蛋白聚集小体检测试剂盒

PROTEOSTAT^® Aggresome detection kit

 

◆原理

聚集小体（Aggresome）是由一群不正常堆叠在一起的蛋白质所形成的包涵体（Inclusion Bodies）。聚集小体的出现往往也表明细胞正处于某种应激状态，比如高温、病毒感染、活性氧自由基攻击等。聚集体通常是响应细胞应激而形成，并通过分离错误折叠的蛋白质提供细胞保护机制，最终导致它们被自噬清除。此外，蛋白质聚集体的形成是多种人类疾病的标志，例如阿尔茨海默氏症、帕金森氏症、肌萎缩侧索硬化症或酒精性肝病。

PROTEOSTAT^® Aggresome detection kit中包含的 PROTEOSTAT^® 是一种分子转子染料，在溶液中沿着单个中心键的自由分子内旋转可防止荧光产生。当它特异地插入到错误折叠和聚集的蛋白中的交叉β-sheet四级结构中，旋转受到抑制并导致发出强烈的荧光。

PROTEOSTAT^® 聚集小体检测试剂盒提供了一种快速、特异、定量的方法来标记细胞中的聚集小体，且无需进行人工蛋白定点突变。PROTEOSTAT^® 染料已在广泛的条件下对多种小分子调节剂进行验证，适用于具有治疗价值的化学物的筛选。此外，本试剂盒还适用于多重免疫荧光，以在自噬和聚集体形成的背景下研究您的目标分子。

◆试剂盒组成

组分	包装
PROTEOSTAT® Aggresome Detection Reagent	10 μL
Hoechst 33342 Nuclear Stain	50 μL
Proteasome Inhibitor (MG-132)	120 nM
10×Assay Buffer	25 mL

 ◆特点

●　提供基于细胞的灵敏的药物反应性测定，以在真实的细胞环境中识别与神经退行性疾病相关的抑制剂

●　可靠且简单的检测，不需要非生理性蛋白质突变或基因工程细胞系

●　作用条件广泛，适用于筛选具有潜在治疗价值的小分子化合物

●　已进行优化以兼容免疫染色

●　可通过流式细胞术轻松量化聚集体和相关包涵体

●　可用于神经退行性疾病、肝病、毒理学研究等的研究 

 ◆案例・应用

 

■　应用实例 1：流式细胞术检测聚集小体

流式细胞术的分析：Jurkat细胞在37°C下用 0.2% DMSO对照或用5 µM MG-132诱导过夜。处理后，将细胞固定并与PROTEOSTAT^® 染料一起孵育，无需洗涤即通过流式细胞术在FL3通道中使用488 nm激光进行分析。在 MG-132处理的细胞中，红色荧光信号增加约3倍。所描述的测定允许评估蛋白质聚集的影响。