高速氨基酸分析仪用缓冲液PH/PF系列
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高速氨基酸分析仪用缓冲液PH/PF系列
在氨基酸分析中，常见的方法有茚三酮法，即通过柱层析分离各种氨基酸后，与茚三酮进行显色反应来测定吸光度的柱后衍生法。在茚三酮法中，将样品上样至碱性阳离子交换树脂中，通过梯度升高洗脱液的pH值可以对氨基酸进行洗脱，但调节所用的缓冲液（pH值、浓度等）非常复杂。FUJIFILM Wako提供的PH/PF系列产品是基于日立高速氨基酸分析仪LA-8080/L-8900/L-8800（A）/L-8500（A）的说明书制备的缓冲液，无需微调pH和稀释，可配合仪器直接使用。
PH系列缓冲液适用于蛋白水解分析，PF系列缓冲液适用于生物液体分析。
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分析法 |
分析对象 |
适用的高速氨基酸分析仪用缓冲液 |
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蛋白水解分析法 |
分析蛋白和肽等17种组成氨基酸成分 |
PH系列 |
| 生物液体分析法 |
分析血清和尿液等生物液体中含有的41种氨基酸成分 |
PF系列 |
◆产品列表
高速氨基酸分析仪用缓冲液PH系列
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产品编号 |
产品名称 |
包装 |
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020-19451 |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PH-1 高速氨基酸分析仪PH-1缓冲液 |
1 L |
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027-19461 |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PH-2 高速氨基酸分析仪PH-2缓冲液 |
1 L |
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024-19471 |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PH-3 高速氨基酸分析仪PH-3缓冲液 |
1 L |
|
021-19481 |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PH-4 高速氨基酸分析仪PH-4缓冲液 |
1 L |
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028-19491 |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PH-RG 高速氨基酸分析仪PH-RG缓冲液 |
1 L |
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028-19511 * |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PH-SET 日立高速氨基酸分析仪用 PH缓冲液套装 |
1 set |
* PH缓冲液套装组成：PH-1缓冲液×2支；PH-2缓冲液×1支；PH-3缓冲液×1支；PH-4缓冲液×2支；PH-RG缓冲液×1支
高速氨基酸分析仪用缓冲液PF系列
|
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
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025-19521 |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PF-1 高速氨基酸分析仪PF-1缓冲液 |
1 L |
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022-19531 |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PF-2 高速氨基酸分析仪PF-2缓冲液 |
1 L |
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029-19541 |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PF-3 高速氨基酸分析仪PF-3缓冲液 |
1 L |
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026-19551 |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PF-4 高速氨基酸分析仪PF-4缓冲液 |
1 L |
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023-19561 |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PF-RG 高速氨基酸分析仪PF-RG缓冲液 |
1 L |
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020-19571 * |
Buffer for High-Speed Amino Acid Analyzer PF-SET 日立高速氨基酸分析仪用 PF缓冲液套装 |
1 set |
*PF缓冲液套装组成：PF-1缓冲液×2支；PF-2缓冲液×1支；PF-3缓冲液×1支；PF-4缓冲液×2支；PF-RG缓冲液×1支
◆分析实例
使用PH系列缓冲液分析实例
■ 色谱图
■ 分析条件
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仪器 |
L-8900型日立高速氨基酸分析仪 |
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分离柱 |
蛋白水解产物分析柱 #2622 4.6 mm ID×60 mm（日立产品编号：855-3506） |
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除氨柱 |
除氨柱 #2650L 4.6 mm ID×40 mm（日立产品编号：855-3523） |
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检测样品 |
氨基酸混合标准溶液，H型（制备至2 nmol/20 μL，产品编号：018-27881） L-色氨酸标准品（制备至2 nmol/20 μL，产品编号：205-19601） |
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检测 |
茚三酮显色法（茚三酮试剂：日立用茚三酮显色溶液试剂盒，产品编号：299-70501） |
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检测波长 |
570 nm和440 nm |
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洗脱液 |
洗脱液 |
反应液 |
|||
|
B1 |
PH-1 |
B4 |
PH-4 |
R1 |
茚三酮溶液 |
|
B2 |
PH-2 |
B5 |
水 |
R2 |
缓冲液 |
|
B3 |
PH-3 |
B6 |
PH-RG |
R3 |
5vol％乙醇溶液 |
