新冠肆虐两年,一波还未平息,一波又来侵袭,唯有预防和治疗齐头并进,才能适当抑制疫情的发展。相较于传统疫苗,mRNA疫苗有诸多优势。mRNA疫苗是一种新型的、预防传染病和慢性病的疫苗, mRNA疫苗可以让我们的细胞制造一种蛋白质,甚至只是蛋白质的一小部分,来触发免疫反应,它潜力无限。
如下图所示,mRNA疫苗是将外源靶抗原的基因序列通过转录、合成等工艺制备的mRNA通过特定的递送系统导入机体细胞,通过在体内表达目的蛋白,刺激机体产生特异性免疫学反应,从而使机体获得免疫保护的一种核酸制剂。然而所有与RNA相关的生物试验都会涉及到RNase的污染及RNA降解的预防问题,并且少量的RNase污染就会严重影响后面的实验结果。
mRNA疫苗质量控制
在mRNA疫苗的生产过程中以及任何生物制剂产品中,质量控制都是非常严格的!以mRNA制备为例,在转录模板中的杂质就有很多,如质粒DNA抽提过程中残留的RNaseA、宿主菌DNA、宿主菌RNA和宿主蛋白等,它们都会显著影响体外转录反应和转录mRNA的质量,需对模板的纯度进行严格的把关。在体外转录的过程中杂质的污染也会极大地影响mRNA疫苗的安全性和效力,例如被引入人体细胞的双链RNA和DNA-RNA杂交分子等能被细胞模式识别受体识别触发先天免疫反应,诱导I型干扰素的表达,降低蛋白质的翻译。研究证明,去除mRNA制备物中的污染物会降低先天免疫反应,并导致体外报告蛋白表达水平显著提高。
RNase-ExitusPlus™
在mRNA疫苗的生产以及其他与mRNA相关的生物制品中,RNase污染的清除尤为重要,德国Applichem研发的RNase-ExitusPlus™是一种非碱性、无腐蚀性且无致癌性的新型RNase清除液,它对RNase污染物具有很好的清除性能,是适用于任何表面的即用型RNase污染清除液,可用于实验室表面的清洁,如实验操作台、电泳设备、移液器和反应管等。
清除剂的独特优势
- 简便性:使用后便开始去污,在清除剂完全干燥之前(10~15分钟后)将其擦掉即可,之后无需再用无菌水清洗;
- 高效性:试剂中的有效成分,通过催化和协同作用,使蛋白质和RNase分子迅速失活,实现RNase的高效非酶降解;
- 安全性:不含腐蚀性无机酸或碱性物质,不会损坏或腐蚀设备和材料,仅含有低浓度的酒精,不会对仪器、设备、器材、人体造成影响和伤害;
- 无污染:所有组分可生物降解、不会造成环境污染和破坏。
使用方法:
- 喷(适用于实验操作台表面/手套等)
直接将RNase-ExitusPlus™喷到操作台表面作用10~15分钟,无菌湿布擦拭后即可,无需用水冲洗;
- 擦(适用于仪器表面,剪刀,镊子等工具)用布或纸巾蘸取适量 RNase-ExitusPlus™擦拭表面,充分作用后再用干净湿布擦一遍即可;
- 泡(适用于移液器等其他拆卸的细小部件)置于RNase-ExitusPlus™中浸泡1min,然后用清水冲洗干净晾干后安装即可;
小贴士
- 升温至50度可提高反应速度;
- RNase-ExitusPlus™为德国Applichem注册商标
处理效果
将干燥的RNase A放入反应管的样品1、3和4。然后,RNase A 样品用1ml的 H2O(3,4) 或RNase-ExitusPlus™ (1)处理,室温下放置5分钟。紧接着用1ml的无菌水清洗两次。然后在每个管子里放入从大肠杆菌得到的RNA 5ug。将10ug的新鲜分装RNase A添加到管4中,所有管在37° c孵育30分钟。5ug未处理的从大肠杆菌得到的RNA作为对照(C)。最后,加入缓冲液和将样本加入 1%琼脂糖凝胶电泳检测。
产品信息
产品名称 |
货号 |
规格 |
A7153.0500 |
500ml |
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A7153.1000RF |
1L |
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A7153.2500RF |
2.5L |
PanReac Applichem是欧洲生物化学试剂与制药原辅料生产商,ITW成员公司,已成为全球科研、知名CRO企业、大型制药、诊断、食品、化妆品等工业的重要供应商。全面提供细胞培养级、符合各国药典等生物制药上下游系列生物化学试剂,cGMP生产的原辅料。Applichem公司产品种类众多,覆盖领域广泛,产品级别丰富,性价比超高,包括实验室污染防治系列、实验室常用生化试剂、生物制药行业药典级与细胞培养级试剂,以及诊断研发工业中天然蛋白、酶、辅酶和底物等。
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