腺病毒纯化——Cell Biolabs腺病毒提取纯化试剂盒

近年来,改进的重组腺病毒载体在基因治疗上迅速流行,因为他们没有免疫原性,宿主范围光,并可实现长期的转基因表达。在宿主细胞扩增之后的腺病毒纯化是一个关键的步骤。当表达载体在辅助载体的帮助下去感染包装细胞系,并产生重组的腺病毒颗粒后,一些病毒颗粒会裂解细胞并释放到培养液上清中,还有一些仍然会保留在细胞里,因此需要对上清及细胞进行处理和纯化以获得纯的感染性腺病毒颗粒。

常规的腺病毒纯化一般采用CsCl超速密度离心法(利用不同大分子,如DNA、蛋白、病毒颗粒、细胞碎片等具有不同的密度进行梯度离心而分离出来的原理)分离病毒颗粒,但是耗时耗力。Cell Biolabs的大部分纯化试剂盒都采用了新颖的专利ViraBind™技术,力求使用最前沿的技术为客户提供最完美的解决方案。Cell Biolabs为腺病毒纯化提供了两种不同的纯化方案,一种使用离心柱,一种是注射器样的透析柱(注:腺病毒纯化均未采用Matrix胶吸附,而是采用了新型的纯化装置,因此操作时间上只需要30分钟),常规离心即可。

其中小提(Miniprep)试剂盒,即离心柱式纯化如下,Kit包括以下4个组分:收集管收集柱、Loading缓冲液、洗液、洗脱液。无需超速离心,只通过一般实验室的常规离心(2000g)小提腺病毒。超过90%的回收率,但是只需要30min即可完成,一次可以提纯T75培养瓶或10cm培养皿内的感染细胞,最多可获得1×1011个病毒颗粒,可进行10次提取。

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ViraBind™ Adenovirus Miniprep Kit VPK-099 一次最多获得1×1011个病毒颗粒,10次纯化

还有一种是注射器式滤器纯化,又可分为中提和大提系列,每次分别可以用来纯化获得2.5×1012和2.5×1013病毒颗粒(大概相当于40和400个T75培养瓶的感染细胞),分别能进行10次和1次纯化;回收效率很高,超过90%。Kit内包括纯化滤器、洗液、洗脱液、再生液共4样组分,该Kit与上述Miniprep小提Kit基本类似,只不过是使用了注射器样的滤器装置用于更快速和大量的纯化,无需离心。整个操作只需要30分钟,无需离心设备。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
ViraBind™ Adenovirus Purification Kit VPK-100 每次最多提取纯化2.5 x 1012 VP或4个T75皿,可纯化10次
ViraBind™ Adenovirus Purification Mega Kit VPK-101 每次最多提取纯化2.5 x 1013 VP或40个T75皿,可纯化1次

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供全套的腺病毒技术解决方案,RAPAD®腺病毒表达系统有多种样式供您选择,还有预装有多种重组基因的腺病毒供您直接使用,ViraBind™腺病毒小提及中提大提试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的腺病毒,Cell BioLabs还有转为腺病毒载体用的293AD细胞及高效转染试剂供您选择,如果您对腺病毒产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺病毒相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。