CleanCap® mRNA
含Capping结构的高活性mRNA
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含Capping结构的高活性mRNA
CleanCap® mRNA
TriLink BioTechnologies开发的CleanCap® mRNA是一种包被了特定蛋白的加帽mRNA。
本系列产品有Cas9、Cre、EGFP、Luciferase、mCherry、β-gal、EPO、OVA(ovalbumin)可供选择。
TriLink公司的CleanCap® mRNA能够作为高活性的mRNA使用,通过Capping(加帽)避免生物体内发生免疫应答,改善in vivo条件下的翻译效率。
◆CleanCap® 是什么?:为mRNA添加Cap 1 结构
TriLink公司的CleanCap® mRNA可以通过在mRNA上添加Capping结构(Cap 1)来避免生物体内发生免疫应答,从而合成具有高翻译效率的mRNA。
◆TriLink公司的CleanCap® mRNA特点
1. 加帽效率高达94%+,可获得更高活性的mRNA。
2. 不会激活模式识别受体,可避免免疫应答
3. 相较于Cap 0结构(ARCA法加帽),in vivo条件下的翻译效率得到了大幅改善
4. 相较于酶加帽法,所需成本大幅降低
5. 加帽修饰mRNA产品系列丰富
◆CleanCap®和ARCA(Anti-reverse capping analog)法的比较
将从以下两点比较ARCA法和CleanCap®加帽的mRNA。
● 加帽效率
● 细胞内蛋白的表达量
加帽效率的比较
分别使用CleanCap®和ARCA加帽表达Fluc的mRNA,比较两者的加帽效率。
结果显示,使用CleanCap® 获得的加帽效率比ARCA法高。
CleanCap® |
ARCA |
90-99% |
60-80% |
细胞内蛋白表达水平的比较
分别使用CleanCap®和ARCA法加帽表达EGFP的mRNA后,使其在细胞内表达,并通过荧光显微镜进行观察。
比较以下5种细胞:CHO cells、Foreskin fibroblast cells、iPS derived cardiomyoctyes、Jurkat、MCF 10A
结果显示,无论在哪一种细胞中,使用CleanCap®加帽的EGFP mRNA的蛋白表达水平都更高。
ARCA EGFP mRNA |
CleanCap® EGFP mRNA |
|
CHO Cells 6 minute fusion Fuse-It-mRNA Kit 1μg mRNA |
||
Foreskin fibroblast cells, |
||
iPS derived cardiomyoctyes, |
||
Data courtesy of Beniag |
ARCA EGFP mRNA |
CleanCap® EGFP mRNA |
|
Jurkat: 500ng |
||
MCF 10A: 500ng |
||
Data courtesy of Polyplus-transfection |
CleanCap®与酶加帽法的制备成本比较
计算4 mL(2 mg)和1 mL(400 μg)两种规格制备加帽mRNA时所需的成本。
结果显示,CleanCap®与酶加帽法相比,生产成本更低。
◆与修饰mRNA的组合:置换尿苷
为使mRNA能够高效表达,需最大限度地去除mRNA序列中的Uridine(尿苷),并将残留的Uridine置换为Pseudo Uridine(PseudoU,假尿苷)或5-methoxy Uridine(5moU,5-甲氧基尿苷)。
TriLink公司可提供多种CleanCap®与Pseudo Uridine、5-methoxy Uridine组合的mRNA产品。
Thp-1 Dual Cells (InvivoGen)
准备2种表达Fluc的mRNA,正常序列(Standard Fluc)与尽可能去除尿苷的序列(U depleted Fluc),比较两者的表达水平。
此外,在没有进行尿苷置换(wt)、置换为Pseudo Uridine(PseudoU)和置换为5-methoxy Uridine(5moU)的条件下进行比较。
结果显示,在U depleted Fluc(尽可能去除尿苷的序列)和置换为5-methoxy Uridine(5moU:甲氧基尿苷)的序列中,Fluc的表达水平更高。
◆RNA定制合成服务
TriLink公司可提供RNA定制合成服务:化学合成短链RNA服务、转录合成长链RNA。定制项目包含加帽、修饰碱基、缓冲液组成、纯化方法开发等。从使用修饰碱基的向导RNA合成到大规模mRNA合成服务均可提供,可满足客户广泛的需求。
mRNA定制合成(in vitro转录合成)的服务内容
目标回收量:1 mg~
修饰碱基:Pseudouridine, 5-Methoxyuridine, 5-Methylcytidine/Pseudouridine等
加帽试剂:CleanCap®
定制示例
● 只需ORF序列的mRNA合成
● UTR序列和ORF序列的mRNA合成
欢迎与我们联系,进一步了解定制服务。
◆关于TriLink BioTechnologies
TriLink BioTechnologies是一家位于美国圣地亚哥的试剂、药物生产定制公司,专注于核酸、寡核苷酸、加帽类似物的生产和长链RNA合成。
CleanCap® mRNA是TriLink研发的新型共转录加帽法,与常规加帽法相比,可实现高加帽效率和高蛋白表达效率。
TriLink生产符合ICH Q7以及ISO 9001:2015。
◆产品列表
Cas9 mRNA
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
550-33824 |
CleanCap Cas9 mRNA |
1 mg |
552-33823 |
100 μg |
|
558-33744 |
CleanCap Cas9 mRNA (5moU) |
1 mg |
550-33743 |
100 μg |
|
555-33754 |
CleanCap Cas9 Nickase mRNA (5moU) |
1 mg |
551-33751 |
20 μg |
|
557-33753 |
100 μg |
Cas9 mRNA是在Broad、MIT、Harvard、Iowa、UTokyo以及Rockefeller授予的限制性许可下提供的产品。
Cre mRNA
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
555-33793 |
CleanCap Cre mRNA (5moU) |
1 mg |
559-33791 |
100 μg |
EGFP mRNA
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
555-33793 |
CleanCap EGFP mRNA |
1 mg |
559-33791 |
100 μg |
|
552-33703 |
CleanCap EGFP mRNA (5moU) |
1 mg |
556-33701 |
100 μg |
mCherry mRNA
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
556-33723 |
CleanCap mCherry mRNA (5moU) |
1 mg |
550-33721 |
100 μg |
Luciferase mRNA
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
555-33813 |
CleanCap FLuc mRNA |
1 mg |
559-33811 |
100 μg |
|
559-33713 |
CleanCap FLuc mRNA (5moU) |
1 mg |
553-33711 |
100 μg |
|
553-33733 |
CleanCap Renilla mRNA (5moU) |
1 mg |
557-33731 |
100 μg |
β-gal mRNA
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
559-33833 |
CleanCap beta gal mRNA |
1 mg |
553-33831 |
100 μg |
|
554-33763 |
CleanCap beta gal mRNA (5moU) |
1 mg |
558-33761 |
100 μg |
EPO mRNA
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
559-33774 |
CleanCap EPO mRNA (5moU) |
1 mg |
551-33773 |
100 μg |
OVA mRNA
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
558-35503 |
CleanCap Ova mRNA |
1 mg |
552-35501 |
100 μg |
|
558-33783 |
CleanCap Ova mRNA (5moU) |
1 mg |
552-33781 |
100 μg |
◆相关产品
加帽试剂
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
559-35511 |
CleanCap Reagent AG |
1 μmol |
553-35514 |
5 μmol |
|
555-35513 |
10 μmol |
|
553-35531 |
CleanCap Reagent (3' OMe) AG |
1 μmol |
557-35534 |
5 μmol |
|
559-35533 |
10 μmol |
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。