上海金畔生物科技有限公司代理UELANDY荧光染料全系系列产品
小鼠白细胞介素17A ELISA试剂盒（Mouse IL-17A ELISA KIT）
产品货号: M6144S/M6144M/M6144L
产品规格: 24T/48T/96T
目录价（元）:952/1587/2698
推荐仪器：酶标仪
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产品概述：
储存条件
4℃避光保存，有效期见外包装。开封后，保存温度详见说明书。
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组分 规格
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24T |
48T |
96T |
使用方法 |
开封后保存条件 |
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A. 标准品 |
250 pg |
250 pg |
2×250 pg |
按说明书进行稀释 |
-20℃可存放一月 |
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B. 标准稀释液 |
16 mL |
16 mL |
16 mL |
即用型 |
4℃可存放一月 |
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C. 浓缩生物素化抗体（100×） |
30 μL |
60 μL |
2×60 μL |
按说明书进行稀释 （现配现用） |
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D. 生物素化抗体稀释液 |
16 mL |
16 mL |
16 mL |
即用型 |
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E. 浓缩酶结合物（避光 100×） |
30 μL |
60 μL |
2×60 μL |
按说明书进行稀释 （现配现用） |
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F. 酶结合物稀释液 |
16 mL |
16 mL |
16 mL |
即用型 |
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G. 浓缩洗涤液（20×） |
16 mL |
16 mL |
25 mL |
即用型 |
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H. 显色剂（避光） |
6 mL |
6 mL |
12 mL |
即用型 |
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I. 终止液 |
12 mL |
12 mL |
12 mL |
即用型 |
4℃或常温保存 |
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J. 预包被96孔板 |
8×3 |
8×6 |
8×12 |
即用型 |
密封干燥4℃保存 |
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K. 封板胶纸 |
1张 |
2张 |
4张 |
即用型 |
注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
产品介绍
白细胞介素17，也被称为细胞毒性T淋巴细胞相关抗原8（CTLA-8），是二硫键相连的分子量为34 kDa的糖蛋白，主要由激活的小鼠αβTCR+CD4-CD8-胸腺细胞或人的CD4+记忆性T细胞产生。白细胞介素17家族（Interleukin 17 family，IL-17家族），是与白细胞介素17具有较高同源性、在脊椎动物进化中高度保守的一组蛋白质，目前共有六个成员，IL-17A（原IL-17）、B、C、D、E和F。其中，IL-17B、C、D、E、F的编码基因，是在人类基因组大规模测序过程中，通过同源性分析、EST序列拼接得到的。
已经检测到IL-17R在几乎所有细胞和组织中均可表达，其中包括NK细胞、巨噬细胞、肥大细胞、前B细胞、成纤维细胞、胎肝细胞和肠上皮细胞。
IL-17具有多种生物学效应。在体外，它可以诱导粘附细胞（如成纤维细胞、角质形成细胞、巨噬细胞、上皮细胞和内皮细胞）释放的一些炎症和/或造血细胞因子（包括TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、LIF、G-CSF、MCP-1）。IL-17还可以上调人类关节中的软骨细胞产生氧化亚氮；诱导ICAM-1在成纤维细胞表面的表达，激活成纤维细胞和软骨细胞中的在体内，IL-17可刺激小鼠血细胞生成和中性粒细胞。根据IL-17在体外和体内的生物学效应可推测：IL-17是T细胞依赖的炎症反应的一种重要调节剂。IL-17也可能是一种重要的连接免疫系统和造血作用的T细胞衍生介质。
目前研究发现IL-17与机体多种疾病相关，特别是肺部感染、哮喘、类风湿性关节炎、器官移植、肠道炎症等炎症性疾病关系密切。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中小鼠IL-17A浓度。在小鼠IL-17A单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品，其中的IL-17A会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗小鼠IL-17A抗体，抗小鼠IL-17A抗体与结合在单抗上的小鼠IL-17A结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有IL-17A，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色；加终止液变为黄色。在450 nm下测OD值，小鼠IL-17A浓度与OD 450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠IL-17A浓度。
说明书：
UE-M6144S/M6144M/M6144L
常见问题解答：
◆背景信号强是什么原因？
1.洗板不充分。将洗涤缓冲液加入孔中洗涤，确保孔区域洗涤充分；确保已在洗涤前弃去所有残留抗体溶液；增加洗涤次数。
2.链亲和素-HRP结合物过量。检查偶联物的稀释度，在推荐的稀释度下使用。
3.封闭不充分。检查封闭液；延长封闭时间。
4.孵育时间过长。缩短孵育时间。
5.样品或标准品中含干扰物质。设置对照。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。
◆没有信号？
1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验；检查试剂配制方法；复核试验试剂添加流程。
2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。
3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量；增加抗体用量（浓度）。
4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。
5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。
◆整块板呈现规则蓝色？
1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。
2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。
3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。
4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。
◆标准曲线差？
1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。
2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。
4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。
5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。
6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。