重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
重组双碱性氨基酸内肽酶(RKex2)
◆概述
Kex-2(E.C.3.4.21.61)属于枯草杆菌蛋白酶家族,为酵母自身编码的一种前体加工酶,Ca2+ 依赖型丝氨酸蛋白酶,能够专一性地识别和切割Lys-Arg,Arg-Arg,Pro-Arg等双碱性氨基酸※ 的羧基端肽键。不同于Trypsin,该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸(Arg或Lys)的羧基端肽键。常在酵母表达外源蛋白前体中加入Kex-2识别位点,便于外源蛋白前体加工。该酶最适pH为9.0,在偏酸性环境中稳定,稳定pH为5.0-6.0。最适温度为37 ℃,酶活性不受常规丝氨酸蛋白酶抑制剂(如PMSF、TPCK等)抑制。
※碱性氨基酸:水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸,其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团。包括以下三种:
中文名 |
英文名 |
缩写 |
符号 |
等电点 |
精氨酸 |
Arginine |
Arg |
R |
10.76 |
赖氨酸 |
Lysine |
Lys |
K |
9.74 |
组氨酸 |
Histidine |
His |
H |
7.59 |
◆优势
● 单批次产量大,批间差小
● 高纯度,高比活性
● 无外源性病毒污染,无动物源生产原料
◆纯度
SDS-PAGE显示纯度>90%。
◆使用方法
溶解缓冲:20 mmol/L NaAc-HAc,2 mmol/L Ca2+,pH 5.0~5.5。
酶切体系:50~100 mmol/L Tris,2 mmol/L Ca2+,pH 7.0~9.0;或HEPES,5 mmol/L Ca2+,pH 7.0~9.0;
推荐使用量:蛋白酶:融合蛋白质量比1:20~1:1000
◆保存条件
储存稳定性:冻干粉存于-15 ℃以下,24个月稳定;20 mmol/L NaAc-HAc,2 mmol/L Ca2+,
储存稳定性:pH 5.0~5.5溶解后分装储存于-15 ℃以下,避免反复冻融;溶解后2~8 ℃保存建议不超过24 h。
运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。
◆应用实例
RKex-2特异性酶切合成短肽
合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR及LWK,蛋白酶:合成多肽质量比1:1000,37 ℃酶切反应10 min,LC-MS验证酶切反应特异性。
Peak# |
R.T. |
M.W. |
Sequence |
Peak 1 |
2.79 min |
522.6 |
YGKR |
Peak 2 |
6.26 min |
445.56 |
LWK |
Peak 3 |
6.94 min |
950.15 |
YGKRLWK |
◆产品信息
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
比活 |
RKex20202 |
RKex2 |
10 mg |
10 U/mg |
RKex20204 |
RKex2 |
10 μg |
10 U/mg |
◆相关产品
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
储存温度 |
检测范围 |
MDRK0201 |
RKex2 ELISA Kit |
96 孔 |
2~8 ℃ |
1.0~4000 ng/mL |
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。