DNase I,即Deoxyribonuclease I,中文名称为脱氧核糖核酸酶I,是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5′端为磷酸基团,3′端为羟基。
DNase I活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。
产品信息:
品牌 |
货号 |
品名 |
规格 |
AppliChem |
A3778,0050 |
DNase I |
50mg |
AppliChem |
A3778,0100 |
DNase I |
100mg |
AppliChem |
A3778,0500 |
DNase I |
500mg |
AppliChem |
A3778_0010 |
DNase I |
10mg |
保存温度:-20℃,室温运输。
应用:DNase I 是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶,可用于降解单链或双链DNA
用于无DNA污染的RNA的制备,逆转录及体外转录等实验。
产品信息:M=~31000g/mol;CAS-NO:9003-98-9
性状:冻干粉
配置方法:溶解在150 mM 5毫克/毫升生理盐水,工作液为无色透明状。
特点:不含RNase(RNase free),可以用于各种RNA样品的处理。
用途:制备不含DNA的RNA样品;RT-PCR反应前RNA样品中去除基因组DNA等可能的DNA污 染;体外T7, T3, SP6等RNA Polymerases催化的RNA转录后去除DNA模板; DNase I footprinting研究DNA-蛋白质相互作用;缺口平移(nick translatioin);产生DNA随机片断文库;细胞凋亡TUNEL检 测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。
来源:牛胰腺纯化得到。
分子量:约31kDa。
活性检测条件:40mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgSO4,1mM CaCl2,1μg of pBR322 DNA。
纯度:不含其它DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
酶储存溶液:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X):100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃),25mM MgCl2,1mM CaCl2。
失活或抑制:加入EDTA至终浓度为2.5mM后,65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%的SDS,DTT、巯基乙醇等还原 剂,50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。
注意事项:
如需对酶进行稀释,可以用酶储存液(50mM Tris-acetate(pH 7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)glycerol)进行稀释。
酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。