LBIS牛血清白蛋白ELSIA试剂盒
LBIS Bovine Albumin ELISA Kit
白蛋白存在于细胞和体液中,主要类型为高水溶性的蛋白,同时也存在糖基化的白蛋白。血清白蛋白分子量约为69 kDa,占血浆蛋白56-60%,等电点为4.9,在肝细胞中合成。
血清白蛋白是血清蛋白的主要组成部分,在维持渗透压中起重要作用,在生理上与脂肪酸、胆红素和甲状腺素等难溶于水的物质结合,并协助其运输。血清白蛋白浓度的降低,通常是由于肝硬化等引发的白蛋白生物合成减少、营养不良或热性病损耗的体蛋白所导致的血液中白蛋白的消耗,以及肾障碍引起的尿液渗出等原因所致。
在健康人的尿液中,血清白蛋白的排泄量每天仅在30 mg以下,但由于患肾脏疾病时渗出至尿液的白蛋白会增多,因此患肾小球肾炎、肾病综合征、糖尿病性肾病等肾脏疾病时的尿白蛋白水平会升高。另外,发烧、高血压、充血性心力衰竭、尿路感染等情况下,尿白蛋白水平也有可能会升高。即使是健康人,在经过剧烈运动或肌肉劳动后、热水沐浴后、精神兴奋、压力和摄入大量蛋白后以及月经前,尿白蛋白会短暂性增加,这种现象也被称为生理性或功能性蛋白尿或运动性蛋白尿。此外,仅在站立时才出现的蛋白尿主要发现于年轻人中。
人类中有一种罕见的先天性疾病,称为低白蛋白血症,也称为无白蛋白血症,但正确来说是含有极少量白蛋白,临床症状为轻度水肿和中度低血压,尚未观察到肝功能异常或蛋白尿。动物中大鼠有无白蛋白血症analbuminemia的模型,是由佐佐木研究所的Sumi Nagase老师以SD大鼠建立的,被称为NAR(Nagase analbuminemia rat)。
血清白蛋白的检测,使用TIA检测系统宏观上效果不错,FUJIFILM Wako Shibayagi也可以提供大鼠和小鼠的自动检测仪器用TIA试剂盒,然如果要实现高灵敏度和微量检测则需用到ELISA。富士胶片和光Shibayagi的LBIS Albumin ELISA Kit除了可定量检测血液中、尿液中与疾病相关的白蛋白外,还可应用于体外白蛋白生物合成实验系统、从培养体系中纯化得到的生物药中FBS等的残留污染检测,NAR中肝细胞和肝组织移植后白蛋白产生的标记成功与否的研究等等。
◆试剂盒特点
● 可快速检测(总反应时间:2.5 h)
● 检测范围:0.78~50 ng/mL
● 所需样品量:100 μL/well
● 使用环保的防腐剂
● 所有试剂均为即开即用的溶液
● 高检测准确性和可重复性
使用目的
● 检测培养基来源的牛血清白蛋白(BSA/FBS)
● 细胞和组织加工产品
● 单克隆抗体生产工艺
● 重组蛋白生产工艺
◆试剂盒的组成
组成内容 | 状态 | 包装 |
(A)抗体固定96孔板(干板型) | 清洗后使用 | 96 wells(8×12)/1支 |
(B)标准白蛋白溶液(500 ng/mL) | 稀释后使用 | 200 μL/1支 |
(C)缓冲液 | 直接使用 | 60 mL/1支 |
(D)过氧化物酶结合抗白蛋白抗体 | 稀释后使用 | 200 μL/1支 |
(F)显色液(TMB) | 直接使用 | 12 mL/1支 |
(H) 反应停止液(1M H2SO4) ※ 使用注意 | 直接使用 | 12 mL/1支 |
(I)浓缩清洗液(10×) | 稀释后使用 | 100 mL/1支 |
封板膜 | —— | 3张 |
使用说明书 | —— | 1份 |
◆交叉反应性
物种 | 交叉反应率(%) |
牛 | 100% |
小鼠 | 小于0.05% |
大鼠 | 小于0.05% |
人 | 小于0.05% |
※ 交叉反应率为1000 ng/mL浓度下检测的数据。
◆样品信息
检测样品中牛白蛋白残留污染
※ 检测时,制备合适倍率的缓冲液,用作检测用的稀释样品。
※ 请注意本试剂盒对于检测牛血清·血浆样品十分敏感。需稀释约一百万倍。
◆检测范围
0.78~50 ng/mL(标准曲线范围)
◆Validation data