|
时间 |
%B1 |
%B2 |
%B3 |
%B4 |
%B5 |
%B6 |
pump1流速 |
柱（℃） |
%R1 |
%R2 |
%R3 |
pump2流速 |
|
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0.4 |
57 |
50 |
50 |
0 |
0.35 |
|
2.5 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
2.6 |
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
4.5 |
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
4.6 |
0 |
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
12.8 |
0 |
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
12.9 |
0 |
0 |
0 |
100 |
0 |
0 |
||||||
|
27 |
0 |
0 |
0 |
100 |
0 |
0 |
||||||
|
27.1 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||||||
|
32 |
50 |
50 |
0 |
|||||||||
|
32.1 |
0 |
0 |
100 |
|||||||||
|
33 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||||||
|
33.1 |
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
34 |
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
34.1 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
37 |
0 |
0 |
100 |
|||||||||
|
37.1 |
50 |
50 |
0 |
|||||||||
|
53 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
使用PF系列缓冲液的分析实例
■ 色谱图
■ 分析条件
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仪器 |
L-8900型日立高速氨基酸分析仪 |
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分离柱 |
生物液体分析柱 #2622 4.6 mm ID×60 mm（日立产品编号：855-3507） |
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除氨柱 |
除氨柱 #2650L 4.6 mm ID×40 mm（日立产品编号：855-3523） |
|
检测样品 |
氨基酸混合标准溶液，AN型/B型（产品编号：015-27891，011-27871） L-2-氨基己二酸标准品（产品编号：019-24871） L-天冬酰胺标准溶液（产品编号：016-14131） L-色氨酸标准品（产品编号：205-19601） |
|
检测 |
茚三酮显色法（茚三酮试剂：日立用茚三酮显色溶液试剂盒，产品编号：299-70501） |
|
检测波长 |
570 nm和440 nm |
|
洗脱液 |
洗脱液 |
反应液 |
|||
|
B1 |
PF-1 |
B4 |
PF-4 |
R1 |
茚三酮溶液 |
|
B2 |
PF-2 |
B5 |
水 |
R2 |
缓冲液 |
|
B3 |
PF-3 |
B6 |
PF-RG |
R3 |
5vol％乙醇溶液 |
|
时间 (min) |
%B1 |
%B2 |
%B3 |
%B4 |
%B5 |
%B6 |
pump1流速(mL/min) |
柱温（℃） |
%R1 |
%R2 |
%R3 |
pump2流速(mL/min) |
|
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0.35 |
38 |
50 |
50 |
0 |
0.3 |
|
2 |
30 |
|||||||||||
|
21.5 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
21.6 |
80 |
20 |
0 |
0 |
0 |
0 |
60 |
|||||
|
33.5 |
70 |
30 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
33.6 |
10 |
90 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
36.5 |
40 |
|||||||||||
|
43.5 |
10 |
90 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
43.6 |
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
50.5 |
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
70 |
|||||
|
50.6 |
0 |
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
68.4 |
45 |
|||||||||||
|
69.5 |
0 |
0 |
100 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
69.6 |
60 |
0 |
0 |
40 |
0 |
0 |
||||||
|
75 |
60 |
0 |
0 |
40 |
0 |
0 |
||||||
|
75.1 |
0 |
0 |
0 |
100 |
0 |
0 |
||||||
|
82 |
0 |
0 |
0 |
100 |
0 |
0 |
||||||
|
82.1 |
0 |
20 |
0 |
80 |
0 |
0 |
||||||
|
92.5 |
70 |
|||||||||||
|
99.5 |
0 |
20 |
0 |
80 |
0 |
0 |
||||||
|
99.6 |
0 |
0 |
0 |
100 |
0 |
0 |
||||||
|
112.5 |
0 |
0 |
0 |
100 |
0 |
0 |
||||||
|
112.6 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||||||
|
116 |
50 |
50 |
0 |
|||||||||
|
116.1 |
0 |
0 |
100 |
|||||||||
|
121.5 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
100 |
||||||
|
121.6 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
||||||
|
125 |
38 |
|||||||||||
|
126 |
0 |
0 |
100 |
|||||||||
|
126.1 |
50 |
50 |
0 |
|||||||||
|
148 |
100 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
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