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人白细胞介素6 ELISA试剂盒（Human IL-6 ELISA KIT）

产品货号: H6132S/H6132M/H6132L

产品规格: 24T/48T/96T

目录价（元）:952/1587/2698

推荐仪器：酶标仪

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产品概述：
储存条件
4℃避光保存，有效期见外包装。开封后，保存温度详见说明书。

注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。

产品介绍
Human IL-6 ELISA Kit (Human Interleukin-6 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人白细胞介素 6 ELISA 试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 IL-6 浓度。
白细胞介素6是一种由淋巴、非淋巴细胞产生的多功能细胞因子。IL-1、TNF、IFN-β、PDGF、LPS、PolyⅠ-C、A 23187和PMA等对IL-6的产生具有正调节作用。人IL-6的 cDNA序列有212个氨基酸残基，含两个潜在的N -糖基化位点。成熟IL-6由疏水N末端28个氨基酸残基信号肽裂解产生，含184氨基酸残基，其中有四个半胱氨酸残基，分子量为21 kDa。在氨基酸水平上，人IL-6与小鼠IL-6具有42％的同源性，人的IL-6对小鼠某些细胞有刺激作用。人IL-6基因位于第7号染色体，长约5 kb，此细胞因子基因由5个外显子和4 个内含子组成。IL-6与G-CSF和IFN-β有较高同源性，对骨髓造血细胞和髓样白血病细胞的某些作用也有相似之处。
IL-6由多种细胞产生，对免疫应答、急性期反应、造血和神经系统有多方面作用。IL-6的生物学活性主要包括调节免疫应答、调节造血系统、诱导急性期蛋白、调节肿瘤生长、调节神经内分泌系统和其它6个方面。
IL-6与临床上多种疾病的发生均有关系。与自身免疫性疾病，肿瘤均有密切的关系。IL-1和TNF-α对IL-6引起的病理损伤可能有协同作用。应用IL-6治疗由放疗、化疗所致血小板减少症并且作为疫苗佐剂已进入临床试验。
本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法检测样品中人 IL-6 浓度。在人 IL-6 单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品，其中的 IL-6 会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人 IL-6 抗体，抗人 IL-6 抗体与结合在单抗上的人 IL-6 结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有 IL-6，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色；加终止液变为黄色。在 450 nm 下测 OD 值，人 IL-6 浓度与 OD 450 值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出样品中人 IL-6 浓度。

说明书：

 UE-H6132S/H6132M/H6132L    
常见问题解答：

◆背景信号强是什么原因？
1.洗板不充分。将洗涤缓冲液加入孔中洗涤，确保孔区域洗涤充分；确保已在洗涤前弃去所有残留抗体溶液；增加洗涤次数。
2.链亲和素-HRP结合物过量。检查偶联物的稀释度，在推荐的稀释度下使用。
3.封闭不充分。检查封闭液；延长封闭时间。
4.孵育时间过长。缩短孵育时间。
5.样品或标准品中含干扰物质。设置对照。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

◆没有信号？
1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验；检查试剂配制方法；复核试验试剂添加流程。
2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。
3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量；增加抗体用量（浓度）。
4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。
5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

◆整块板呈现规则蓝色？
1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。
2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。
3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。
4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。

◆标准曲线差？
1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。
2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。
4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。
5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。
6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。