LabAssay™ ALP LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

LabAssay™ ALP
LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

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LabAssay™ ALP LabAssay™ ALP                              LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒


碱性磷酸酶的活性检测试剂盒,常用于检测培养的成骨细胞、实验动物血清和骨组织中的碱性磷酸酶活性。
碱性磷酸酶(ALP)广泛分布于肝脏、骨和小肠之中。组织中酶活性的变化是成骨等生理现象的重要标志。在骨代谢研究领域被用作骨形成指标之一。

本产品是以对硝基苯磷酸盐为底物的碱性磷酸酶检测试剂盒,通过使用酶标仪进行多样品检测。

 

◆检测原理

碱性磷酸酶存在下,碳酸盐缓冲溶液(pH 9.8)中的对硝基苯磷酸盐分解成对硝基苯酚和磷酸,产生的对硝基苯酚在碱性条件下呈黄色。通过测量405 nm处的吸光度,可以计算样品中的碱性磷酸酶活性。


LabAssay™ ALP                              LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

◆产品性能


检测范围:>0.06 mmol/L

标准曲线范围:0.0625~0.5 mmol/L

重复性:C.V.<10%

样品:血清(小鼠、大鼠、人)

所需样品量:20 μL

检测时间:约20min

检测波长:405 nm

◆试剂盒成分


底物片(溶解时对硝基苯基磷酸二钠 6.7 mmol/L)

10 片

底物溶解buffer (2.0 mmol/L 氯化镁 含有 0.1 mol/L 碳酸盐缓冲液 pH 9.8)

50 mL × 1瓶

反应终止液(0.2 mol/L氢氧化钠溶液)

50 mL × 1瓶

标准溶液 (0.5 mmol/L 对硝基苯酚溶液)

5 mL × 1瓶


◆标准曲线示例


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◆检测操作方法

根据下表中的条件进行反应。

Test

标准

空白

底物缓冲液

100 μL

100 μL

100 μL

待测物

样品20   μL

标准溶液20   μL

蒸馏水   20 μL

  孔板混匀仪中震荡1   min,37°C下孵育15 min。

反应终止液

80 μL

80 μL

80 μL

  孔板混匀仪中震荡1   min,使用酶标仪测量405 nm处吸光度

◆数据


加标回收测试

ALP的加标回收测试,将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中,n=2。


● 人血清样品

添加量(mmol/L)

平均值(mmol/L)

回收量(mmol/L)

回收率(%)

0.429

0.097

0.527

0.098

101

0.197

0.587

0.158

80.2

0.297

0.672

0.243

81.8

0.507

0.866

0.437

86.2

● 小鼠血清样品


添加量(mmol/L)

平均值(mmol/L)

回收量(mmol/L)

回收率(%)

0.284

0.060

0.343

0.059

98.3

0.127

0.399

0.115

90.6

0.251

0.507

0.223

88.8

0.500

0.753

0.469

93.8

● 大鼠血清样品


添加量(mmol/L)

平均值(mmol/L)

回收量(mmol/L)

回收率(%)

0.374

0.060

0.439

0.065

108.3

0.127

0.483

0.109

85.8

0.251

0.598

0.224

89.2

0.500

0.855

0.481

96.2

稀释线性度测试


使用随附的缓冲液制备样品,使其处于检测范围内,用缓冲液连续梯度稀释4次,并检测结果。

● 人血清样品

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● 小鼠血清样品

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● 大鼠血清样品

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样品检测案例


● 人样品


样品

检测值 (mean)

SD

CV (%)

混合血清,男性

0.556

0.003

0.5

混合血浆(EDTA),男性

0.07

0.001

1.2


※抗凝固剂的EDTA会产生负误差,所以请不要使用。

● 小鼠样品:CD-1(ICR)、雄性、血清


样品

检测值 (mean)

SD

CV (%)

No.1

0.31

0.013

4.2

No.2

0.453

0.001

0.2

No.3

0.495

0.015

3

No.4

0.442

0.013

2.9

No.5

0.373

0.002

0.5

● 大鼠样品:SD、雄性、血清


样品

检测值(mean)

SD

CV (%)

No.1

0.538

0.005

1

No.2

0.441

0.01

2.2

No.3

0.357

0

0

No.4

0.46

0.002

0.5

No.5

0.301

0.011

3.6

单位:mmol/L, n=2



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※ 产品已更新,旧编号为:291-58601

参考文献


 Ito, S. et al. : J. Pharmacol. Exp. Ther., 333, 341 (2010). ※小鼠肾组织提取液

 Matsuyama, A. et al. : Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 45, 75 (2018). ※MC3T3-E1细胞, C2C12细胞

 Chiba, T. et al. : J. Atheroscler. Thromb., 23, 1099 (2016). ※小鼠血浆

 Kohno, Y. et al. : Stem Cell Res. Ther., 8, 115 (2017). ※骨膜间充质干细胞

 Iwakura, T. et al.J. Orthop. Res., 27, 208 (2009). ※人培养细胞提取液

 Furuya, Y. et al. : J. Biol. Chem., 286, 37023 (2011). ※小鼠血清

 Itoh, T. et al. : J. Biol. Chem., 284, 19272 (2009). ※小鼠培养细胞提取液


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
633-51021 LabAssay™ ALP
 LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒
500 tests for Cellbiology