准确度测试(实验组内差异)
样品 | A | B | C | D |
1 | 46 | 23.9 | 11.7 | 1.72 |
2 | 45.3 | 23.5 | 11.8 | 1.84 |
3 | 43.9 | 24.2 | 11.5 | 1.7 |
4 | 44.8 | 22.5 | 11.4 | 1.76 |
5 | 48 | 24.7 | 12.3 | 1.75 |
mean | 45.6 | 23.8 | 11.7 | 1.75 |
SD | 1.561 | 0.825 | 0.353 | 0.053 |
CV(%) | 3.4 | 3.5 | 3 | 3 |
单位:ng/mL
可重复性测试(实验组间差异)
检测日/样品 | E | F | G |
第0日 | 1.48 | 5.7 | 24.3 |
第1日 | 1.55 | 6.2 | 25.6 |
第2日 | 1.5 | 6.35 | 25 |
第3日 | 1.56 | 6.25 | 25 |
mean | 1.52 | 6.12 | 25 |
SD | 0.042 | 0.288 | 0.545 |
CV(%) | 2.8 | 4.7 | 2.2 |
单位:ng/mL n=3
加标回收测试
样品 H
添加量 | 实测值 | 回收量 | 回收率 |
0 | 3.06 | – | – |
1.5 | 4.58 | 1.52 | 101 |
3 | 5.8 | 2.74 | 91.3 |
3.75 | 6.79 | 3.73 | 99.5 |
单位:ng/mL n=3
样品 I
添加量 | 实测值 | 回收量 | 回收率 |
0 | 10.6 | – | – |
3.95 | 14.7 | 4.1 | 104 |
11.9 | 22.3 | 11.7 | 98.3 |
19.8 | 29.4 | 18.8 | 94.9 |
单位:ng/mL n=3
◆稀释直线性测试
使用连续性稀释缓冲液分4个阶段梯度稀释2个血清样品,并进行检测,结果显示直线回归的R2从0.9996变为了0.9997。
◆操作方法
抗体包被96孔板(干板型)
↓ 清洗4次
样品或标准溶液 100 μL
↓ 搅拌,室温(20~25 ℃),静置反应1 h
↓ 清洗4次
过氧化物酶结合抗白蛋白抗体 100 μL
↓ 搅拌,室温(20~25 ℃),静置反应1 h
↓ 清洗4次
显色液(TMB) 100 μL
↓ 搅拌,室温(20~25 ℃),静置反应30 min
反应终止液(1M H2SO4)
↓ 搅拌
吸光度检测(主波长450 nm、副波长620 nm:600~650 nm)
◆FBS/FCS,液体培养基检测示例
样品 | 白蛋白检测值(mg/mL) |
FBS-1 | 17.3 |
FBS-2 | 17.3 |
FCS-1 | 10.5 |
FCS-2 | 12.5 |
RPMI-1(10 %FBS) | 1.39 |
RPMI-2(10 %FBS) | 1.73 |
◆牛血清白蛋白(BSA)检测用试剂
牛血清白蛋白(BSA:Bovine Serum Albumin)
产品编号 | 产品名称 | 标准曲线范围 | 样品量 (稀释样品) |
635-07099 | LBIS Bovine Albumin ELISA kit
LBIS牛白蛋白 ELISA试剂盒 |
0.78~50 ng/mL | 100 μL |
已经验证可以检测样品中掺入的牛血清白蛋白,以及来源于生产过程的终产品中牛血清白蛋白残留杂质。
本产品仅供实验研究用,不可作临床应用。
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产品列表
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
635-07099 | LBIS Bovine Albumin ELISA kit LBIS牛白蛋白 ELISA试剂盒 |
96 tests |