您是否还在为PCR假阳性结果发愁?找不到原因?状况得不到改善?
试试DNA-ExitusPlus吧!
随着分子生物学的发展,PCR技术操作方便,灵敏度高,所以被广泛使用到分子遗传各种研究中,但是也正由于其极高的灵敏度,使得微量的核酸污染便可造成PCR假阳性结果。而现今,分子克隆实验广泛应用,裸露的核酸片段无处不在,尤其是气溶胶中的核酸污染如果得不到有效抑制和清除,PCR假阳性结果就会愈演愈烈,导致材料,时间,人力和财力的大量浪费和损失,如何克服核酸污染现已成为急需解决的问题。
传统的DNA污染清除多通过修饰,酶解变性、沉淀等几种方式,但仍然存在无法彻底破坏DNA分子、试剂具有腐蚀性或者毒性等不足。
方式 |
原理 |
不足 |
酒精擦拭 |
将核酸沉淀,擦拭后保证污染表面污染得到一定程度缓解 |
核酸片段本身没有变化,仍然存在导致气溶胶污染的可能性;细小孔径器材无法清除 |
修饰 |
标记遗传物质,阻止聚合酶与核酸的结合,从而抑制DNA扩增 |
这种标记均为可逆反应,一旦发生去修饰反应即可被聚合酶结合;试剂可能具有不安全影响 |
酶解 |
酶可将长链的核酸分子降解成小片段 |
降解的核酸中仍有大片段存在,具有完整的遗传信息,可通过PCR扩增出完整的片段 |
高压变性 |
高压可将核酸降解成20~30bp的小片段 |
仅适用于耐高压材料,更无法应用实验操作台和大型的实验设备 |
紫外照射 |
PCR产物中嘧啶碱基会形成二聚体,延伸终止, |
仅对500bp以上长片段有效,对短片段效果不大,且并不是DNA链中所有嘧啶均能形成二聚体,且UV照射还可使二聚体断裂 |
德国AppliChem独家研发的DNA-ExitusPlus是一种无腐蚀、无致癌性的高效核酸污染清除溶液,该产品可将裸露的核酸完全降解至无法作为扩增模板的小片段,并无法恢复,从而彻底消除了PCR过程中由于非目的核酸模板而导致的假阳性扩增。
DNA-ExitusPlus特点:
- 高效性:试剂中各组分协同催化作用,能快速、非序列特异性不可逆的降解核酸污染;
- 使用简单:喷洒或浸泡处理10-15分钟即可完成清除作用,升温至50度可提高反应速度;
- 安全无毒害:产品为非酶类试剂,且仅对裸露核酸有非常好的清除效果,不会对人体造成影响和伤害;
- 无污染:所有组分可生物降解、不会造成环境污染和破坏;
- 无腐蚀性:不含有机溶剂或者挥发性物质,不含无机酸或者碱性物质,通过严格腐蚀性测试,不会对金属形成腐蚀。
使用方法:
1. 实验操作台表面
直接将DNA-ExitusPlus喷到操作台表面作用10~15分钟,无菌湿布擦拭后即可,无需用水冲洗;
2. 仪器表面
用布或纸巾蘸取适量 DNAExitusPlus擦拭仪器表面,充分作用后再用干净湿布擦一遍即可。一些小的部件可在DNA-ExitusPlus中浸泡10min左右,然后用清水冲洗、晾干;
3. 塑料及玻璃器皿
向容器中加入足量的DNA-ExitusPlus,摇晃以确保器皿内壁全部接触到溶液,充分作用后弃去溶液晾干,用蒸馏水冲洗干净晾干即可;
4. 移液器
遵照移液器说明拆取移液器的管嘴连件,置于DNA-ExitusPlus中浸泡1min,然后用清水冲洗干净晾干便可安装到移液器上;
5. 解剖刀、镊子等实验器材
先用蘸有DNA-ExitusPlus的布擦拭一遍,然后将镊子等器材于DNA-ExitusPlus中浸泡10min以上,也可通过加热到50~60℃缩短处理时间;
6. 手臂、手套等
直接将Derma-ExitusPlus(A8740)对准手臂或手套进行喷雾至全部湿润,作用3~4min即可。
系列产品订购指南
货号 |
品名 |
用途 |
规格 |
A7089 |
DNA-ExitusPlus |
环境中核酸污染清除 |
250ml/500ml/1L |
A7409 |
DNA-ExitusPlus IF(无指示剂) |
250ml/500ml/1L |
|
A8740 |
Derma-ExitusPlus(通过皮肤测试) |
处理手,手臂,手套等 |
250ml |
此产品与方法已得到全球知名杂志与科研工作者的认可,代表性的文章如下:
(1) Esser, K.-H. et al. (2006) DNA decontamination: DNA-ExitusPlus in comparison with conventional reagents. Nature Methods 3, 151
(2) Arena, A. (2010) DNA exitus plus™ versus standard bleach solution for the removal of dna contaminants on work surfaces and tools. Investigative sciences journal 2, 20-29
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