上海金畔生物科技有限公司代理UELANDY荧光染料全系系列产品
小鼠白细胞介素10 ELISA试剂盒（Mouse IL-10 ELISA KIT）
产品货号: M6141S/M6141M/M6141L
产品规格: 24T/48T/96T
目录价（元）:952/1587/2698
推荐仪器：酶标仪
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产品概述：
储存条件
4℃避光保存，有效期见外包装。开封后，保存温度详见说明书。
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组分 规格
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24T |
48T |
96T |
使用方法 |
开封后保存条件 |
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A. 标准品 |
1000 pg |
1000 pg |
2×1000 pg |
按说明书进行稀释 |
-20℃可存放一月 |
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B. 标准稀释液 |
16 mL |
16 mL |
16 mL |
即用型 |
4℃可存放一月 |
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C. 浓缩生物素化抗体（100×） |
30 μL |
60 μL |
2×60 μL |
按说明书进行稀释 （现配现用） |
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D. 生物素化抗体稀释液 |
16 mL |
16 mL |
16 mL |
即用型 |
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E. 浓缩酶结合物（避光 100×） |
30 μL |
60 μL |
2×60 μL |
按说明书进行稀释 （现配现用） |
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F. 酶结合物稀释液 |
16 mL |
16 mL |
16 mL |
即用型 |
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G. 浓缩洗涤液（20×） |
16 mL |
16 mL |
25 mL |
即用型 |
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H. 显色剂（避光） |
6 mL |
6 mL |
12 mL |
即用型 |
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I. 终止液 |
12 mL |
12 mL |
12 mL |
即用型 |
4℃或常温保存 |
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J. 预包被96孔板 |
8×3 |
8×6 |
8×12 |
即用型 |
密封干燥4℃保存 |
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K. 封板胶纸 |
1张 |
2张 |
4张 |
即用型 |
注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
产品介绍
Mouse IL-10 ELISA Kit (Mouse Interleukin-10 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即小鼠白细胞介素 10 ELISA 试剂盒，可以定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 IL-10 浓度。
白细胞介素 10 是一种多效性细胞因子，可以在多种类型细胞中发挥免疫抑制或免疫刺激的作用。小鼠，大鼠和人 IL-10 cDNA 序列均含 178 个氨基酸残基，内含 18 个氨基酸残基的信号肽序列。成熟 IL-10 分子为 160 氨基酸残基，小鼠和人 IL-10 分子中分别含 5 个和 4 个半胱氨酸残基，分子量为 35-40 kDa。小鼠和人 IL-10 基因都定位于第 1 号染色体，其基因组包括 5 个外显子和 4 个内含子。小鼠和人 IL-10 在 DNA 和氨基酸水平上分别有 81％和 73％的同源性。人 IL-10 可作用于小鼠源性细胞，而小鼠 IL-10 对人的细胞则无交叉反应。
IL-10 可以抑制小鼠 Th1 细胞的增殖以及 IL-2、IL-3、IFN-γ、TNF 以及 GM-CSF 等细胞因子合成；有效调节单核/巨噬细胞功能；促进肥大细胞和胸腺细胞增殖；协同 IL-2 诱导 ConA 活化脾细胞中 CTL 前体细胞(CTLp)分化为成熟的 CTL；提高 B 细胞的存活率，促进 B 细胞的增殖、MHCⅡ 类抗原表达以及 Ig 的分泌，并与 Th2 所产生的 IL-4、IL-5 有协同作用；抑制 NK 细胞因子的产生等。IL-10 的拮抗剂可能具有抗 EB 病毒的作用；而 IL-10 通过促进单核细胞表达 IL-1ra 有可能成为抗炎症的治疗手段，动物实验表明，IL-10 可有效地避免 LPS 诱导小鼠休克而造成的死亡。
本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法检测样品中小鼠 IL-10 浓度。在小鼠 IL-10 单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品，其中的 IL-10 会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗小鼠 IL-10 抗体，抗小鼠 IL-10 抗体与结合在单抗上的小鼠 IL-10 结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有 IL-10，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色；加终止液变为黄色。在 450 nm 下测 OD 值，小鼠 IL-10 浓度与 OD 450 值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 IL-10 浓度。
说明书：
UE-M6141S/M6141M/M6141L
常见问题解答：
◆背景信号强是什么原因？
1.洗板不充分。将洗涤缓冲液加入孔中洗涤，确保孔区域洗涤充分；确保已在洗涤前弃去所有残留抗体溶液；增加洗涤次数。
2.链亲和素-HRP结合物过量。检查偶联物的稀释度，在推荐的稀释度下使用。
3.封闭不充分。检查封闭液；延长封闭时间。
4.孵育时间过长。缩短孵育时间。
5.样品或标准品中含干扰物质。设置对照。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。
◆没有信号？
1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验；检查试剂配制方法；复核试验试剂添加流程。
2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。
3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量；增加抗体用量（浓度）。
4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。
5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。
◆整块板呈现规则蓝色？
1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。
2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。
3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。
4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。
◆标准曲线差？
1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。
2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。
4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。
5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。
6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。