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人白细胞介素10 ELISA试剂盒（Human IL-10 ELISA KIT）

产品货号: H6126S/H6126M/H6126L

产品规格: 24T/48T/96T

目录价（元）:952/1587/2698

推荐仪器：酶标仪

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产品概述：
储存条件
4℃避光保存，有效期见外包装。开封后，保存温度详见说明书。

注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。

产品介绍
Human IL-10 ELISA Kit (Human Interleukin-10 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人白细胞介素 10 ELISA 试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 IL-10 浓度。
白细胞介素 10 又称细胞因子合成抑制因子(CSIF)，是一种多效性细胞因子，可以在多种类型细胞中发挥免疫抑制或免疫刺激的作用。人，大鼠和小鼠 IL-10 cDNA 序列均含 178 个氨基酸残基，内有 18 氨基酸信号肽序列，成熟 IL-10 分子为 160 氨基酸残基，小鼠和人 IL-10 分子中分别含 5 个和 4 个半胱氨酸残基，分子量为 35-40 kDa。小鼠和人 IL-10 基因都定位于第 1 号染色体，其基因组包括 5 个外显子和 4 个内含子。人和小鼠 IL-10 在 DNA 和氨基酸水平上分别有 81％和 73％的同源性。人 IL-10 可作用于鼠源性细胞，而小鼠 IL-10 对人的细胞则无交叉反应。
在人类，某些 CD4+T 细胞克隆、来自 AIDS 病人 B 细胞系、EBV 感染的淋巴母细胞、Burkitt 氏淋巴瘤、活化单核细胞、外周血 T 细胞均可产生 IL-10。IL-10 的拮抗剂可能具有抗 EB 病毒的作用，而 IL-10 通过促进单核细胞表达 IL-1ra 有可能成为抗炎症的治疗手段，动物实验表明，IL-10 可有效地避免 LPS 诱导小鼠休克而造成的死亡。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中人 IL-10 浓度。在人 IL-10 单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品，其中的 IL-10 会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人 IL-10 抗体，抗人 IL-10 抗体与结合在单抗上的人 IL-10 结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有 IL-10，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色；加终止液变为黄色。在 450 nm 下测 OD 值，人 IL-10 浓度与 OD 450 值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出样品中人 IL-10 浓度。
说明书：

 UE-H6126S/H6126M/H6126L    
常见问题解答：

◆背景信号强是什么原因？
1.洗板不充分。将洗涤缓冲液加入孔中洗涤，确保孔区域洗涤充分；确保已在洗涤前弃去所有残留抗体溶液；增加洗涤次数。
2.链亲和素-HRP结合物过量。检查偶联物的稀释度，在推荐的稀释度下使用。
3.封闭不充分。检查封闭液；延长封闭时间。
4.孵育时间过长。缩短孵育时间。
5.样品或标准品中含干扰物质。设置对照。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

◆没有信号？
1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验；检查试剂配制方法；复核试验试剂添加流程。
2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。
3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量；增加抗体用量（浓度）。
4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。
5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

◆整块板呈现规则蓝色？
1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。
2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。
3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。
4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。

◆标准曲线差？
1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。
2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。
4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。
5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。
6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。