CUBIC-L, R+(M) Trial Kit

第二代CUBIC组织透明化试剂

CUBIC (Clear, Unobstructed Brain/Body Imaging Cocktails and Computational Analysis)是组织透明化技术的一种，由东京大学大学院医学系研究科上田泰己老师、顺天堂大学大学元医学研究科·医学部洲崎悦老师等人开发。

 

与第一代CUBIC相比，第二代CUBIC提高了透明度，对第一代CUIBC（CUBIC Trial Kit）的成分进行了更新。

FUJIFILM Wako可提供对应第二代CUBIC组织透明化试剂CUBIC-L, R+(M) Trial Kit。

◆特点

●　由对应第二代CUBIC的4种溶液组成

●　可透明化小鼠和狨猴的组织以及全身，人组织块等

●　透明度比第一代CUBIC（CUBIC Trial Kit）高

※ “希望确认透明化过程”，“更好地制备样品”的用户，可使用CUBIC Trial Kit（第一代CUBIC）。

◆适用样品（例）

●　小鼠组织（包含大脑）和全身

●　狨猴组织（包含大脑）和全身

●　人组织块

◆除本产品以外所需的工具

实验用具

●　解剖用剪刀和钳子

●　锥形管（请根据样品选择）

●　摇床

●　药匙（金属制）

●　观察用显微镜（共聚焦显微镜、光片显微镜等）

 

试剂

●　PBS (-)

●　D-PBS

●　多聚甲醛

◆实验步骤

小鼠全脑

工序	试剂	温度	时间
摘除内脏、灌注固定
抽血	D-PBS	4°C	<5min
灌流	4% PFA	4°C	<5min
固定	4% PFA in PBS	4°C	12-24 h
脱脂、脱色
清洗	0.01% NaN3 in PBS	RT	>2 h×2
前期置换	50% CUBIC-L Solution	37℃	>6 h
脱脂、脱色	50% CUBIC-L Solution	37℃	2-5 days
清洗
清洗	PBS	RT	>2 h×3
折射率调整
前期置换	50% CUBIC-R+（M）Solution	RT	>6 h
折射率调整	50% CUBIC-R+（M）Solution	RT	过夜
	CUBIC-R+（M） Solution	RT	24 h
观察
观察	Mounting Solution

根据样品的大小和种类，适用的实验方案不同，请根据样品调整使用量和处理时间。推荐的试剂用量为试管横放时样品可浸泡于试剂中（试管体积的1/2-2/3）。若将小鼠全脑（约0.5g）放入25 mL锥形管时，推荐使用10-13 mL左右的CUBIC-L或R+(M) Solution进行处理。

◆小鼠大脑的第二代CUBIC透明化实例

荧光蛋白表达与细胞核染色的组合

使用本产品对CAG-EGFP Tg小鼠全脑进行透明化处理，并使用专用的染色试剂盒进行细胞核染色（RedDot2）。在光片显微镜下对染色后的样品进行观察。

（本数据由顺天堂大学研究生院医学研究科·医学部 洲崎悦生老师提供）

细胞核染色与免疫染色的组合

使用本产品对B6N小鼠全脑进行透明化处理后，再使用专用的染色试剂盒进行细胞核染色（SYTOX-G）和免疫染色（NeuN-A594）。染色后在光片显微镜下对样品进行观察。

（本数据由顺天堂大学研究生院医学研究科·医学部 洲崎悦生老师提供）

※ 细胞核染色以及免疫组织染色需要使用单独的试剂，详情请与我们联系。

◆产品列表

产品编号	产品名称	产品等级	产品规格
298-85101	CUBIC-L, R+（M） Trial Kit  CUBIC-L, R+（M）试剂盒小包装	组织透明化用	1 Kit

相关产品

CUBIC Trial Kit（第一代CUBIC）

产品编号	产品名称	产品等级	产品规格
290-80801	CUBIC Trial Kit  CUBIC试剂盒小包装	组织透明化用	1 Kit

PBS

产品编号	产品名称	产品等级	产品规格
164-25511	1×PBS(-) 1×PBS(-)平衡缓冲液	生化学用	5 L
163-25265	10×PBS(-) 10×PBS(-)缓冲液	细胞培养用	500 mL
164-28713	PBS(-), Powder, for 1L PBS(-), 粉末, 1L用	生化学用	1 L用×20
166-23555	PBS(-),	细胞培养用	500 mL
164-23551			500 mL×10

D-PBS

产品编号	产品名称	产品等级	产品规格
043-29791	D-PBS(-) 杜氏磷酸盐缓冲液	细胞培养用	1 L
045-29795			500 mL
049-29793			500 mL×10
048-29805	10×D-PBS(-) 10×杜氏磷酸盐缓冲液	细胞培养用	500 mL

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。