ISOHAIR

ISOHAIR 100次用量

　　从人的毛发及指甲提取DNA 是法医领域一项非常重要的技术。该技术可以简单迅速地提取DNA，从分子生物学领域来说，与至今一直使用的血液及组织等主要实验材料相比，受病毒感染的可能性较低，获得实验材料途径简单。

　　ISOHAIR是从人毛发、指甲提取DNA的试剂盒。毛发及指甲的主要成分角蛋白，难以分解，完全溶解毛发必须使用含有一般蛋白质分解酶缓冲剂，进行长时间的孵化。本产品只需30分钟左右，即可完全溶解毛发。操作简单，而且总时间仅需1小时左右即可提取DNA。提取人基因组DNA也非常方便。此外，本产品亦可用于提取小鼠体毛及指甲DNA。

◆特点

　

•　可从人的毛发及指甲提取 DNA

•　操作简单，提取 DNA 仅需１小时左右

•　亦可提取小鼠体毛及指甲DNA

◆产品列表

保存方法

冷冻保存（-20°C）

ISOHAIR （10回用、100回用）
产品	容量 （10次用量）	容量 （100次用量）	备注
Extraction Buffer	1 mL x 2	20 mL x 1	可能会有白色结晶析出，但是不影响品质。若有此情况出现，请进行50℃的热水浴，待结晶完全溶解后即可使用。
Enzyme Solution	100 µL x 1	1 mL x 1
Lysis Solution	80 µL x 1	0.8 mL x 1
Ethachinmate	20 µL x 1	0.2 mL x 1
3M Sodium Acetate (pH5.2)	200 µL x 1	2 mL x 1
TE (pH8.0)	200 µL x 1	1 mL x 2

◆使用实例

操作流程

◆实验数据

下表实例的详细情况请参考　ISOHAIR实验数据汇总（PDF 744 KB）。

[人 毛发]	1.    检测出线粒体 DNA 2.    检测出 p53 基因 3.    检测 MCT118 4.    使用 T4 gene 32 protein，缓和 PCR 阻碍 5.    从毛发提取到的 DNA 量 6.    毛发的部位及 DNA 量 7.    脱毛后经过时间及 DNA 量 8.    PCR 条件
[人 指甲]	1.    检测出线粒体 DNA 2.    检测出 p53 基因 3.    检测 MCT118
[小鼠 体毛]	1.    检测出线粒体 DNA 2.    检测出 p53 基因
[小鼠 指甲]	1. 　检测出线粒体 DNA 及 p53 基因
[人的毛发、指甲、口腔粘膜]	1. 　使用人的毛发、指甲、口腔粘膜进行实验的实例

◆备注

　　

•　本产品为实验研究用试剂。请勿用于医疗或其他用途。

•　感谢独立行政法人水产综合研究中心中央水产研究所　小林敬典老师的指导。

◆相关产品

　　•　发根提取DNA试剂盒　ISOHAIR EASY

　　•　教育用生物实验　ISOHAIR Jr.（ISOHAIR、PCR 试剂、琼脂糖电泳试剂套装）

　　•　酒精沉淀用共沉淀剂　Ethachinmate

　　•　缓冲剂　ddWater, TE(pH 8.0)

Q：　　DNA 提取试剂盒「ISOHAIR」与「ISOHAIR EASY」的区别是什么？

A：　　「ISOHAIR」与「ISOHAIR EASY」的区别如下表所示。ISOHAIR EASY 可从发根简单地提取 DNA，必须使用有发根的样品。

	ISOHAIR	ISOHAIR EASY
样品	・人毛发：      发根样本取毛发的发根处1 cm左右、毛干样本取发根样本的     前2～6 cm。（亦可使用自然脱落的毛发） ・人指甲：      使用指甲钳剪取指甲，再使用剪刀剪取边约1 mm的缘部分，     剪取2个（0.5 mg）左右。 ・小鼠体毛：     使用剪刀剪取一撮(约5 mg)体毛。 ・小鼠指甲：     剪取1～2 mm长度的指甲。    ＊使用新鲜的样品回收量更高。	・人的发根：     取发根处1.5 cm。（肉眼无法确认是否为发根的材料或自然     脱落的毛发可能无法提取足够的核酸。）
操作用时	・约１小时	・约 30 分钟
提取结果	・溶解毛发    左：第一次孵化后（55℃, 20 分）    右：第二次孵化后（ 55℃, 5～10 分）　＜完全溶解＞	・使用 ISOHAIR EASY 进行孵化时，肉眼看不出变化。   （肉眼看上去还没有溶解，实际上已有 DNA 析出）

Q：　　可以从牛毛提取 DNA 吗？

A：　　使用「ISOHAIR」提取牛（荷斯坦牛、黑毛和牛）的头顶部分的毛发根部１cm处的DNA，取提取到的DNA的1/2进行了琼脂糖凝胶电泳。

             成功提取了可用于 PCR 的 DNA。

　　　  ISOHAIR提取牛毛DNA（PDF 600KB）

参考文献

　　[ 1 ] Wilson, M. R. Polanskey, D. Butler, J., Dizinno, J. A. Replogle, J. and Budowle, B. BioTechniques, 18 (4), 662-669(1995)

　　[ 2 ] 笠井賢太郎,「蛋白质 核酸 酶」, 41 (5), 738-743(1996)

　　[ 3 ] 吉井富夫, 田村一雄, 石山いく夫,「日法医志」, 46 (5), 313-316(1992)

　　[ 4 ] Higuchi, R. von Beroldingen, C. H. Sensabaugh, G. F. and Erlish, H. A. NATURE, 332 (7), 543-546(1988)

　　[ 5 ] 吉井富夫, 田村一雄, 谷口高広, 秋山勝則, 石山いく夫,「日法医志」, 47 (4), 323-329(1993)

　　[ 6 ] Gill, P. Jeffreys, A. J. and Werrett, D. J. NATURE, 318 (12), 577-579(1985)

　　[ 7 ] 安積順一, 森田匡彦, 美作宗太郎, DNA多态性, 7, 26-28 (1999)

　　[ 8 ] 辻洋子, 西尾元, 松井清司, 鈴木広一, DNA多态性, 7, 29-33 (1999)