDS(Safety Data Sheet)
· ISOGEN 安全标签(PDF)
· ISOGEN-LS 安全标签(PDF)
◆相关产品
· ISOGEN II total RNA及small RNA抽提试剂
· ISOGEN with Spin Column RNA抽提试剂
· Ethachinmate 用于从微量样本抽提RNA的酒精沉淀共沉淀剂
· 缓冲剂
· Deoxyribonuclease(RT Grade)for Heat Stop
· Deoxyribonuclease(RT Grade)
· DNase I (RNase free)
Q:从革兰氏阳性菌提取RNA的方法
A:总体来说,革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,普通的操作流程回收到的RNA的量比革兰氏阴性菌少。因此,使用玻璃珠(0.1 – 0.15 mm)破坏
革兰氏阳性菌的细胞壁后,用ISOGEN提取RNA。
使用ISOGEN从革兰氏阳性菌抽提RNA – CN.pdf
Q:从酵母提取RNA的方法
A:酵母的细胞壁较厚,仅仅进行普通的ISOGEN/ISOGEN-LS处理,难以回收RNA。因此,使用作用于β -1,3结合的葡萄糖聚合物的 Zymolyase
对细胞壁进行溶解,提取RNA。
使用ISOGEN/ISOGEN-LS从酵母抽提RNA -CN.pdf
Q:从骨头提取RNA的方法
A:使用ISOGEN从大鼠脊椎提取总 RNA,并检测其回收量及纯度。
使用ISOGEN从骨头抽提RNA – CN.pdf
Q:可以分开提取小RNA和高分子RNA吗?
A:本产品无法分开回收小RNA和高分子RNA,但是本产品的升级产品ISOGEN II可以分开回收高分子RNA(>200 bases)和小RNA
(<200 bases)。
分离操作流程(前往ISOGEN II 产品页面链接)
参考文献
[ 1 ] Chomczynski, P. and Sacchi, N.: Anal.Biochem., 162, 156 (1987)
[ 2 ] Chomczynski, P.: BioTechniques, 15, 532 (1993)
[ 3 ] Chomczynski, P., Bowser-Finn, R. and Sabatini, N.: The Jounal of NIH Research, 6,83 (1994)
[ 4 ] Chomczynski, P. and Mackey, K., BioTechniques, 19, 942-945 (1995)
License
Licensed by Molecular Research Center, Inc.
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
315-02504 | ISOGEN | 10 mL | – | – |
317-02503 | ISOGEN | 50 mL | – | – |
311-02501 | ISOGEN | 100 mL | – | – |
– | ISOGEN | 200 mL | – | – |
317-02623 | ISOGEN-LS | 10 mL | – | – |
311-02621 | ISOGEN-LS | 100 mL | – | – |